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朱平

作品数：21 被引量：87H指数：7
供职机构：解放军农牧大学军事兽医研究所更多>>
发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 20篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 14篇生物学
  • 11篇农业科学
  • 6篇医药卫生

主题

  • 9篇克隆
  • 9篇杆菌
  • 8篇毒素
  • 8篇梭菌
  • 8篇荚膜
  • 8篇Α毒素
  • 8篇产气荚膜梭菌
  • 7篇基因
  • 6篇细胞
  • 5篇单克隆
  • 5篇单克隆抗体
  • 5篇绿脓杆菌外毒...
  • 5篇绿脓杆菌外毒...
  • 5篇抗A
  • 5篇抗体
  • 4篇杂交瘤
  • 4篇杂交瘤细胞
  • 4篇杂交瘤细胞系
  • 4篇细胞系
  • 4篇基因克隆

机构

  • 21篇解放军农牧大...
  • 2篇河北师范大学
  • 2篇宁夏大学
  • 1篇白求恩医科大...

作者

  • 21篇朱平
  • 12篇许崇波
  • 12篇冯书章
  • 7篇刘晓明
  • 6篇孟锐奇
  • 5篇姚湘燕
  • 4篇刘子
  • 4篇郭学军
  • 3篇殷震
  • 3篇王玉炯
  • 2篇甄英凯
  • 2篇马丛林
  • 2篇赵宝华
  • 2篇王卓
  • 2篇王瑾琪
  • 1篇姚建忠
  • 1篇任晓燕
  • 1篇许崇波
  • 1篇张欣欣
  • 1篇黄培堂

传媒

  • 11篇中国兽医学报
  • 4篇卫生研究
  • 2篇细胞与分子免...
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇中国兽医科技
  • 1篇耳鼻咽喉（头...
  • 1篇面向21世纪...

年份

  • 7篇1999
  • 9篇1998
  • 3篇1997
  • 1篇1996
  • 1篇1994
共 21 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
产气荚膜梭菌β-毒素基因的克隆与核苷酸序列分析被引量：12
1998年
为了给产气荚膜梭菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）β毒素基因工程亚单位苗和细菌毒素多价基因工程苗的研制提供基因材料，用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，从Ｂ型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了９３０ｂｐ的β－毒素基因。用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ对ＰＣＲ产物进行双酶切处理，然后通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的载体质粒ｐＥＴ－２８Ｃ（＋）的多克隆位点，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切分析和ＰＣＲ扩增检测，证明重组质粒ｐＥＣＢ２中含有产气荚膜梭菌的β－毒素基因。经核苷酸序列分析，明确了克隆的β－毒素基因在重组质粒中的连接向位和阅读框架是正确的。
王玉炯许崇波冯书章朱平殷震
关键词：产气荚膜梭菌基因克隆核苷酸序列
绿脓杆菌外毒素A的纯化被引量：4
1996年
用绿脓杆菌ＰＡ１０３株接种于ＴＳＡ甘油培养基３２℃培养，产生绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ），经流水透析除盐、ＤＥ－５２纤维素阶段洗脱、硫酸铵分级沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５除盐、ＤＥ－５２纤维素梯度洗脱、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００分子筛层析，纯化了绿脓杆菌外毒素Ａ。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，纯化后的毒素为单一蛋白带，分子量约６６０００；对普通小鼠ＬＤ５０为０．２４μｇ蛋白。用ＰＥＡ抗血清作免疫印迹分析，进一步证实纯化的蛋白为ＰＥＡ，毒素约纯化了５００倍，总蛋白回收率约０．０２４％，毒素回收率约１１％。
刘晓明朱平刘子马从林
关键词：绿脓杆菌外毒素A纯化
抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与中和效应被引量：1
1998年
用提取的Ａ型产气荚膜梭菌α毒素包涵体免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合和克隆化，经ＥＬＩＳＡ筛选，共获得７株稳定分泌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，分别命名为１Ａ８、１Ｃ３、１Ｄ５、１Ｄ８、１Ｆ１、１Ｈ１和２Ｅ３。经鉴定，７株ＭｃＡｂ的Ｉｇ亚类有ＩｇＧ１（１Ｄ８）、ＩｇＧ３（１Ａ８、１Ｃ３和２Ｅ３）和ＩｇＭ（１Ｄ５、１Ｆ１和１Ｈ１）。细胞培养上清和腹水抗体效价分别为：１∶５１２～１∶１０２４和１∶１０６～１∶１０８。尤为重要的是，２Ｅ３杂交瘤细胞株分泌的ＭｃＡｂ不仅能够中和α毒素的磷脂酶Ｃ活性和溶血活性。
许崇波马从林朱平石瑾琪姚湘燕冯书章
关键词：A型产气荚膜梭菌Α毒素单克隆抗体
大肠杆菌耐热性肠毒素ST_1/K99/LacZ基因重组的研究被引量：1
1997年
将构建的ｐＢＳＴ２～６工程菌质粒用限制性内切酶ＢａｍＨＩ／ＢｇｌⅡ酶切，经琼脂糖凝胶电泳和电洗脱，回收１４７ｂｐ的目的ＳＴ１基因。随之将该基因分别重组到能有效表达Ｋ９９菌毛抗原和ＬａｃＺ酶的ｐＧＫ９９之Ｋ９９基因ＢｇｌⅡ位点和ｐＵＣ１８的ＢａｍＨＩ位点中。通过ＳＴ１基因探针菌落原位杂交、特定酶切分析及ＤＮＡ序列分析，筛选并鉴定出了理想重组子，从而构建出了能分别表达ＳＴ１融合基因产物的工程菌株ｐＳＫ２１９和ｐＸＳＴ１。
冯书章许崇波黄培堂刘子张喻虹刘晓明李丰生孟锐奇姚湘燕朱平
关键词：大肠杆菌基因重组
抗Ａ型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与中和效应
用提取的Ａ型产气荚膜梭菌α毒素包涵体免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞进行融合和克隆化，经间接ＥＬＩＳＡ筛选，共获得７株稳定分泌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，分别命名为１Ａ８、１Ｃ３、１Ｄ５...
许崇波朱平马丛林姚湘燕
关键词：Α毒素单克隆抗体
文献传递
抗A型产气荚膜梭菌α毒素mAb V_H和V_L基因的克隆与序列测定被引量：6
1999年
用提取的Ａ 型产气荚膜梭菌α毒素包涵体为免疫原， 制备了１ 株ｍＡｂ ２Ｅ３ 。其Ｉｇ 亚类为ＩｇＧ３， 细胞培养上清和腹水的ｍＡｂ 效价分别为１∶１０２４ 和１∶１０８ 。该ｍＡｂ ２Ｅ３ 可中和α毒素的磷脂酶Ｃ 活性和溶血活性， 对α毒素致死性腹腔攻击的小鼠具有良好的被动保护作用。另外， 应用ＲＴＰＣＲ 技术， 从杂交瘤细胞株２Ｅ３ 中， 扩增出ｍＡｂ ＶＨ 和ＶＬ基因， 分别克隆至载体ｐＧＥＭＴ中。序列分析证实， ＶＨ 基因为３５７ ｂｐ， 编码１１９ 个氨基酸；ＶＬ 基因为３２４ ｂｐ， 编码１０８ 个氨基酸。计算机分析表明，ＶＨ 和ＶＬ基因均为新发现的基因序列， 符合功能性重排的鼠抗体可变区基因的特征。ＶＨ 和ＶＬ 基因分别属于鼠免疫球蛋白重链Ⅱ（ Ｂ） 和轻链κⅢ家族。
许崇波赵宝华马从林朱平
关键词：Α毒素单克隆抗体基因克隆
重组绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白的初步复性及细胞生物学活性检测被引量：3
1998年
用逐步稀释透析法将纯化的大肠杆菌表达的重组绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）受体结合区蛋白初步复性，复性后的可溶性蛋白用于竞争抑制ＰＥＡ的细胞毒性实验。将１０μｇ／Ｌ的ＰＥＡ与其敏感细胞Ｌ９２９共孵育，３６ｈ左右可见细胞发生病变死亡，而同时加入复性的重组ＰＥＡ受体结合区蛋白的培养细胞孔与未加ＰＥＡ阴性对照培养细胞一样仍分裂增殖，这种ＰＥＡ细胞毒性抑制作用可持续到所有培养细胞老化死亡。结果表明，重组ＰＥＡ受体结合区蛋白可在体外竞争抑制ＰＥＡ对Ｌ９２９细胞的毒性。
刘晓明马丛林郭学军朱平王瑾琪甄英凯
关键词：绿脓杆菌外毒素A细胞毒性
表达CPB-ST融合蛋白工程菌株的免疫原性研究被引量：4
1998年
已构建的能表达产气荚膜梭菌β毒素（ＣＰＢ）和大肠埃希氏菌ＳＴ融合蛋白（ＣＰＢＳＴ）的基因工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３，ｐＥＣＢＳＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌株中提取的包涵体和经甲醛灭活的工程菌株全菌体制备抗原免疫小白鼠，攻毒试验结果表明，免疫小白鼠能分别抵抗１ＭＬＤ的Ｂ型产气荚膜梭菌强毒株（Ｃ５８－１）和产ＳＴ的大肠埃希氏菌工程菌株ＨＢ１０１（ｐＳＬＭ００４）的攻击。用灭活的全菌体免疫家兔后，其免疫血清能中和产气荚膜梭菌β毒素和大肠埃希氏菌ＳＴ的毒素活性。结果表明，构建的基因工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３，ｐＥＣＢＳＴ１）可以作为预防由产气荚膜梭菌β毒素和大肠埃希氏菌ＳＴ引起的幼畜腹泻的基因工程苗侯选菌株。
王玉炯许崇波冯书章朱平殷震
关键词：工程菌融合蛋白免疫原性
含绿脓杆菌外毒素A受体结合区重组蛋白的纯化被引量：5
1998年
将表达含绿脓杆菌外毒素（ＰＥＡ）受体结合区基因的质粒ｐＥＴ－ＥＡＢ转化到大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，经ＩＰＴＧ诱导表达了含ＰＥＡ受体结合区的重组蛋白（称ＰＥ３４）。ＰＥ３４主要以包涵体形式存在于大肠杆菌中，用溶菌酶－脱氧胆酸钠法结合超声波裂解法破碎细菌，离心制备包涵体。用２ｍｏｌ／Ｌ脲洗涤包涵体后，包涵体纯度可达７５％，在８ｍｏｌ／Ｌ脲存在条件下，ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００凝胶滤过，ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子交换层析纯化，获得ＳＤＳ－ＰＡＧＥ１条带的ＰＥ３４，纯度达９５．８％，得率为２４．５％。
刘晓明郭学军马从林朱平孟锐奇李吉平
关键词：绿脓杆菌外毒素A大肠杆菌包涵体纯化
重组绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白的初步复性及细胞生物学活性检测
1998年
用逐步稀释透析法将纯化的大肠杆菌表达的重组绿脓杆菌外毒素（ＰＥＡ）受体结合区蛋白初步复性，复性后的可溶性蛋白用于竞争抑制ＰＥＡ的细胞毒性实验。将１０ｎｇ／ｍｌ的ＰＥＡ与其敏感细胞Ｌ９２９共孵育，３６ｈ左右可见细胞发生病变死亡，而同时加入复性的重组ＰＥＡ受体结合区蛋白的培养细胞孔与未加ＰＥＡ阴性对照培养细胞一样仍分裂增殖，这种ＰＥＡ细胞毒性抑制作用可持续到所有培养细胞老化死亡。由此可见，重组ＰＥＡ受体结合区蛋白可在体外竞争抑制ＰＥＡ对Ｌ９２９细胞的毒性。
刘晓明马从林郭学军朱平王瑾琪甄英凯
关键词：细胞毒性
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