曹爱新
- 作品数:7 被引量:36H指数:4
- 供职机构:中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家质检总局科技计划项目上海市科委重大科技攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 应用TaqMan-MGB探针进行松材线虫的实时荧光定量检测技术研究被引量:13
- 2005年
- 松材线虫是国际公认的最重要的检疫性有害生物之一,也是我国2类检疫危险性有害生物,我国口岸多次从货物的木质包装中截获该线虫。由于松材线虫与拟松材线虫在形态上极其相似,难以区分,幼虫更无法用于鉴定。传统的形态学鉴定、生化以及其他分子技术等方法存在费时、准确度不高、灵敏度低等缺点,不易形成标准。我们设计筛选一对引物以及一条MGB探针,对松材线虫进行实时荧光PCR检测。建立了一条从1 pg到104pg标准曲线,相关系数r=0.965。该检测方法省时、准确、快速、无污染。
- 葛建军曹爱新刘先宝陈长法
- 关键词:松材线虫MGB
- 应用TaqMan探针进行马铃薯金线虫实时荧光PCR检测技术研究被引量:9
- 2009年
- 马铃薯孢囊线虫是全球性的植物检疫性线虫,亦是我国重点关注的有害生物。针对马铃薯金线虫ITS序列,设计了引物和TaqMan探针,使用15个马铃薯孢囊线虫群体和4个其他孢囊线虫样品进行验证,可高度灵敏地检测单个马铃薯金线虫的孢囊或幼虫,并可进行定量;最高检测灵敏度达到10fg;同时开展了混合样品和未知样品的检测,证明了引物的专化性和TaqMan探针的特异性。该检测方法可自动化检测马铃薯金线虫并进行定量,适合进行标准化的常规检测。
- 葛建军曹爱新陈洪俊Marice Moens
- 关键词:马铃薯金线虫分子检测实时荧光PCR
- 马铃薯金线虫检测用引物及探针
- 本发明提供了一种马铃薯金线虫检测用引物和探针,本发明还进一步提供了检测马铃薯金线虫的检测方法。本发明通过分析已报道马铃薯金线虫ITS序列的基础上,分别设计引物和荧光探针。所述的引物对由正向和反向引物组成,其核苷酸序列分别...
- 葛建军曹爱新赵文军朱水芳陈洪俊
- 文献传递
- 实时荧光PCR检测马铃薯白线虫技术研究被引量:5
- 2009年
- 马铃薯胞囊线虫是马铃薯上最重要的有害生物之一,也是我国特别关注的重要植物检疫性线虫。针对马铃薯白线虫ITS序列,我们设计了引物和TaqMan探针,使用15种马铃薯胞囊线虫群体和4种其它胞囊线虫样品进行验证,可高度灵敏地检测单个马铃薯白线虫的胞囊或幼虫,最高检测灵敏度达到10fg;同时开展了混合样品和未知样品的检测,证明了引物的专化性和TaqMan探针特异性。该检测方法可自动化检测马铃薯白线虫并进行定量,适合进行标准化的常规检测。
- 葛建军曹爱新陈洪俊Marice Moens
- 关键词:分子检测实时荧光PCR
- 实时荧光PCR技术在植物线虫诊断中应用被引量:3
- 2006年
- 定量荧光PCR技术发明以后,很快在生物学各个领域得到广泛应用,本文介绍了定量荧光PCR的种类、原理以及优缺点,详细论述定量荧光PCR在线虫检测研究中方法的建立以及应用,同时对实验中注意事项进行分析,最后对该技术在线虫研究中进一步应用进行展望。
- 葛建军曹爱新周国梁赵月3陈晨
- 关键词:定量PCR技术线虫
- 马铃薯金线虫检测用引物及探针
- 本发明提供了一种马铃薯金线虫检测用引物和探针,本发明还进一步提供了检测马铃薯金线虫的检测方法。本发明通过分析已报道马铃薯金线虫ITS序列的基础上,分别设计引物和荧光探针。所述的引物对由正向和反向引物组成,其核苷酸序列分别...
- 葛建军曹爱新赵文军朱水芳陈洪俊
- 文献传递
- 香蕉穿孔线虫双重PCR快速检测技术研究被引量:9
- 2007年
- 香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)是国际上公认的植物检疫性有害生物之一,是热带地区果树上最重要的线虫。通过设计的属水平上的特异性引物R1、R2(R1/2)和种水平上的特异性引物RS1、RS2(RS1/2)进行双重PCR扩增香蕉穿孔线虫,可扩增出长度为362和291 bp的2个特异性片段谱带。同时分别对检测体系中反应参数进行优化,最佳延伸温度为51.4℃,引物R1/2与RS1/2最佳浓度配比为0.2μm o.lL-1/1.2μmol.L-1,并测试检测引物的灵敏度,能进行有效检测的最低起始核酸量为100 pg;同时,也能对单条线虫进行检测以及样品中线虫的检测。专化性测试证明,2对引物能有效地进行香蕉穿孔线虫的快速分子诊断。
- 葛建军曹爱新周国梁赵国柱谢丙炎
- 关键词:香蕉穿孔线虫分子检测双重PCR