施建忠 作品数:126 被引量:260 H指数:9 供职机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 更多>>
两株H4N3禽流感病毒全基因组序列分析及对小鼠的致病性研究 被引量:4 2012年 2009年在我国南方活禽交易市场进行流行病学调查时,从鸭体内分离到2株H4N3亚型禽流感病毒(AIV),DK/FJ/S1419/09(H4N3)(FJ/419/2009)和DK/HUN/S1010/09(H4N3)(HuN/010/2009)。为了解这2株H4N3亚型AIV的生物学特性,本研究对其进行全基因组分析及对小鼠致病性研究。结果显示:其HA基因来源于近两年流行的H4亚型病毒株,NA基因来源于其它亚型病毒株。内部基因来源较复杂,与FJ/419/2009内部基因同源性最高的病毒株均来自国内H5、H6等亚型分离株,但与HuN/010/2009同源的内部基因则差异较大,与PA、M和NS同源性最高的病毒株分别为A/wild/duck/Korea/UP122/2007(H1N1),A/muscovy/duck/Thailand/CU-LM1983/2009(H4N6)and A/avian/Japan 8KI0068/2008(H3N6)。用106EID50病毒剂量感染6周龄BALB/c小鼠,结果显示试验组小鼠感染后第3 d采脏器样品,仅在鼻甲和肺部能检测到病毒存在。以上数据表明,尽管这2株H4N3特殊亚型组合病毒来源复杂,但对小鼠的致病性较低。 张文亮 张曦 朱占松 谭丹 崔鹏飞 施建忠 邓国华 陈化兰关键词:禽流感病毒 基因组分析 我国海关从越南旅客行李中截获禽蛋表面携带的H5N1亚型HPAIV特征 我国海关从越南旅客携带的45只鸡、鸭、鹅蛋壳冲洗物中应用实时RT-PCR方法检测禽流感阳性样品,经国家禽流感参考实验室(NAIRL)鸡胚接种检测分离到3株H5N1亚型禽流感病毒(AIV).序列分析发现3株病毒的8个基因片... 李雁冰 施建忠 齐巧玲 邓国华 李泽君 王秀荣 田国彬 陈化兰 林志雄关键词:H5N1亚型 RT-PCR方法 禽流感病毒 文献传递 网络资源链接 高效安全禽流感H5N1亚型灭活疫苗种毒株Re1的构建及其生物学特性和免疫原性研究 H5N1亚型禽流感病毒近年导致中国及东南亚地区的家禽和人感染、死亡,成为最重要的新发人畜共患传染病之一,疫苗免疫是控制本病的主要手段之一。本研究以对我国H5N1高致病力禽流感病毒流行分离株抗原性具广泛针对性的GD/1/9... 田国彬 李呈军 李雁冰 施建忠 冯菊艳 于康震 陈化兰关键词:禽流感 H5N1 疫苗株 文献传递 CHD9:一个新的与流感病毒PA蛋白相互作用的宿主因子 2012年 PA蛋白是禽流感病毒(AIV)聚合酶的组成部分,对AIV的复制具有重要作用。为鉴定家鸭体内与AIV PA蛋白相互作用的宿主蛋白,本研究利用酵母双杂交系统,以表达A/goose/Hubei/65/05(H5N1)AIV PA蛋白的重组质粒为诱饵,筛选家鸭脑组织cDNA文库,鉴定得到一个cDNA片段,经测序分析表明,该cDNA片段编码蛋白为色素域解旋酶DNA结合蛋白9(CHD9)。将重组诱饵质粒pDEST32-PA与捕获的鸭cDNA重组质粒共转化MaV203受体菌,进行X-gal显色反应检测,分析结果显示,菌落可以迅速变蓝,并且菌落在SC-Leu-Trp-His+3AT 3种营养缺陷培养基平板上生长良好。证明CHD9与PA蛋白在酵母双杂交系统中具有较强的相互作用。CHD9的初步鉴定为研究AIV在机体中的复制过程奠定了基础。 朱鹏阳 冯华朋 宋家升 李雁冰 施建忠 陈化兰关键词:宿主蛋白 宁夏部分地区野鸟携带病毒的宏基因组分析 被引量:3 2016年 为了解宁夏野鸟携带病毒的自然本底和多样性,发现潜在感染人或畜禽的病毒,本研究利用病毒宏基因组学技术对在宁夏石嘴山市、中宁市和青铜峡市采集的14种119只野鸟粪便样品进行了分析。提取全部样品核酸,经随机引物扩增后进行Illumina高通量测序,利用SOAPdenove软件将获得的32 385 000个读长(reads)拼接成163 192个重叠序列(Contig),再与NCBI病毒数据库中的序列进行比对,分析样本中病毒的种类及丰度。通过序列注释分析显示,0.4%重叠序列与病毒相关,能够进一步注释到19个病毒科,其中63%的病毒序列为噬菌体,33%的为脊椎动物病毒,3%的为昆虫病毒,1%的为植物病毒,在注释到的脊椎动物病毒中包含有禽流感病毒、札幌病毒等人畜共患性病毒。本研究结果丰富了野鸟携带病毒的基础数据资源,同时提示宁夏地区野鸟存在传播一些重要人兽共患病的潜在风险。 于春微 施建忠 王靖飞关键词:野鸟 高通量测序 含氯复方消毒剂对禽流感病毒灭活效果的研究 被引量:3 2005年 采用K le in-Defors悬浮灭活试验与鸡胚感染试验方法,对含氯复方消毒剂灭活H5N1和H9N2亚型禽流感病毒的效果进行了检测。结果,该含氯消毒剂在125 mg/L以上时,对两种禽流感病毒的杀灭率可达到99.99%以上。在实际应用中,推荐该消毒剂的使用浓度为有效氯167 mg/L。结论,该复方含氯消毒剂对两种禽流感病毒有很好的灭活效果。 施建忠 田国彬 李雁冰 冯菊艳 陈化兰关键词:含氯消毒剂 禽流感病毒 山西亚群H5N1亚型HPAIV对鸭及鸭胚的继代感染研究 被引量:2 2010年 2006年从山西省分离获得的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)曾引起免疫鸡群的大量死亡,与我国之前分离的病毒抗原差异性较大,称为"山西鸡型"抗原变异株。本研究应用该亚群代表毒株CK/SX/2/06(H5N1),研究该病毒对SPF鸭和鸭胚的致病性,并通过病毒在鸭和鸭胚内的连续传代,探讨该亚群病毒在鸭和鸭胚中的进化规律。结果表明,病毒对3周龄鸭呈低致病性,在各脏器中的复制能力较弱;鸭感染病毒后无明显临床症状,排毒水平较低并且不能感染同居鸭。病毒在3周龄鸭和10日龄鸭胚中分别继代感染3代和5代后,对3周龄鸭仍呈低致病性且HA基因未发生氨基酸位点变化。病毒不能致死3周龄鸭和1日龄雏鸭,但能致死10日龄~23日龄鸭胚,而且对鸭胚的致病性随着鸭胚日龄的增长逐渐减弱,致死鸭胚时间从对10日龄鸭胚24h致死到对23日龄鸭胚72h致死直至对25日龄鸭胚只感染但不致死。病毒对鸭呈低致病性且在鸭群传播中保持着基因水平和致病性上的相对稳定,对不同日龄鸭胚、1日龄和3周龄鸭致病性的不同表现,与目前存在于我国的其他亚群H5N1HPAIV对鸭致病性和进化特点上呈现出明显的差异,并对家禽养殖业存在威胁。 张翼 段振华 刘丽玲 施建忠 田国彬 曾显营 陈化兰 李雁冰关键词:禽流感病毒 鸭胚 一株H4亚型禽流感病毒全基因组序列测定及遗传演化分析 被引量:5 2011年 2008年对我国南方活禽市场进行流行病学监测时从鸭体内分离鉴定一株H4亚型禽流感病毒(AIV),命名为A/duck/Guangxi/912/2008(H4N2)(缩写为DK/GX/912/08)。为了解该株H4亚型AIV的来源、特征及其分子演化规律,本研究对其全基因序列进行测定,并与GenBank登录的相关病毒进行遗传演化分析。结果表明:DK/GX/912/08HA基因切割位点附近的氨基酸序列(PEKASR↓GLF)符合低致病力AIV的特征,其分子遗传演化关系属于东半球谱系的欧亚分支;NA基因与A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)在同一分支内,核苷酸同源性为98.1%;PB2基因与A/duck/Nanchang/4-165/2000(H4N6)处于同一分支;而NS基因与A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)同源性最高。因此,推测DK/GX/912/08可能是不同来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。 刘丽玲 李雁冰 张翼 段振华 施建忠 田国彬 曾显营 刘娣 华育平 陈化兰关键词:禽流感病毒 遗传演化分析 一种含碘消毒剂对禽流感病毒杀灭效果的研究 2004年 施建忠 田国彬 李雁冰 冯菊艳 陈化兰关键词:禽流感 病毒 粘蛋白 RNA病毒 正粘病毒科 禽流感病毒H5 HA和M基因双重荧光RT-PCR诊断方法的建立 引言H5亚型禽流感的爆发不仅给家禽养殖业带来了巨大的损失,同时也造成了人的死亡。因此,迫切需要一种快速、敏感、特异的分子检测方法来应用于H5亚型禽流感病毒(AIV)的诊断。荧光RT-PCR方法作为病毒快速诊断的有效工具,... 王秀荣 徐晓龙 马勇 包红梅 施建忠 曾显营 李雁冰 陈化兰