张晓霁
- 作品数:9 被引量:18H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- H1亚型猪流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA方法的初步建立
- 根据 GenBank 发表的 H1亚型猪流感 HA 基因序列设计引物,扩增出 HA 基因片段,将其克隆到 pFastBacGP67B 杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体 pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病...
- 万春和刘明刘春国张晓霁杨涛张云郭东春
- 文献传递
- H5N1禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及生物活性鉴定
- 经RT—PCR扩增了1株H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因(HA),将其克隆到pFastBacHTA载体上,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组载体,将其转化DH10Bac感受态细胞与杆状病毒转移载体(bacmid)进行转座,...
- 张晓霁刘明张云刘春国
- 关键词:H5N1杆状病毒表达
- H5N1亚型禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及其生物活性鉴定被引量:9
- 2007年
- 经RT-PCR扩增了H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因(HA)片段,限制性内切酶酶切后将其克隆到pFastBacHTA杆状病毒转座载体,经酶切鉴定及测序,筛选出阳性重组转座载体pFastBac-H5。将pFastBacH5转化含有杆状病毒穿梭载体(bacmid)的DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选和PCR鉴定获得重组杆状病毒穿梭载体rBacmid-H5。rBacmid-H5在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,SDS-PAGE蛋白电泳、Western blot、血凝试验和血凝抑制试验分析表明:分子量约63kDa重组血凝素蛋白(rH5)在sf9昆虫细胞中实现了高效表达。rH5具有血凝活性,而且其血凝活性能够被H5N1禽流感病毒高免血清所抑制;rH5免疫鸡诱导产生针对H5N1禽流感病毒亚型特异的血凝抑制抗体,说明表达的重组蛋白具有与天然蛋白相似的生物活性。
- 张晓霁刘明刘春国杨涛张云
- 关键词:血凝素基因杆状病毒
- H1亚型猪流感病毒血凝素基因在昆虫细胞中的表达及其间接ELISA方法的初步建立被引量:9
- 2008年
- 根据GenBank发表的H1亚型猪流感HA基因序列设计引物,扩增出HA基因片段,将其克隆到pFastBacGP67B杆状病毒载体上,筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67B-H1,转化含有杆状病毒穿梭载体(bacmid)的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体获得重组转座子(rBacmid-H1),在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒(rBV-H1),再感染细胞,收获目的蛋白。通过血凝试验、免疫印迹法、免疫组化分析表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物学活性。利用表达的蛋白作为猪流感间接ELISA的抗原,初步建立H1亚型猪流感的间接ELISA检测方法,并对内蒙古、辽宁和黑龙江等地送检的93份猪血清进行了检测,阳性率为31.18%,为研制开发快速、准确、简便的H1亚型猪流感鉴别诊断试剂盒奠定基础。
- 万春和刘明刘春国张晓霁杨涛刘大飞陈浩齐金龙乔传玲
- 关键词:血凝素基因间接ELISA
- H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白抗原性差异的研究
- 高致病力H5N1亚型禽流感的暴发不仅给世界养禽业造成巨大打击,而且给人类健康带来严重威胁,对于该病的防制具有重要的公共卫生学意义。疫苗免疫接种是防制高致病性H5N1亚型禽流感的重要手段,但禽流感病毒像所有的RNA病毒一样...
- 张晓霁
- 关键词:禽流感血凝素基因杆状病毒表达抗原性H5N1亚型
- 文献传递
- 流感病毒M2蛋白研究进展
- 目前,每年的流感流行都会造成世界范围内约有10%~20%的人感染流感病毒,其中约有300~500万人会产生严重症状,并可导致大约25~50万人的死亡,给整个人类社会带来很大的经济负担。目前的禽流感疫情更是引起全世界的关注...
- 万春和刘明刘春国张晓霁杨涛
- 文献传递
- H5N3亚型流感病毒细胞培养灭活疫苗的研究
- 刘明刘春国张云杨涛潘蔚绮刘超男张晓霁
- H5N3细胞苗的研制填补了禽流感防制的一项空白,该研究居国际先进水平。查新结果表明,利用反向遗传学技术构建全部基因都来自禽流感病毒的重组禽流感细胞疫苗株为国际上首次报道。rH5N3油乳剂灭活细胞苗免疫持续期和对强毒攻击保...
- 关键词:
- 关键词:禽流感细胞培养疫苗
- 禽流感分子标记疫苗
- 刘明张云刘春国杨涛潘蔚绮刘超男张晓霁
- 该研究采用流感病毒反向遗传学技术克隆了禽源高产流感病毒A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)的全部内部基因片段,构建了相应的转录/表达载体;克隆了近期流行的H5N1亚型高致病性禽流感病毒代表株A/Goose/...
- 关键词:
- 关键词:禽流感标记疫苗神经氨酸酶基因
- H5N1禽流感病毒HA基因在昆虫细胞中的表达及生物活性鉴定
- 本研究经RT-PCR扩增了1株H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因(HA),将其克隆到pFastBacHTA载体上,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组载体,将其转化DH10Bac感受态细胞与杆状病毒转移载体(bacmid)进行...
- 张晓霁刘明张云刘春国
- 关键词:杆状病毒表达HA基因昆虫细胞
- 文献传递