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热休克蛋白27改善小鼠内毒素血症心功能不全的机制被引量：3: 2010年; 目的探讨Hsp27的保护作用是否与激活P13K／Akt信号通路、减轻炎症反应有关。方法（1）诱导小鼠内毒素血症心肌特异性高表达Hsp27转基因鼠（Hsp27Tg）和野生型对照鼠（WT）均腹腔注射内毒素（LPS，10mg／kg）；（2）心功能测定LPS注射后6h，以心脏超声评价，n=6；（3）P13K／Akt信号通路活性测定LPS注射后1h收集心脏，以Western blot法测定Akt及Gsk-3（的磷酸化水平，n=4；（4）NF-B炎症通路活性检测LPS注射后1h以Western blot测定IκBα水平，n=4；同时在大鼠心肌细胞中进行相同实验，n=3；（5）心肌细胞凋亡LPS注射后24h，以TUNEL法检测，n=4。结果（1）Hsp27显著改善LPS所致的心功能不全。与基础值相比，LPS处理使WT，Hsp27Tg均出现心功能不全，但Hsp27Tg的心功能不全程度显著轻于WT（P〈0．01或P〈0．05）。（2）Hsp27显著抑制LPS所致的IKBa降解。与WT比较，高表达Usp27显著减轻了LPS诱导的小鼠心肌IκBα降解[（41．43±24．10）％VS．（72．92±9．20）％，P〈0．05]，培养的大鼠心肌细胞实验结果与之类似。（3）Hsp27可增强激活P13K／Akt信号通路。LPS处理后，WT和Hsp27Tg鼠心肌组织中磷酸化Akt水平分别为（3．11±0．83）和（5．13±0．73），磷酸化GSK-3β水平分别为（3．19±1．04）和（5．71±1．20）。与WT比较，Hsp27Tg心肌组织中的磷酸化Akt和GSK-36水平均显著提高（P〈0．05）。类似结果在体外培养的细胞实验中也被证实。（4）Hsp27显著抑制LPS所致的心肌细胞凋亡。LPS处理后24h，WT和Hsp27强心肌细胞凋亡率分别为（6．46±1．74）％和（2．88±0．91）％，与WT比较，心肌细胞凋亡在Hsp27Tg中被显著减轻（P〈0．01）。结论高表达Hsp27对小鼠内毒素血症心功能不全有显著改善作用，其保护作用与激活P13K／Akt信号通路、抑制NFKB依赖性炎症反应有关。; 周红梅尤文军张晓进丁正年程蕴琳刘莉; 关键词：内毒素血症心功能不全热休克蛋白27 转基因鼠组织学

热休克蛋白27对内毒素血症所致心功能不全的保护作用被引量：1: 2009年; 目的探讨心肌特异性高表达热休克蛋白27（Hsp27）对内毒素血症所致心功能不全的影响，并初步探讨其机制。方法所有实验均在南京医科大学第一附属医院老年医学科研究室和南京大学模式动物研究所完成。（1）心肌特异性高表达Hsp27转基因鼠（Hsp27Tg）基因型和表达鉴定：分别采用PCFI法和westernblot法；（2）心功能测定：Hsp27Tg和野生型（WT）对照鼠均被腹腔注射内毒素（LPS，10mg／kg），24h后以超声心动图测定心功能，n=6／组；（3）死亡率：Hsp27Tg和wr鼠腹腔注射内毒素（LPS，20mg／kg），密切监测70h内的累积死亡率，n=37／WT，n=27／Hsp27Tg；（4）NF-κB活性测定：心肌组织样本采用凝胶迁移电泳法，细胞样本采用双报告基因法，n=4／组；（5）多组间的两两比较采用ANOVA和Scheffe检验，生存曲线分析采用log—rank检验，P〈0．05设为相差显著性界值。结果（1）Hsp27Tg小鼠心肌有丰富的Hsp27表达，WT则没有；（2）LPS使WT和Hsp27Tg鼠心功能均显著下降，但与WT比较，Hsp27Tg的心功能显著改善（P〈0．01或P〈0．05），其中EF增加27．3％，FS增加37．1％；（3）至LPS注射后70h，WT和Hsp27Tg小鼠死亡率分别为37．84％和11．11％，与WT鼠比较，Hsp27Tg生存率显著提高（P〈0．05）；（4）Hsp27显著抑制LPS诱导的NF-κB激活（P〈0．01或P〈0．05）。结论Hsp27心肌特异性高表达显著抑制内毒素血症所致的心功能不全，改善生存率，其机制可能与Hsp27下调LPS诱导的NF-κB激活有关。; 刘莉尤文军闵笑颜张晓进钱波戴俊程丁正年高翔程蕴琳; 关键词：热休克蛋白内毒素血症心功能不全炎症

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张晓进

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