2025年2月26日
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尹华丽
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2
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供职机构:
华中科技大学同济医学院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王虹
华中科技大学同济医学院
沈迪
华中科技大学同济医学院
邹萍
同济医科大学
王爱莲
华中科技大学同济医学院
郭涛
华中科技大学同济医学院
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郭涛
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中华医学杂志
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1998
1篇
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人血小板生成素cDNA转染及表达产物对实验性血小板减少症的治疗作用
1997年
目的探讨将人血小板生成素(hTPO)cDNA转染COS-7细胞中及表达产物对实验性小鼠血小板减少症(卡铂诱导)的治疗作用。方法以哺乳动物表达载体PCIneo为运载体,构建受控于SV40早期启动子hTPOcDNA的表达载体,利用脂质体介导转染技术,将重组PCIneo-hTPO表达载体转染COS-7细胞中,经G418作用后,对挑选阳性克隆COS-7细胞中hTPOcDNA和mRNA分别进行PCR扩增Southernblot检测和斑点杂交鉴定;对转染COS-7细胞培养上清进行hTPOELISA夹心法检测;应用hTPOcDNA转染的COS-7细胞表达产物对实验性小鼠血小板减少症进行腹腔注射。结果hTPOcDNA不仅可在COS-7细胞中获得表达,且分泌到细胞培养上清中,最高表达量为48.28ng/ml。实验组小鼠第10天,骨髓巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)集落数增加近3倍(P<0.01)。骨髓CFU-MK以小集落数为主,巨核细胞体积增大(P<0.01);外周血中血小板数保持在(80±26)×109/L,P<0.01。结论hTPOcDNA转染COS-7细胞中获得有效地表达,且表达的hTPO对实验性小鼠血小板减少症具?
刘东旭
尹华丽
吴小林
吴小林
王虹
魏文宁
王虹
王爱莲
关键词:
血小板生成素
血小板减少症
CDNA转染
人血小板生成素cDNA转染COS-7细胞及表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用
1998年
将克隆全长1.1kb血小板生成素(TPO)cDNA构建重组PCIneoTPO表达载体,利用LipofectinTM介导转染COS-7细胞中,对阳性克隆COS-7细胞的DNA、mRNA和培养上清分别进行PCR扩增Southernblot、斑点杂交和TPO夹心ELISA检测,观察表达产物对小鼠骨髓巨核细胞的作用。结果表明:全长1.1kbTPOcDNA转染COS-7细胞获得表达,最高表达量可达48.28U/ml,其产物使骨髓巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)集落数增加4倍,巨核细胞增大至42.10±6.70μm(P<0.01);动态观察骨髓CFU-MK集落数于实验第8天达最高峰,约持续2d,第10天后开始下降。
刘东旭
尹华丽
郭涛
吴小林
郭涛
邹萍
王虹
关键词:
人血小板生成素
CDNA
COS-7细胞
巨核细胞
骨髓
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