孙祥明 作品数:39 被引量:226 H指数:6 供职机构: 华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 上海市青年科技启明星计划 上海市教育委员会重点学科基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 化学工程 轻工技术与工程 更多>>
葡萄糖对重组CHO细胞生长代谢及EPO表达的影响 被引量:6 2001年 在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ,葡萄糖浓度对谷氨酰胺代谢没有明显的影响。EPO的累积浓度首先随着起始葡萄糖浓度的增加 ( 8 9~ 17.9mmol L)而增加 ,进而又随着葡萄糖浓度的增加 ( 17 9~ 4 9.6mmol L)而下降 ,表明存在一最适浓度 ,在此浓度下重组CHO细胞的EPO表达最大。 孙祥明 张元兴关键词:CHO细胞 葡萄糖 代谢 红细胞生成素 动物细胞培养 重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原过程的限制性步骤 被引量:2 2003年 考察了重组酿酒酵母表达乙肝表面抗原(HBsAg)的限制性步骤,发现在对数生长期的中后期,与发酵初期相比,外源质粒的拷贝数下降了40%,此后质粒拷贝数在低水平保持稳定。在发酵过程中添加乙醇胺,抗原基因启动子的转录效率下降了24%,但抗原效价上升了31%,说明HBsAg表达的主要限制步骤在抗原多肽的翻译和颗粒形成的后加工过程。 戴临 邵明非 张元兴 孙祥明 汪恩浩关键词:重组酿酒酵母 乙肝表面抗原 乙醇胺 蛋白表达 发酵生产 抗原多肽 过量表达XBP1对于重组CHO细胞中HBsAg分泌的影响 被引量:1 2010年 考察了过量表达CHO细胞的内源性XBP1(X-box binding protein 1)对于重组CHO细胞中乙肝表面抗原(HBsAg)分泌的影响。结果表明:XBP1无法改善DMSO作用下CHO细胞中HBsAg的分泌,但能促进DTT作用下的HBsAg的分泌。进一步研究发现,细胞在DTT作用下形成了内质网分泌压力,而在DMSO作用下,没有形成内质网分泌压力。由此推断在内质网成为分泌限制部位的情况下,XBP1能够促进HBsAg的分泌;而DMSO通过促进二硫键的形成促进了HBsAg在内质网中的分泌,使得分泌限制部位发生在分泌过程中的其他细胞器。 赵建兵 易小萍 张元兴 孙祥明关键词:HBSAG CHO细胞 二硫键 Vero细胞培养过程中球转球接种工艺的可行性研究I.动态球转球过程 被引量:2 1999年 研究了动态球转球接种Vero 细胞培养过程中的细胞生长特性,提出了细胞球转球的机理,通过与消化接种的比较,证明在动态球转球接种的细胞培养过程中,细胞的比生长速率和增殖倍数均较低,因而认为以动态方式实现细胞球转球接种不适合于细胞的大规模培养过程。 孙祥明 谭文松 张元兴 周亚竞 华平关键词:VERO细胞 细胞培养 接种 人胚胎肾(HEK)293细胞无血清培养基 本发明涉及一种用于人胚胎肾(HEK)293细胞培养的无血清培养基,其是在现有基础培养基的基础上添加了转铁蛋白、胰岛素、Primatone、类脂混合物、氨基酸、无机盐和维生素等物质构成。该培养基能使(HEK)293细胞旺盛... 易小萍 陈春艳 张元兴 孙祥明文献传递 乳酸对海水鱼类细胞系CHSE生长和代谢的影响 被引量:2 2005年 在鲑鱼胚胎细胞(CHSE)培养中,低乳酸浓度(1.1~6.14mmol/L,相应渗透压为644~673kPa)对细胞生长无明显影响,主要的代谢特征基本不变;在高乳酸浓度(13.1~41.58mmol/L,相应渗透压为701~944kPa)下培养,细胞生长受到抑制,代谢发生明显变化。乳酸对CHSE细胞生长的抑制作用主要由乳酸导致培养基pH下降和渗透压增加引起。在CHSE细胞批培养中,维持正常的pH,7mmol/L的乳酸浓度,不会明显抑制CHSE细胞的生长。 陈巨星 孙祥明 张元兴关键词:乳酸 渗透压 代谢 动物细胞培养 适于重组CHO细胞培养的无血清培养基的制备 被引量:8 2011年 目的制备适于重组CHO细胞培养的无血清培养基(Serum-free medium,SFM)。方法在本室制备的无血清、低蛋白培养基SFMC的基础上,开发支持重组CHO-K1细胞生长的无动物源、无蛋白培养基(Protein-free midium,PFM,以柠檬酸铁、硫酸锌和酵母水解物替换SFMC中的转铁蛋白、胰岛素和动物组织水解物)及化学成分确定的培养基(Chemically definedmedium,CDM,以PFM培养基为基础,通过调整和优化氨基酸的浓度和其他部分营养物质浓度制备),评价各种无血清培养基的适应性、稳定性以及冻存、复苏性能,并分别在125 ml摇瓶和1.4 L生物反应器中进行培养。结果 CHO-K1细胞在PFM和CDM中生长良好,经125 ml摇瓶培养,最高细胞密度分别为9.3×106和7.3×106个/ml,最大细胞密度与SFMC培养基相比,分别提高了107%和62%。经1.4 L搅拌式生物反应器流加培养,PFM培养基的最高细胞密度可达9.8×106个/ml,培养216 h时,细胞活性仍维持在80%,重组蛋白表达量达110.5 mg/L;采用CDM培养基经流加培养,CHO-K1细胞最大密度可达9.5×106个/ml,但细胞培养时间较PFM培养基短。结论在SFMC培养基的基础上,成功开发出培养效果更优的PFM和CDM培养基。 张大鹤 易小萍 张元兴 孙祥明关键词:CHO细胞 羟基磷灰石的表面特性 被引量:134 1996年 本文综述了羟基磷灰石(HAP)的表面结构、表面能、表面电荷等特性,总结了HAP对无机阴、阳离子,短链有机物,聚合物的作用规律及其对HAP晶体生长和形态的影响,并进一步概括了HAP在悬浮体系中的团聚和解聚现象。 沈卫 顾燕芳 刘昌胜 孙祥明 胡黎明关键词:羟基磷灰石 表面特性 晶体生长 磷灰石 表达重组蛋白的CHO-GS细胞的无血清培养 被引量:6 2005年 采用DOEHLERT和HADAMARD统计方法建立了一个适于重组CHO-GS细胞生长和外源蛋白表达的无谷氨酰胺无血清培养基SFMB.对多种硫酸多聚糖进行了考察,选取低分子量硫酸葡聚糖,添加浓度为25 mg/L,可以避免细胞结团.用SFMB在方瓶中培养重组CHO-GS细胞,细胞生长优于含10%小牛血清的无谷氨酰胺DMEM/F12培养,最大细胞密度提高了40.7%,外源蛋白的表达水平也得到提高.在100 ml转瓶中分批培养,最大细胞密度和蛋白表达分别达到1.5×106 cells/ml和0.48 mg/L. 张芳 张立 易小萍 孙祥明 张元兴关键词:重组蛋白 HADAMARD 细胞密度 CHO 牛血清 接种密度对Vero细胞在微载体表面生长的影响 被引量:9 1999年 研究了接种密度对Vero细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于1.0×105cels/mgMC时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进入对数生长期。就整个Vero细胞培养过程,适宜的表面接种密度为3×104~7×104cels/mgMC,此时可以获得较高的比生长速率和细胞增殖倍数。实验结果还表明Vero细胞在CT-3微载体表面呈单层生长且不受表面限制,所达到的最高密度约为5.2×105cels/mgMC。 孙祥明 谭文松 张元兴 华平 周亚竞关键词:VERO细胞 细胞培养 接种密度