孔群芳
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 供职机构：内蒙古大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 哺乳动物睾丸中c-kit基因表达对生精细胞发育的影响被引量：6
- 2013年
- c-kit和SCF信号传递系统的特性已被广泛报道。但是哺乳动物c-kit基因的结构、功能、时空表达和c-kit突变动物模型相关的研究不多。由于研究方法的精度有差别,造成有些结果不清晰,有些结论还存在争议。该文对哺乳动物c-kit受体的结构和功能进行了阐述,并着重介绍了c-kit在模式动物和家畜生精过程中的表达形式及c-kit突变个体的相关研究进展。最终深入探讨了c-kit在生精细胞增殖、分化及受精过程中所起的作用。通过系统性介绍,明确c-kit在生精过程中起到的重要作用,为生精细胞的增殖、分化及迁移等机理的进一步研究提供了参考。
- 萨初拉孔群芳吴应积
- 关键词：哺乳动物生精细胞
- 家畜精原干细胞培养液
- 本发明公开了家畜精原干细胞培养液SSCM，制备方法为：临用前，将SSCB、细胞因子储存液、青霉素储存液、链霉素储存液、Fungizone储存液按下列比例混合均匀：1ml SSCB，分别添加三种细胞因子储存液各1μl、青霉...
- 吴应积罗奋华张岩萨初拉苏慧敏刘陶迪于泊洋刘林洪包佳婧孔群芳刘代艳刘燕
- 文献传递
- 海藻酸微囊法冷冻保存绵羊精原干细胞
- 2013年
- 细胞冷冻保存技术是动物研究的重要组成部分。该研究首次应用海藻酸微囊冷冻保存绵羊精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs),旨在提高绵羊SSCs的冷冻保存效率。冻存前后对绵羊SSCs存活率进行评估,在绵羊SSCs液氮冻存10 d后进行细胞培养和CDH1、PLZF、GFRα1、OCT-4、Thy-1五个精原干细胞特异分子标记蛋白的免疫荧光鉴定。结果表明,在液氮冻存1 d后,绵羊SSCs存活率从58.4%±1.4%(单细胞悬液冻存组)提高到78.7%±1.3%(海藻酸微囊包埋冻存组);液氮冻存10 d后,单细胞悬液冻存组细胞存活率降低至48.1%±0.8%,而海藻酸微囊包埋组细胞存活率仍保持在78.0%±1.5%。对液氮冻存10 d后的细胞进行体外培养,培养4 d后,海藻酸微囊包埋冻存组能形成典型的精原干细胞簇。进行细胞免疫荧光鉴定,发现在微囊包埋冻存10 d后CDH1、PLZF、GFRα1、OCT-4、Thy-1均显示阳性。海藻酸微囊的应用显著提高了绵羊SSCs的冷冻保存效率,且对绵羊SSCs的标记基因表达无显著影响。该方法的建立为其他家畜及濒危动物种质资源保存提供了依据。
- 刘代艳罗奋华孔群芳包佳婧吴应积
- 关键词：冷冻保存活率
- 海藻酸微囊替代DMSO和FBS的STO细胞冷冻保存研究被引量：3
- 2012年
- 目的:改进现有的细胞冷冻保存方法,建立一个不含二甲基亚砜(DMSO)和血清(FBS)的高效冷冻保存方法,为细胞治疗等临床实践提供优质细胞。方法:海藻酸微囊包埋鼠胚成纤维细胞(STO细胞)后用不含DMSO和FBS的冷冻保存液进行冷冻保存。设四个对照组:添加10%DMSO和20%FBS的组、仅添加10%DMSO的组、仅添加20%FBS、DMSO和FBS均不添加组。在冷冻前后对各实验组细胞用台盼兰染色,进行细胞计数,计算细胞存活率,同时利用溴乙锭的二聚物(EthD)、钙黄绿素-AM(Calcein-AM)进行染色观察细胞的形态,且进一步验证细胞存活率;解冻复苏后用MTT法评估细胞的增殖速度和生长活力。结果:冷冻保存30天后对各组的细胞数量、细胞存活率、细胞形态和解冻复苏后细胞的生长活力进行比较发现,海藻酸微囊包埋冷冻组的细胞数、细胞存活率、细胞形态和生长活力均与添加DMSO和FBS的组之间无显著性差异,而与其它三个对照组呈显著性差异。结论:使用海藻酸微囊替代DMSO和FBS保存STO细胞,能有效的维持细胞形态、数量、存活率,同时不影响细胞的生长活力,从而建立了一个不含DMSO和FBS的高效冷冻保存方法。
- 刘代艳于泊洋孔群芳包佳婧刘林洪萨初拉吴应积
- 关键词：胎牛血清冷冻保存
- 山羊精原干细胞的分离纯化及鉴定被引量：6
- 2013年
- 旨在探究1种简便高效分离纯化山羊精原干细胞的方法。采用三步酶消化对4月龄的山羊睾丸进行处理,分离获得单细胞悬液。将细胞依次培养于明胶、大鼠鼠尾胶原和层粘连蛋白涂层的细胞培养皿中,根据各类细胞贴壁能力和贴壁速度不同进行精原干细胞的富集和纯化,并在各步纯化过程中用精原干细胞特异标记分子PLZF和CDH1进行免疫荧光标记染色鉴定,统计精原干细胞所占的比率,并对获得的细胞进行初步培养和鉴定。每克睾丸中分离出1.36×107个细胞。纯化后每克睾丸组织获得8.7×104个细胞,其中精原干细胞纯度达87.0%。将分离纯化后的细胞在体外培养可形成细胞簇,并表达精原干细胞标记分子CDH1和PLZF。结果表明,通过三步酶消化和差异贴壁方法已经建立起山羊精原干细胞的分离纯化技术。用此技术纯化的山羊精原干细胞(SSCs)能在体外培养增殖,形成细胞簇。
- 孔群芳罗奋华萨初拉包佳婧刘代艳吴应积
- 关键词：山羊睾丸精原干细胞分离纯化免疫荧光染色
- 家畜精原干细胞培养液
- 本发明公开了家畜精原干细胞培养液SSCM，制备方法为：临用前，将SSCB、细胞因子储存液、青霉素储存液、链霉素储存液、Fungizone储存液按下列比例混合均匀：1ml SSCB，分别添加三种细胞因子储存液各1μl、青霉...
- 吴应积罗奋华张岩萨初拉苏慧敏刘陶迪于泊洋刘林洪包佳婧孔群芳刘代艳刘燕
