刘洋
- 作品数:73 被引量:235H指数:8
- 供职机构:上海市质量监督检验技术研究院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市自然科学基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学理学化学工程更多>>
- API-ZYM系统分析动物双歧杆菌胞外酶活性被引量:1
- 2020年
- 目的利用API-ZYM系统分析动物双歧杆菌胞外酶活性。方法采用培养法分离菌株,经提取DNA后采用16 S rRNA测序,采用高分辨率熔解曲线分析技术(high resolution melting,HRM)方法以及SNP(single nucleotide polymorphism)位点组合鉴定菌株;利用API-ZYM系统分析分离菌株的胞外酶活性共性和差异性,研究产业化前后菌株酶活性的变化。结果分离出动物双歧杆菌Bb-12、乳双歧杆菌Bi-07和HN019。能检测到14种胞外酶,有4种胞外酶未检出。酶谱的分泌共性及稳定性基本保持一致,其中糖苷酶类活性最高;HN019和Bb-12的酶谱具有高相似性,Bi07更显现出胞外酶特异性;工业化前后糖苷酶类仍然保持高活性,而水解酶类失活程度高。结论糖苷酶的高表达量普遍存在于动物双歧杆菌中;酶谱差异性可作为划分菌株特征的重要鉴定技术手段;工业化前后酶谱的变化为商业化益生菌体外预筛选评价提供理论参考。
- 俞漪顾晨荣刘洋徐琼张娜娜
- 关键词:胞外酶表达量
- RT-fqPCR检测腐乳耐药基因方法的建立及应用
- 2024年
- 该研究根据腐乳中微生物全基因组测序结果中耐药基因的丰度筛选出3种耐药基因(Baca、Emra、Imrp)设计引物,建立一种非培养方式—实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)方法检测不同腐乳样品中微生物可能存在的耐药基因,并对该方法的灵敏度、抗干扰能力及重复性进行检测,最后应用于市售腐乳样品中耐药基因的检测。结果表明,建立的RT-fqPCR方法对3种耐药基因检测的灵敏度较高,均达到5.4 pg;添加黄豆基因对检测结果影响不显著,抗干扰能力较好;重复性试验结果的相对标准偏差(RSD)均<1.8%,重复性较好。采用该方法对市售的47批次腐乳样品进行检测发现,3种耐药基因Baca、Emra、Imrp在腐乳中的检出率较高,分别为96.5%、92.2%和97.2%;青方腐乳、白方腐乳、红方腐乳3类腐乳含有的耐药基因分别为84.4%、83.3%和89.6%。综上,建立的RT-fqPCR方法可快速检测不同腐乳中的3种耐药基因。
- 张娜娜刘洋赵磊赵燕俞漪
- 关键词:腐乳微生物耐药基因
- 乳与乳制品中β-内酰胺酶的研究进展和标准化现状被引量:4
- 2014年
- 由乳与乳制品中β-内酰胺酶的滥用现象出发,进而对β-内酰胺酶的概念、分类、来源、使用情况、危害、标准化现状、检测方法以及存在的问题等进行了论述,并探讨了如何应对这一非法添加行为的措施。旨在为加强我国乳与乳制品中的抗生素监测,解决目前乳业发展中面临的难题提供参考。
- 沈浥刘洋李兆阶
- 关键词:Β-内酰胺酶
- 用于检测杀菌型乳制品中乳酸乳球菌的引物对和探针及其方法和应用
- 本发明公开了一种用于检测杀菌型乳制品中乳酸乳球菌的qPCR方法,包括:步骤一:提取杀菌型乳制品的DNA,以杀菌型乳制品的DNA为模板,进行qPCR扩增,获得PCR扩增产物;步骤二:检测扩增产物的荧光信号;其中,用于qPC...
- 俞漪刘洋顾晨荣徐琼张娜娜翁史昱钟江窦同海
- 文献传递
- 高效液相色谱法测定婴幼儿奶粉中5种核苷酸的含量被引量:8
- 2017年
- 建立HPLC法用于测定核苷酸的含量。亲水柱HILCI为色谱柱,以磷酸二氢钾(0.01 mol/L)-乙腈(22︰78,V/V)为流动相,检测波长为260 nm;在这一色谱条件下,五种核苷酸分离良好。测得五核苷酸标准曲线的相关系数均大于0.999 4,回收率在95.3%~104.2%之间。该法简单、灵敏、准确、精密满足检测需求。
- 顾颖娟秦宇潘思奕林毅侃庞贝妮刘洋
- 关键词:液相色谱婴幼儿配方乳粉核苷酸
- 一种乳制品中耐热蛋白酶基因的ddPCR定量检测方法
- 本发明公开了一种乳制品中耐热蛋白酶基因双重ddPCR定量检测方法,使用针对耐热蛋白酶编码基因AT03_15745基因和CNY62_09470基因作为靶序列设计的引物和探针的组合。本发明的乳制品中耐热蛋白酶AT03_157...
- 张奕南刘洋于媛媛徐红斌王志伟俞漪
- 基于细胞色素C双通道比率型生物传感器快速测定液体乳中的过氧化氢
- 2023年
- 通过将细胞色素C(cytochrome C,Cyt.C)和六-(二茂铁基)-己硫醇(6-(Ferrocenyl)hexanethiol,FcHT)分别修饰在工作通道电极和参比通道电极上,构建一款基于双通道比率技术的过氧化氢生物传感器。通过优化检验条件,液体乳原液和0.1 mol/L的磷酸缓冲盐溶液(Phosphate-Buffered Saline,PBS)(pH=7.0)按照体积比1∶11.5混合后,该过氧化氢比率型生物传感器可以直接对样品进行快速测定,大幅度简化了前处理的步骤,缩短前处理的时间。该传感器灵敏度为0.0037 kg/mg、线性范围为8.5~85.0 mg/kg、检出限为0.8 mg/kg,基本可以满足快速检测要求。
- 叶青徐红斌刘洋
- 关键词:双通道过氧化氢生物传感器细胞色素C
- 微生物法测定发酵食品中维生素B12含量的研究被引量:11
- 2019年
- 为明确发酵食品中维生素B12的含量及分布,利用微生物法对大豆发酵食品(3种类型腐乳、韩国大酱、纳豆、豆汁)及奶酪中维生素B12的含量进行了测定。结果表明,在3种腐乳中,臭腐乳维生素B12含量最高,达到(3.57±1.08)μg/100 g,红腐乳和白腐乳分别为(0.48±0.21)μg/100 g和(0.41±0.16)μg/100 g;除腐乳外,纳豆(0.50 μg/100 g、0.20 μg/100 g)、韩国大酱(0.97 μg/100 g、0.10 μg/100 g)、豆汁(熟)(0.52 μg/100 g)的维生素B12含量均低于臭腐乳。虽然个别奶酪样品中维生素B12含量最高可达1.54 μg/100 g,但其总体维生素B12的分布及含量也均低于臭腐乳。
- 曲勤凤徐琼张娜娜刘洋窦同海钟江
- 关键词:发酵食品维生素B12微生物法
- 同位素内标液相色谱-串联质谱法测定婴儿配方奶粉中雌二醇残留被引量:3
- 2017年
- 建立了一种婴儿配方奶粉中雌二醇残留的高效液相色谱-电喷雾串联质谱测定方法。样品经乙腈提取、浓缩、正己烷净化,用高效液相色谱分离后,采用电喷雾串联质谱进行定性和定量检测。线性范围为5~100 ng/mL,线性相关系数r大于0.99,方法的定量检出限为1.0μg/kg(S/N=10),高、中、低3个水平的加标回收率为81.5%~112.4%。
- 杨晋青虞成华薛峰秦宇王磊刘洋
- 关键词:高效液相色谱串联质谱婴儿配方奶粉雌二醇
- 基于微滴式数字PCR的饮料中嗜酸乳杆菌定量检测被引量:3
- 2020年
- 基于微滴式数字PCR技术(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)建立饮料中嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus strains)的检测方法。以嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR区域的重复序列设计并合成的引物,对其进行条件优化、特异性检测、优化反应体系,并对体系的灵敏度、重复性、抗干扰能力进行验证,最后对市售的实际样品进行检测。结果表明该方法的特异性很好;方法的灵敏度达到了0.25 pg/μL;重复性的标准偏差在2.34%~6.1%之间;在抗干扰检测中,实验组与对照组结果一致性好,提示该方法抗干扰能力较好;对市售的11批次样品进行检测,标记含有嗜酸乳杆菌的样品中均检出嗜酸乳杆菌且含量为1.6×10^3~2.3×10^6copies/g。研究建立的ddPCR方法可用于饮料中的嗜酸乳杆菌的快速和精确定量。
- 刘洋张娜娜窦同海俞漪徐琼曲勤凤赵渝杨捷琳朱春梅
- 关键词:嗜酸乳杆菌