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傅婷: 作品数：16 被引量：20H指数：3; 供职机构：浙江省医学科学院更多>>; 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金杭州市科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学化学工程更多>>

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板蓝根多糖对单纯疱疹病毒-2型DNA疫苗免疫效果的影响被引量：7: 2020年; 目的探讨板蓝根多糖(isatis root polysaccharide,IRPS)对单纯疱疹病毒-2型(herpes simplex virus type-2,HSV-2)DNA疫苗(pgD)免疫效果的影响。方法水煎醇沉法提取IRPS,苯酚-硫酸法测定含量,计算产率。将BALB/c小鼠随机分为5组:PBS对照组、pgD疫苗组(100μg)、pgD+IRPS组(100μg+150μg)、pKan+IRPS组(100μg+150μg)、IRPS组(150μg),每组8只,均经小鼠后腿肌肉注射,100μL/只,初次免疫后2周,加强免疫1次。末次免疫2周后,经眼球采血,分离血清,ELISA法检测HSV-2特异性IgG水平及IgG1、IgG2a亚型抗体滴度;无菌制备小鼠脾细胞悬液,MTS法检测脾脏T细胞增殖能力,ELISA法检测IFNγ和IL-10的含量。结果IRPS含量约8.745 mg,产率为87.45%。pgD+IRPS组小鼠血清中IgG水平显著高于其他4组(P<0.001),IgG1和IgG2a的滴度、IgG2a/IgG1比值、脾脏T细胞增殖能力、IFNγ和IL-10的含量均显著高于pgD疫苗组(P<0.05)。结论IRPS作为疫苗佐剂可显著增强HSV-2 DNA疫苗的免疫水平,具有良好的应用前景。; 周寒鹏陶薇傅婷何卓晶洪艳; 关键词：板蓝根多糖 DNA疫苗佐剂

CD40L对单纯疱疹病毒2型DNA疫苗的免疫增强作用研究: 2015年; 目的研究重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L辅佐HSV-2 DNA疫苗增强小鼠体液免疫和细胞免疫的作用效果,探讨其作为HSV-2 DNA疫苗佐剂的潜力。方法 (1)构建鼠CD40L基因的重组真核表达质粒pc DNA3-Kan/CD40L。(2)体外细胞实验:检测重组质粒p CD40L刺激小鼠外周血淋巴细胞增殖情况和脾细胞分泌IFN-γ的能力。(3)体内动物实验:48只雌性BALB/c小鼠随机分为4个免疫组p K组、pg D组、pc CD40L+pg D组和p K+pg D组。小鼠后腿肌内注射,共免疫2次,间隔3周。末次免疫3周后,每组随机取4只小鼠进行致死剂量攻毒实验验证疫苗的保护作用。ELISA检测小鼠血清抗HSV-2 Ig G抗体水平和趋化因子RANTES;流式细胞术检测全血中CD4+和CD8+T细胞百分率以及分泌IFN-γ和IL-4的T细胞的百分率;MTS法检测小鼠脾脏T细胞的增殖能力。结果 (1)体外实验结果:重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L对小鼠外周血淋巴细胞的增殖能力和刺激脾细胞分泌IFN-γ的能力均显著大于空质粒pc DNA3-Kan(P<0.05)。(2)体内实验结果:小鼠血清抗HSV-2 Ig G水平、趋化因子RANTES、脾淋巴细胞刺激指数和外周血CD4+T细胞数和分泌IFN-γ的Th1细胞数均高于其他免疫组(P<0.05)。pc DNA3-Kan/CD40L+pg D组预防小鼠感染HSV-2效果好于其他免疫组。结论 (1)重组质粒pc DNA3-Kan/CD40L能够诱导外周血淋巴细胞增殖并刺激脾细胞分泌IFN-γ具有作为疫苗佐剂的潜力。(2)pc DNA3-Kan/CD40L可以辅助HSV-2 DNA疫苗诱导BALB/c小鼠产生特异性抗HSV-2的体液免疫和细胞免疫,具备作为HSV-2 DNA疫苗免疫佐剂的能力。; 胡如西陶薇傅婷何卓晶贾岚洪艳陈勇

壳聚糖季铵盐对戊型肝炎病毒多肽疫苗免疫效果的研究被引量：3: 2014年; 目的研究壳聚糖季铵盐(3-氯-2-羟丙基三甲基壳聚糖,HTCC)作为免疫佐剂,对戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)多肽疫苗接种小鼠的免疫增强效果。方法 IPTG诱导重组质粒pET28a-ORF23在大肠杆菌BL21中表达HEV重组蛋白作为多肽疫苗,以3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵(CTA)作为化学改性剂对壳聚糖进行接枝改性合成水溶性HTCC作为多肽疫苗佐剂。50只雌性BALB/c小鼠随机分为5个免疫组,小鼠后腿肌内注射,共免疫2次,间隔3周。ELISA检测3个免疫阶段鼠血清抗HEV-IgG抗体水平;末次免疫5周后,四色流式细胞术检测免疫小鼠全血中CD4+、CD8+、IFN-γ+和IL-4+细胞的百分率;MTS法检测小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖反应。结果加HTCC佐剂组的抗HEV-IgG抗体均显著高于不加佐剂组(P<0.05),其小鼠脾脏T淋巴细胞的蛋白刺激指数显著高于不加佐剂组(P<0.05)。各组间的CD4+细胞百分率无显著差异。加HTCC佐剂组的IFN-γ+细胞百分率显著高于不加佐剂组和两个阴性组(P<0.05),其IL-4+细胞百分率显著低于不加佐剂组和两个阴性组(P<0.05)。结论壳聚糖季铵盐对HEV重组多肽疫苗接种小鼠有一定的免疫加强效果。; 郑海群陶薇何卓晶傅婷陈勇洪艳; 关键词：壳聚糖季铵盐戊型肝炎病毒多肽疫苗重组蛋白

两种不同形状碳酸钙微米颗粒对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化影响的研究被引量：1: 2015年; 目的评价球形和方形两种碳酸钙微米粒对大鼠骨髓来源间充质干细胞增殖、分化等的影响。方法制备球形和方形碳酸钙微粒并与大鼠骨髓间充质干细胞共培养,通过MTS法检测微粒对细胞增殖的影响,同时检测微粒在细胞表面的吸附以及引起的ROS反应,评价微粒的细胞毒性。通过检测碱性磷酸酶活性评价两种碳酸钙微粒对细胞成骨分化的影响。结果两种碳酸钙微粒高浓度下造成一定细胞增殖抑制,方形微粒抑制作用更显著。微粒的细胞增殖抑制主要由微粒与细胞表面接触引起,但两种微粒均不引起细胞ROS水平升高。同时两种微粒高浓度下也可通过抑制碱性磷酸酶活性抑制成骨分化,方形微粒同样更明显的抑制碱性磷酸酶活性。结论高浓度下碳酸钙微粒可对骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化造成抑制,方形碳酸钙微粒具有更明显抑制现象,生物相容性不如等粒径球形微粒。因此球形微粒是组织工程支架材料更理想的选择。; 谷子芽李颖傅婷张文元杨亚冬张科技; 关键词：骨髓间充质干细胞碳酸钙细胞增殖成骨分化

检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型荧光定量PCR方法的建立被引量：1: 2016年; 目的建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）DNA的实时荧光定量PCR方法，为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法。方法依据HSV-2糖蛋白D（gD）基因序列，使用序列比对软件，选取其保守区序列设计引物及TaqMan探针并进行筛选；以gD基因重组质粒pcDNA3-HSV-2gD作为标准模板，对该检测方法的反应条件进行优化，提高其检测特异性、敏感度和重现性。结果该检测方法特异性好，检测的最低拷贝数可达到2个拷贝，线性范围为2×10^0～2×10^8拷贝／反应，是普通PCR敏感度的10^3倍。该检测方法组间和组内变异系数均低于5％，说明该检测方法具有良好稳定性。结论本研究建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法用于检测痕量HSV-2DNA具有特异、敏感、定量和重现性好的优点。; 陶薇傅婷何卓晶洪艳胡如西贾岚; 关键词：荧光定量PCR TAQMAN探针

一种预防单纯疱疹病毒II型的疫苗: 本发明公开了一种预防单纯疱疹病毒II型的疫苗。本发明通过分子生物学手段，将单纯疱疹病毒II型的糖蛋白D基因组合到含卡那抗性的真核表达载体pKan中，构建包括含全长的糖蛋白D基因的真核表达质粒pgD和含如SEQ ID NO...; 陶薇洪艳胡如西傅婷何卓晶贾岚; 文献传递

壳聚糖季铵盐(HTCC)载HSV-2型DNA疫苗pgD诱导小鼠免疫应答的初步研究被引量：2: 2012年; 目的:制备了壳聚糖季铵盐-DNA疫苗(pgD)纳米粒复合物,并对其诱导BALB/c小鼠产生免疫应答的能力做了初步研究。方法:通过复凝聚法制备了HTCC-pgD纳米粒复合物并对其进行表征。60只BALB/c小鼠随机分成5组:①HTCC10对照组;②pcDNAkan空载体对照组;③重组质粒pgD组;④HTCC∶pgD=5∶1组;⑤HTCC∶pgD=10∶1组。各组小鼠后腿肌肉注射,注射剂量为100μg/(只.次),隔2周免疫1次,共免疫2次。末次免疫2周后,通过流式细胞仪检测外周血中CD4+、CD8+百分率,ELISA法检测血清中IgG抗体效价、IFN-γ、IL-4含量这4个方面来研究该纳米粒复合物对小鼠免疫反应的影响。结果:HTCC能与质粒pgD很好结合成纳米复合物,保护DNA免受核酸酶的降解。小鼠经免疫2次后,流式细胞仪检测外周血中CD4+T淋巴细胞亚群结果显示HTCC-pgD纳米粒复合物组的CD4+百分率要高于其他对照组(P<0.05)。血清ELISA检测IgG结果显示与对照组相比,HTCC-pgD纳米粒复合物可诱导小鼠机体产生较高滴度的IgG抗体。HTCC-pgD纳米粒复合物组的小鼠血清中IFN-γ水平与对照组相比有所上调,IL-4水平有下降。结论:通过复凝聚法制备的HTCC-pgD纳米粒复合物可诱导BALB/c小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫,为HSV-2型DNA疫苗研制提供科学依据。; 傅婷洪艳陈勇何卓晶陶薇; 关键词：壳聚糖季铵盐单纯疱疹病毒2型 DNA疫苗免疫应答

壳聚糖季铵盐纳米粒的制备及其应用研究进展: 2012年; 壳聚糖季铵盐是一种常见的壳聚糖修饰物，属水溶性壳聚糖衍生物。它是聚阳离子多聚物，具有低毒性、良好的生物降解性和生物相容性、稳定性强等优势，因而其应用范围相当广泛。此文主要就近几年壳聚糖季铵盐纳米粒的制备方法及该纳米粒在基因递送载体、疫苗佐剂、给药系统等应用领域的最新研究进展作了综述。; 傅婷洪艳陈勇; 关键词：壳聚糖纳米粒疫苗佐剂

纳米羟基磷灰石复合物在骨组织工程中的应用与挑战被引量：3: 2016年; 纳米羟基磷灰石(nano-hydroxyapatite,n HAp)具有良好的生物相容性、生物活性和骨传导性,是一种性能良好的骨修复材料。但由于其脆性大、强度低,制约了快速发展。n HAp与其他材料复合可以提高材料的生物相容性和力学性能,在临床应用方面前景广阔。现就各种n HAp复合支架材料在骨组织工程中的研究现状进行简要综述。; 傅婷谷子芽李颖洪艳; 关键词：纳米羟基磷灰石聚乳酸骨组织工程

人感染 H7 N9禽流感病毒血凝素蛋白线性 B 淋巴细胞抗原表位的预测及鉴定被引量：3: 2016年; 目的：预测并鉴定人感染H7N9禽流感病毒血凝素（HA）蛋白的线性B淋巴细胞抗原表位及H7亚型的特异性。方法选取绍兴市人民医院提供的人感染H7 N9患者不同时间的三份血清样本和一份健康对照血清样本，采用TMHMM Sever v．2．0预测蛋白质胞外区，采用DNAStar Lasergene’ s Protean、BcePred和ABCpred预测其优势B淋巴细胞抗原表位，并用间接酶联免疫吸附试验（ ELISA）验证预测的B淋巴细胞抗原表位的免疫原性。使用Clustal X2．1软件将预测抗原表位与GenBank上H7N9和H1～H16亚型流感病毒HA蛋白的氨基酸序列进行多重序列比对以分析预测抗原表位的H7亚型特异性，采用Cn3D 4．3．1软件分析预测的线性B淋巴细胞抗原表位在H7N9禽流感病毒HA蛋白中的分布情况。结果 HA蛋白可能的B淋巴细胞表位位于胞外区N端的第172～183、363～380、452～472和第491～506四个区段。 ELISA结果表明，四个预测的B淋巴细胞表位均与已确诊患者血清发生阳性反应。多重序列比对结果发现第172～183和452～472区段与其他亚型氨基酸序列差异最大，可能具有更好的H7亚型特异性。 HA蛋白的三维结构进一步证明预测的四个B淋巴细胞抗原表位均位于HA蛋白表面。结论鉴定出了四个 HA蛋白线性B淋巴细胞抗原表位，其中第172～183和452～472区段具有更好的H7亚型特异性，可作为新型疫苗表位设计和H7抗原和抗体的特异性检测的依据。; 陶薇高孟姜立民谢珲倪红霞高丽美罗永能洪艳何卓晶傅婷; 关键词：H7 B淋巴细胞

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