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高彤
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心传染病预防控制国家重点实验室
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘强
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
邱趁丽
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
赵辉
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
杨贵波
中国疾病预防控制中心性病艾滋病...
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刘强
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中华微生物学...
年份
1篇
2008
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不同黏膜上皮细胞中巨噬细胞炎性蛋白-3α转录水平的荧光定量RT—PCR比较分析
被引量:2
2008年
目的定量比较分析不同黏膜上皮细胞中人巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)的转录水平。方法体外转录制备MIP-3α RNA标准品,人工合成MIP-3α mRNA序列特异的引物及TaqMan探针。利用TaqMan EZ RT-PCR试剂盒的反应体系和ABI实时荧光定量PCR仪进行实时荧光定量RT—PCR。通过对RT—PCR产物测序、使用标准品和质控品进行多次独立测试等评估实时荧光定量RT—PCR方法的特异性、灵敏度和可重复性。随后对不同黏膜上皮细胞系Caco-2、T-84、HeLa和淋巴细胞系PM1中MIP-3α mRNA水平进行了定量检测。结果建立了可用于MIP-3α mRNA水平定量检测的实时荧光定量RT—PCR方法,该方法特异性好(扩增片段测序结果与参考序列完全一致)、灵敏度高(25斗l反应体系中有5个拷贝就可以检出)、检测样品浓度范围广(10^3~10^10拷贝/m1)。对Caco-2、T-84、HeLa和PM1细胞中MIP-3αmRNA水平的定量分析表明,肠黏膜上皮细胞Caco-2和T-84的MIP-3α mRNA水平比HeLa和PM1细胞高。结论黏膜上皮细胞能表达丰富的MIP-3α,不同黏膜上皮细胞MIP-3α的表达水平可能不同。
高彤
邱趁丽
赵辉
刘强
邵一鸣
杨贵波
关键词:
黏膜上皮细胞
实时荧光定量RT-PCR
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