隋建丽
- 作品数:78 被引量:181H指数:8
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国际原子能机构基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程建筑科学更多>>
- 非克隆cDNA文库与RACE技术克隆小剂量辐射诱导新基因RIG1被引量:2
- 2001年
- 目的 在获得了低剂量辐射诱导新基因RIG1EST片段的基础上 ,简便、有效地获得其全长cDNA ,进行下一步的基因功能研究。方法 结合应用非克隆cDNA文库技术及增强RACE技术 ,设计了巢式RACEPCR、生物素磁性分离、生物素标记探针杂交、再次磁性分离的纯化流程。结果 成功地克隆到RIG1EST片段 3′端约 1kb的序列 ,该序列 3′端具有明显的polyA加尾信号 ,有编码区的终止密码子。进一步的分析明确了RIG1EST的正、负链及其蛋白编码方向 ,为RIG15′端的克隆提供了大量可靠的信息 ,目前RIG15′端的克隆已得到很好的进展。结论 所得结果与我们的设计完全一致 ,说明这一技术路线是简便可行的 ,为下一步研究RIG1基因在细胞辐射应激反应中的功能及被辐射诱导表达的调控模式奠定了基础。
- 罗瑛隋建丽铁轶张元平周平坤孙志贤
- 关键词:探针杂交
- 一低剂量辐射诱导新基因的转录调控和初步功能分析被引量:3
- 2002年
- 目的 克隆低剂量辐射诱导基因 ,研究辐射对其转录调控作用和生物学功能。方法用mRNA差异显示技术分离辐射诱导表达基因 ,用RACE技术获取cDNA旁侧序列 ,Northern杂交分析基因的转录调节 ,生物信息学分析基因的结构和功能。结果 获得包括 3’端在内的辐射诱导新基因LRIGx的cDNA片段 ,序列同源性比较显示与人染色体 2 0q11 2 12一段DNA高度同源 (>99 % )。Northern杂交结果揭示该基因转录子全长约 8 5kb ,在 0 2Gy照射后 2h出现诱导表达 ,4h后转录子水平为对照细胞的 5倍多 ,也受 0 0 2Gy更低剂量照射诱导表达。 2Gy大剂量照射后 1h出现短暂诱导表达 ,但不如低剂量照射明显 ,2h后恢复正常水平。生物信息学分析结果显示该基因编码产物含有解旋酶活性保守区。结论 分离鉴定出一低剂量辐射反应基因 ,其编码蛋白可能参与DNA代谢 (如修复 )等细胞辐射反应过程。
- 周平坤隋建丽
- 关键词:辐射诱导基因转录调节低剂量辐射解旋酶
- 辐射相关新蛋白hHBRK1相互作用蛋白质的鉴定
- <正>基因转录的改变,是细胞对外环境因子刺激或损伤反应的一个重要环节。对辐射诱导基因的功能研究,无疑是细胞辐射反应调控机制研究中的一个重要内容。hHBrk1基因是本实验室利用抑制性消减杂交手段,从α粒子辐射致癌变的人支气...
- 徐勤枝隋建丽白贝吴德昌周平坤
- 关键词:肌动蛋白
- 文献传递
- H_2O_2-Fe^(3+)所致人淋巴细胞DNA双链断裂损伤被引量:4
- 1996年
- 采用脉冲电场凝胶电泳法检测H2O2-Fe(3+)体系产生的OH对人淋巴细胞DNA的双链断裂损伤.H2O2-Fe(3+)浓度与DNA双链断裂呈明显量效关系;随OH作用时间延长,细胞DNA双链断裂加重;过氧化氢酶对OH损伤有明显抑制作用.脉冲电场凝胶电泳法可检测到的H2O2和FeCl3引起细胞DNA双链断裂的最低浓度为0.3mmol/L和6μmol/L.
- 隋建丽吕星周平坤方允中
- 关键词:淋巴细胞DNA双链断裂过氧化氢铁离子
- S波段高功率微波辐射小鼠远期的遗传毒性被引量:1
- 2005年
- 陈英刘秀林隋建丽周平坤
- 关键词:高功率微波遗传毒性染色体
- 抑制CHD6表达对A549细胞辐射敏感性的影响被引量:1
- 2006年
- 目的通过RNA干扰技术建立染色质重构蛋白CHD6基因表达抑制的细胞模型,研究CHD6对人肺腺癌细胞A549细胞增殖及辐射敏感性的影响。方法利用质粒介导的siRNA技术建立CHD6基因表达抑制细胞模型,RT-PCR检测CHD6mRNA的表达,细胞生长曲线和流式细胞技术分别检测A549细胞增殖及细胞周期的变化,荧光染色法检测细胞凋亡,细胞克隆形成率检测A549细胞辐射敏感性。结果通过本研究,成功构建了siRNA抑制CHD6表达的细胞模型;通过siRNA抑制CHD6的表达,A549细胞增殖能力明显增强,细胞对2Gy以内γ射线照射有明显辐射抗性;大剂量照射后的细胞凋亡率无明显改变。结论抑制CHD6基因表达将提高细胞增殖能力和细胞的辐射抗性。
- 王会平徐勤枝黄越承隋建丽白贝周平坤
- 关键词:SIRNA细胞周期细胞增殖
- DNA损伤监测及修复相关酶与细胞衰老被引量:2
- 2001年
- 衰老是细胞的重要生命现象之一 ,衰老假说之一认为细胞中残留DNA损伤的积累可加速细胞的衰老 .因此 ,细胞内DNA损伤监测及修复系统的正常运行与细胞衰老调控密切相关 ,DNA损伤监测及修复相关酶如PARP、DNA PK、ATM、p5 3等在细胞衰老中的调控作用日益受到广泛关注 .研究这些蛋白质分子间的相互作用及其在细胞衰老过程中的调控功能 ,有利于揭示DNA损伤应激、损伤修复调控与细胞衰老之间的内在联系 ,为抗衰老研究及从衰老角度治疗肿瘤提供新的思路 .
- 罗瑛隋建丽铁轶
- 关键词:细胞衰老DNA损伤修复TANKYRASE
- 质粒DNAα粒子损伤的原子力显微镜观察被引量:1
- 2003年
- 目的 :利用原子力显微镜 (AFM)直接观察技术 ,检测α粒子辐射对质粒DNA的损伤。方法 :照射质粒DNA吸附于云母表面 ,用AFM观察DNA的分子结构 ;用琼脂糖凝胶电泳检测开环和超螺旋结构的质粒DNA相对含量变化。结果 :AFM下清晰观察到开环、线性和超螺旋结构的质粒DNA分子。在 2Gyα粒子照射下 ,开环质粒DNA的比例就明显增多 ,并随照射剂量的增加而上升。相比之下 ,γ射线需要更大剂量照射才能产生同等的损伤效应。结论 :本文获得了AFM下辐射所致DNA损伤的直观图像 ,体外照射下α粒子对DNA的损伤大于γ射线。
- 隋建丽倪嵋楠赵葵周平坤
- 关键词:质粒原子力显微镜分子结构
- siRNA抑制DNA-PKcs表达及对HeLa细胞增殖的影响被引量:4
- 2005年
- 背景与目的:建立抑制DNA_PKcs表达的细胞模型,以此探讨DNA_PKcs的功能。材料与方法:构建DNA_PKcs的siRNA抑制表达载体,利用Lipofectamine介导,转染HeLa细胞,筛选稳定表达的转化克隆。Westernblot检测DNA_PKcs表达。通过细胞生长速度检测细胞辐射敏感性变化。结果:设计了作用于DNA_PKcs不同位点的3条siRNA,并构建表达质粒,转染HeLa细胞,获得了3个稳定转化克隆,Westernblot分析表明其DNA_PKcs表达受到明显抑制,细胞对γ射线和紫外线的敏感性增加,接种裸鼠后的肿瘤生长速度减慢。结论:成功建立了DNA_PKcs表达抑制细胞模型,并且发现DNA_PKcs表达抑制后除影响细胞的辐射敏感性外,还可能与肿瘤细胞增殖有关。
- 安静隋建丽徐勤枝周平坤
- 关键词:DNA-PKCSRNA干扰技术细胞增殖
- 肿瘤细胞辐射抗性的分子基础及增敏措施研究
- 周平坤孙志贤孙伟建安静孙薏魏康隋建丽王林崔玉芳严雨倩王会平夏寿萱
- 技术领域:肿瘤的放射治疗领域。阐述了癌细胞辐射抗性的关键分子基础和主要监测指标为DNA 双链断裂(DSB)修复效率和损伤残留率,DSB关键修复蛋白DNA-PKcs在肿瘤细胞中异常高表达是主要贡献因素。针对DNA-PKcs...
- 关键词:
- 关键词:肿瘤细胞辐射抗性DNA损伤