陈闻
- 作品数:8 被引量:18H指数:3
- 供职机构:广东省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 纳豆芽胞杆菌16S rRNA基因的克隆及其系统进化分析被引量:7
- 2005年
- 纳豆芽胞杆菌是从豆豉中分离出的一种具有益生功能的芽胞杆菌。该研究从纳豆芽胞杆菌提取基因组DNA,以芽胞杆菌16S rRNA基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出纳豆芽胞杆菌的部分16S rRNA基因,所克隆序列长1 435 bp,G+C含量为55%,该序列已被G eneB ank收录,其编号为AY 864812。BLA ST分析结果显示,AY 864812与G eneB ank中收录的枯草芽胞杆菌16S rRNA基因同源性最高,其中与AY 601722的同源性为100%。用C lusta lx 1.8对相关序列进行系统进化分析,结果显示纳豆芽胞杆菌与枯草芽胞杆菌在进化关系上的地位最近,从分子水平上证实了纳豆芽胞杆菌是枯草杆菌的1个亚种。
- 覃宗华蔡建平叶秀华王佩瑶陈闻王星谢明权
- 关键词:RRNA基因克隆
- 柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG2基因的克隆与表达被引量:6
- 2006年
- 根据生物信息学预测的基因序列设计引物,应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA扩增获得了鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原2(surface antigen 2,SAG2)基因序列,将其与pGEM-T easy载体连接后转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,以带有限制酶切位点的特异性引物用PCR方法扩增不含SAG2 N端信号肽序列的ORF序列后克隆至表达载体pET-32 a(+),构建了重组表达质粒pET-32 a(+)-SAG2,并将其转化至E.coliBL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了SAG2重组抗原在大肠杆菌的高效表达,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白的分子量约为47 ku。菌体经超声处理后进行SDS-PAGE分析表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。
- 简永利蔡建平于三科覃宗华林青叶秀华陈闻党海斌
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫基因克隆
- 鸡白细胞介素15基因的克隆及序列分析
- 2005年
- 根据GenBank中所收录的鸡白细胞介素-15(ChIL-15)的cDNA序列设计特异性引物,以经ConA刺激3 h的科宝鸡脾脏淋巴细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆获得了ChIL-15的cDNA.ChIL-15的cDNA全长655 bp,其中第84位~644位是该基因的阅读框(ORF),共编码187个氨基酸.将所克隆的序列与已报道序列相比较,二者核苷酸的同源性为100%(655/655),所编码蛋白质的氨基酸序列同源性也为100%.
- 叶秀华彭小亮覃宗华谢明权蔡建平陈闻王佩瑶
- 关键词:白细胞介素-15基因克隆
- 鸡艾美耳球虫抗原基因在减毒沙门氏菌的共表达及免疫效果研究
- 本研究以孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆获得了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株子孢子微线蛋白-2基因(EnMIC2)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)广东珠子孢子表面抗...
- 覃宗华蔡建平谢明权叶秀华王佩瑶陈闻
- 关键词:毒害艾美耳球虫堆型艾美耳球虫减毒鼠伤寒沙门氏菌共表达抗原基因
- 文献传递
- 鸡艾美耳球虫抗原基因在减毒沙门氏菌的共表达及免疫效果研究
- 本研究以孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆获得了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株子孢子微线蛋白-2基因(EnMIC2)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)广东株子孢子表面抗...
- 覃宗华蔡建平谢明权叶秀华王佩瑶陈闻
- 关键词:毒害艾美耳球虫堆型艾美耳球虫减毒鼠伤寒沙门氏菌共表达
- 文献传递
- 鸡胚接种柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫活卵囊的免疫保护试验被引量:4
- 2006年
- 给18日龄鸡胚接种一定剂量的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria enella)和/或堆形艾美耳球虫(E.acervulina),孢子化卵囊,出雏后在无球虫环境中笼养,1~10日龄每天收集各组粪便样本,计数克粪便卵囊数(OPG),并于14日龄时以大剂量同源孢子化卵囊攻虫,以相对增重率(RWG)、饲料转化率(FCR)、相对卵囊产量(ROP)评价免疫保护效果。结果显示,以E.tenella或E.acervulina卵囊免疫18日龄鸡胚,其卵囊排出的潜隐期及达到峰值的时间与1日龄雏鸡接种组相一致,有相似的排卵囊曲线,提示其诱导免疫的建立是在出雏后开始建立的。攻虫后各免疫组的RWG由攻虫对照组的31.9%~51.7%提高到了76.5%~83.6%,RCR由攻虫对照组的4.11~4.89改善为2.72~2.96,ROP降至4.7%~23.5%。结果表明以一定剂量E.tenella和E.acervulina卵囊单独或混合经羊膜腔免疫18日龄鸡胚都可以建立起针对出雏后14日龄同源攻虫的良好免疫保护力。比较混合免疫Etenel/a和E.acervulina卵囊组与单一接种Etenella或E.aeervulina卵囊组的免疫效果发现,混合免疫组的各项指标均稍优于后者。
- 党海斌蔡建平于三科覃宗华叶秀华林青陈闻简永利
- 关键词:柔嫩艾美耳球虫堆形艾美耳球虫卵囊鸡胚免疫
- 鸡艾美耳球虫抗原基因在减毒沙门氏菌的共表达及免疫效果研究
- 本研究以孢子化卵囊的总RNA 为模板,用RT-PCR 方法克隆获得了毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株子孢子微线蛋白-2基因(EnMIC2)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)广东株子孢子表...
- 覃宗华蔡建平谢明权叶秀华王佩瑶陈闻
- 关键词:毒害艾美耳球虫堆型艾美耳球虫减毒鼠伤寒沙门氏菌共表达
- 文献传递
- 鸡白细胞介素-17基因的克隆和序列分析被引量:1
- 2005年
- 根据GenBank中收录的鸡白细胞介素-17(ChIL-17)基因的cDNA序列设计了1对特异性引物,以经ConA刺激3h的鸡脾淋巴细胞总RNA为模板,用RT-PCR方法成功克隆了ChIL-17的cDNA.该cDNA全长725bp,其中第2~508位是该基因的阅读框(ORF),共编码169个氨基酸.与已报道的序列相比较,二者核苷酸序列的同源性为99.6%(722/725),共有3个碱基发生变异,其中有2个变异位于阅读框之内.DNAssit软件分析表明,二者推导的氨基酸序列同源性为100%.同时,以鸡脾淋巴细胞DNA为模板,用PCR方法首次扩增获得了ChIL-17的基因组DNA序列,经序列分析,其序列全长1934bp,由2个内含子和3个外显子组成,3个外显子分别位于第2~27、569~815和1484~1720bp处.
- 覃宗华蔡建平叶秀华王佩瑶陈闻吕敏娜温列娜谢明权
- 关键词:白细胞介素-17克隆