公共文化服务平台

共 9 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

短发夹状双链RNA抑制丙型肝炎病毒IRES介导的基因表达被引量：1: 2006年; 目的研究载体表达的短发夹状双链RNA(shRNA)对丙型肝炎病毒(HCV)IRES介导的基因表达的特异性抑制作用。方法构建HCV IRES调控的绿色荧光蛋白表达载体(pIRES-GFP)和虫荧光素酶表达载体(p5’ UTR-Luc),以及针对HCV IRES的shRNA表达载体(pshRNA-HCV),共转染HepG2细胞,于转染后24、48,72 h 观察绿色荧光的强弱,用Western blot检测绿色荧光蛋白的表达,半定量逆转录聚合酶链反应法检测GFP的mRNA水平,双荧光素酶系统检测虫荧光素酶活性。结果pshRNA-HCV作用组绿色荧光强度明显弱于未干扰组,GFP蛋白表达量及虫荧光素酶活性降低60％-70％,半定量逆转录聚合酶链反应显示pshRNA-HCV导致了GFP基因mRNA水平的降低。结论针对HCV IRES的shRNA能够显著和特异地抑制该区域调控的蛋白表达水平及mRNA水平,该研究结果为利用RNA干扰技术治疗HCV感染进行了初步探索。; 陈维贤单林娜陈娟张祯祯张秉强黄爱龙; 关键词：RNA干扰基因治疗

HCV核心蛋白影响细胞凋亡可能机制的研究进展被引量：1: 2006年; 丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)核心(core)蛋白能与细胞的多种蛋白结合,调节多种细胞基因的转录活性,影响宿主细胞凋亡和免疫系统的功能,还影响HCV感染细胞的增殖和分化等,在HCV感染的病理发生和慢性化以及宿主细胞的恶性转化等过程中起重要作用。文章主要综述了近年来关于HCV核心蛋白影响细胞凋亡可能机制的研究进展。; 陈娟黄爱龙; 关键词：核心蛋白细胞凋亡丙型肝炎病毒免疫系统

低氧对L02细胞脂肪代谢的影响及其机制被引量：9: 2012年; 目的研究低氧对L02细胞脂质代谢的影响及其可能的机制。方法以正常人肝细胞株L02细胞为研究靶细胞，对照组和低氧处理组细胞分别在21％和1％氧浓度下培养。油红O染色、甘油三酯（TG）测定检测肝细胞脂肪变程度；RT-PCR法检测细胞内低氧诱导因子（HIF）2α、固醇调节元件结合蛋白（SREBP）-1c mRNA的表达情况；Western blot法检测HIF-2α亚基、脂肪分化相关蛋白（ADRP）、脂肪酸合成酶（FAS）蛋白的表达量。各组甘油三酯测定值行2×3的析因设计方差分析，两样本均数间比较采用t检验，其他多个样本均数的比较采用单因素方差分析与Newman-Keuls法检验。结果与对照组比较，低氧组L02细胞内出现脂质沉积，TG含量增多，且随低氧处理时间延长逐渐增多（F=115．04，P〈0．01）。低氧12、24、48h组SREBP—1c mRNA表达水平较对照组下调（0．236±0．043、0．287±0．044、0．342±0．049与0．503±0．037，F=28．37，P〈0．01），FAS蛋白表达水平较对照组下调（0．562±0．054、0．674±0．062、0．682±0．057与0．857±0．069，F=16．08，P〈0．01）。对照组未检测到HIF-20L表达，而低氧处理3h后HIF-2α蛋白表达逐渐增加，6h后达高峰，12、24h又逐渐降低，各时间点分别为0．609±0．031、0．973±0．067、0．792±0．056、0．437±0．038（，=85．30，P〈0．01）；低氧12、24、48h各组ADRP蛋白相对含量分别为0．319±0．043、0．732±0．056、0．873±0．066，均明显高于对照组0．211±0．019（P值均〈0．05），且随低氧时间延长，表达量逐渐增多（F=167．49，P〈0．01）。结论低氧通过HIF-2α-ADRP途径诱导肝细胞脂肪沉积。; 程文会沈薇陈娟; 关键词：细胞低氧脂肪分化相关蛋白

乙肝病毒X蛋白对油酸钠诱导HepG2细胞脂质沉积的影响: 2012年; 目的探讨乙肝病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)是否增加油酸钠诱导HepG2细胞的脂质沉积。方法将质粒pIRES2-eGFP-HBx瞬时转染入HepG2细胞中,建立表达HBx的细胞模型(HepG2-HBx);以转染空载体pIRES2-eGFP(HepG2-pIRES2)和HepG2细胞(HepG2)作对照。观察转染后绿色荧光蛋白(GFP)的表达;转染后16 h开始用油酸钠处理各组细胞24、48 h(分别命名为HBx/OA组、空/OA组、G2/OA组),细胞内甘油三酯(TG)含量测定及油红O染色了解细胞内脂质沉积情况;在油酸钠处理细胞24 h,RT-PCR法检测SREBP-1和LXRα的mRNA表达水平,Westernblot检测HBx、LXRα及FAS蛋白表达水平。结果转染后16 h HepG2-HBx细胞和HepG2-pIRES2细胞中开始有GFP的表达,提示转染成功;仅在HepG2-HBx细胞内有HBx表达,表明HepG2-HBx细胞模型构建成功。在相同油酸钠处理的条件下,HBx/OA组细胞内脂质含量和TG含量与对照组相比均明显增加(P<0.01)。在油酸钠处理细胞24 h,HBx/OA组细胞内LXRα、SREBP-1的mRNA表达量和LXRα、FAS蛋白表达量较对照组均明显增加(P<0.01/0.05)。结论 HBx通过上调HBx-LXRα-SREBP1/FAS通路脂质合成相关基因表达,可能增加HepG2-HBx细胞对外界脂代谢紊乱因素的易感性,从而增加油酸钠诱导HepG2细胞脂质沉积。; 陈娟沈薇; 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝细胞脂肪变性油酸钠 HEPG2

乙型肝炎病毒X蛋白对HepG2细胞脂代谢相关基因表达的影响被引量：3: 2011年; 目的探讨乙型肝炎病毒x蛋白（HBX）对脂质代谢相关基因的影响及其在肝细胞脂肪变性发生中的作用。方法将质粒pIRES2-eGFP—HBX转染入HepG2细胞中，建立表达HBX的HepG2／HBx细胞模型；以转染空载体plRES2-eGFP（HepG2／pIRES2细胞）及未转染的HepG2细胞作为对照。转染后24、48、72h，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达；检测细胞内甘油三酯含量；RT—PCR方法检测固醇调节元件结合蛋白I（SREBP-1）和肝x受体（LXR）αmRNA表达水平；WesternMot检测HBX，LXRa及脂肪酸合成酶（FAS）蛋白表达的变化。多组间比较采用成组设计的方差分析，多组间的两两比较采用q检验；各基因表达量之间的关系采用Pearson相关分析。结果在转染后24、48、72h，HepG2／HBx细胞和HepG2／DIRES2细胞中有GFP的表达并随时间延长而增多、增强，仅在HepG2／HBx细胞内有HBx表达，并且随时间的延长而逐渐增加，差异有统计学意义（F=32．21，P〈0．05），提示成功建立HepG2／HBx细胞模型；在转染后24、48、72h，HepG2／HBx细胞内LXRamRNA相对表达量分别为0．386±0．055、0．505±0．071、0．649±0．058，SREBP-1mRNA相对表达量分别为0．395±0．055、0．548±0．047、0．795±0．058；LXRG[蛋白的相对表达量分别为0．178±0．036、0．263±0．047、0．347±0．058，FAS蛋白相对表达量分别为0．436±0．055、0．608±0．053、0．827±0．046，各相同时间点均较对照组明显增加（P〈0．05或JD〈0．01），并均随时间的延长而逐渐增多（P〈0．05或P〈0．01），且与HBX表达量均呈正相关（rLXRa=0．994，rsREBP-1=0．984，r’LXRa=0．989，rFAS=0．991，P〈0．05）。HepG2／HBX细胞内TG含量与对照组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HBx-LXRa-SREBP-1／FAS通路可能参与了调节脂质代谢相关基因的转录和表达，可能是引起肝细胞脂肪变发生的重要分子机制之一�; 陈娟沈薇程文会; 关键词：肝炎病毒乙型脂代谢障碍 HEPG2

短发夹状双链RNA抑制HCV IRES介导的基因表达: 目的:研究载体表达的短发夹状双链RNA(shRNA)对丙型肝炎病毒(HCV)内部核糖体进入位点(IRES) 介导的基因表达的特异性抑制作用。方法:利用PCR方法获得HCV IRES片段,定向克隆至载体pEGFP-N1 和...; 陈维贤陈娟张祯祯张秉祥黄爱龙; 文献传递

丙型肝炎病毒5’非翻译区不同结构域对其启动子活性的影响被引量：4: 2006年; 在前期工作已证实HCV基因组5’UTRDNA序列具有启动子活性的基础上,分别构建5’UTR不同结构域的DNA序列驱动虫荧光素酶基因表达的质粒pGL3-5’UTR,转染HepG2细胞以及用全长的5’UTRcDNA构建质粒分别转染HepG2、Hela、HEK293、L02细胞,用双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶的表达水平,逆转录聚合酶链反应检测虫荧光素酶基因mRNA水平,并与相应对照作比较。结果显示当四个结构域都具备时,荧光素酶相对活性为5.91±0.65,为SV40启动子的18.7%;失去结构域I以后,荧光素酶相对活性为9.52±0.32;失去结构域I和II以后,荧光素酶相对活性为2.64±0.25;失去结构域III和IV以后,荧光素酶相对活性为0.32±0.09;失去结构域IV以后,荧光素酶相对活性为2.72±0.45,逆转录聚合酶链反应结果与之相符;全长5’UTRcDNA在L02、hepG2、HEK293、Hela细胞中荧光素酶相对活性分别为0.75,0.49,0.23,0.14。结果提示结构域III是HCV5’UTRDNA序列具备启动子活性的核心结构,结构域I对其5’UTRDNA序列的启动子活性具有抑制效应,而结构域II和IV可增强5’UTRDNA序列的启动子活性;HCV5’UTRcDNA的启动子功能无组织特异性,但在正常的肝细胞(L02)中表达最高。; 陈娟陈维贤慕生枝张君黄爱龙; 关键词：结构域启动子活性

亲环蛋白A在肺部感染性疾病中的研究进展: 2024年; 亲环蛋白A(CyPA)是一种具有肽基脯氨酸顺式/反式异构酶(PPIase)活性的免疫亲和蛋白,广泛表达于肺等多种组织和器官中。在炎症反应或外部细胞因子刺激下,CyPA分泌到细胞外,通过与CD147等受体结合,激活ERK/NF-κB等信号通路,促进炎症细胞趋化及炎症因子释放,参与多种炎症性疾病的病理生理过程。CyPA表达水平与慢性气道炎症、急性呼吸窘迫综合征、新型冠状病毒肺炎等肺部疾病的炎症程度呈正相关,且靶向CyPA治疗能够减轻疾病的炎症水平及改善预后,本文介绍CyPA在常见肺部感染性疾病中的研究进展,为了解其在肺部感染性疾病中的作用机制提供参考。; 陈娟邓旺; 关键词：慢性气道炎症急性呼吸窘迫综合症病毒性肺炎

HepG2细胞中HCV NS5A蛋白对HCV IRES启动蛋白翻译的影响: 2007年; 目的探讨HepG2细胞中HCV非结构蛋白5A（NS5A）对HCV IRES启动蛋白翻译的影响，以了解HCV的复制调控机制。方法将构建的表达双荧光素酶的双顺反子载体pCMV-Rluc-IRES-Fluc和含HCV NS5A基因的表达质粒pcDNA-NS5A共转染HepG2细胞，用双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶的表达水平，细胞免疫荧光技术检测HCV-NS5A蛋白的表达，RT-PCR检测虫荧光素酶基因mRNA水平，并与相应对照做比较，以观察HCV NS5A对HCV IRES介导虫荧光素酶翻译水平的影响。结果转染pcDNA-NS5A的HepG2细胞中虫荧光素酶活性明显高于转染pCDNA3．I-3flag的对照组，并存在剂量依赖关系；而RT-PCR虫荧光素酶基因mRNA水平在两组间差异无统计学意义。转染pcDNA-NS5A的HepG2细胞质中可见HCV NS5A蛋白的表达。结论HCV NS5A蛋白对HCV IRES介导虫荧光素酶的翻译有正调节作用，并存在剂量依赖关系．; 陈娟陈维贤张祯祯黄爱龙; 关键词：丙型病毒非结构蛋白质类 HCV IRES

全选清除导出

共1页<1>

陈娟

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

陈娟

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈