胡智
- 作品数：19 被引量：130H指数：8
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>
- EB病毒LMP1通过NF-kB介导的HSV-tk/GCV治疗EBV相关肿瘤的研究被引量：3
- 2002年
- 目的:研究EB病毒潜伏膜蛋白1(EBV-LMP1)通过活化NF-kB反式激活HIV-LTR进而启动自杀基困HSV-tk在EBV相关肿瘤治疗中的作用,为进一步开展肿瘤治疗提供科学的实验依据。方法:以鼻咽癌细胞为实验模型,将HSV-tk基因置于HIV-LTR调控序列之下,构建LMP1调控且依赖于NF-kB的HSV-tk/GCV系统,采用同位素方法检测tk活性来研究LMP1通过NF-kB调控HSV-tk转录的靶向性和表达特征,MTT方法检测在GCV处理下肿瘤细胞的生长状况。结果:成功构建受LMP1调控且依赖于NF-kB的HSV-tk表达质粒,发现其在GCV处理下,表达LMP1的肿瘤细胞的生长有显著的抑制。结论;携带有LMP1-HSV-tk的细胞对GCV治疗高度敏感,显示这一肿瘤治疗系统在EBV相关肿瘤中具有一定的应用前景。
- 杨力芳王承兴胡智唐敏顾焕华翁新宪易薇曹亚
- 关键词：EBV-LMP1HSV-TK/GCV肿瘤治疗鼻咽癌
- 鼻咽癌转移相关基因的比较基因组杂交和cDNA微阵列研究被引量：8
- 2002年
- 为筛选在鼻咽癌转移中起重要作用的基因 ,应用比较基因组杂交 (CGH)和cDNA微阵列方法研究成瘤和转移能力不同的鼻咽癌细胞株 6 10B和 5 8F .CGH结果显示 ,2种细胞株在 5p、7q、8p、9q、11p、12q和 17p的一定区域存在差异性扩增 ,在 2q存在差异性缺失 ;cDNA微阵列显示 ,相对于非转移性 6 10B细胞株 ,高转移性 5 8F细胞表现一些基因表达的上调及下调 。
- 曾亮关新元唐发清赵燕胡智罗非君顾唤华曹亚
- 关键词：鼻咽癌转移相关基因比较基因组杂交CDNA微阵列
- JIP抑制鼻咽癌细胞中LMP1诱导的AP-1活性及机理的研究被引量：3
- 2002年
- 目的 :探讨鼻咽癌细胞中JIP抑制激活蛋白 1(AP - 1)信号转导途径的分子机制。方法 :用Dox诱导L7(Tet-on -LMP1-HNE2 )细胞表达LMP1,观察AP - 1活性的动力学变化 ,然后用不同浓度的JIP质粒转染L7细胞后 ,观察JIP的表达对LMP1诱导的AP - 1活性的影响 ,并用荧光免疫组化方法观察JIP抑制JNK核移位引起磷酸化的JNK在胞浆中的滞留。结果 :在转染JIP表达质粒 2 4h之后 ,抑制了活化的JNK核移位 ,下调了AP - 1的生物活性。结论 :JIP能够通过抑制磷酸化的JNK核移位 ,从而下调AP - 1活性。
- 胡智罗非君邓锡云殷莉群赵燕唐发清唐敏顾焕华易薇曹亚
- 关键词：NF-KAPPAJIP活性AP-1
- 茶多酚诱导鼻咽癌细胞Cyclin D1表达下调
- 目的:探索茶多酚及其单体抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制。方法:应用光学显微镜、MTT测定、流式细胞仪、报告基因和Western blot分析等方法,研究茶多酚及其单体对细胞增殖和细胞周期的影响及分子机理。
- 罗非君胡智赵晓荣邓锡云易薇顾焕华曹亚
- 文献传递
- EB病毒潜伏膜蛋白1通过Survivin介导细胞增殖和抑制细胞凋亡被引量：9
- 2003年
- 利用间接免疫荧光、基因转染、抗体剔除 (Ab knock out)、细胞平板集落形成、流式细胞术以及半胱氨酸天冬酰胺酶 (caspase3)活性检测等方法 ,从survivin核移位、Rb磷酸化、细胞周期演进、细胞克隆形成和细胞凋亡等方面 ,探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)调控细胞增殖和细胞凋亡双重效应的分子机制 .结果发现 ,LMP1表达介导survivin核移位 ,促进细胞Rb磷酸化增加 ,S期细胞数显著增加 ;LMP1通过survivin促进细胞克隆形成 .用Ab knock out阻断survivin核移位和survivin反义核酸抑制survivin表达时 ,Rb磷酸化水平降低 ,S期细胞减少 ,抑制LMP1介导的细胞增殖 ,活化细胞caspase 3,诱导细胞凋亡 .结果提示 。
- 唐发清顾焕华胡智唐敏翁新宪易薇曹亚
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1介导细胞凋亡
- JNK相互作用蛋白通过JNK途径影响鼻咽癌的增殖和凋亡(英文)被引量：27
- 2003年
- EB病毒编码的瘤蛋白潜伏膜蛋白 (LMP1)所介导的活化蛋白 (AP 1)信号转导途径在细胞增殖、分化、转化与凋亡方面发挥着重要作用 .越来越多的证据表明 ,AP 1信号转导通路中上游激酶JNK在鼻咽癌的发生发展过程中起着重要作用 .最近克隆出来的JNK相互作用蛋白 (JIP 1)是一种能抑制JNK核移位的胞浆锚蛋白 .为探讨JIP在LMP1调控AP 1信号通路中的作用机制 ,采用间接免疫荧光法和报告基因法 ,发现JIP通过有效地抑制磷酸化的JNK从胞浆移位入核 ,从而抑制LMP1上调的AP 1活性 .同时 ,JIP导入鼻咽癌细胞中 ,MTT法发现JIP能够明显抑制鼻咽癌细胞的生长 .进一步发现转染JIP后细胞的集落形成率与对照组相比大约降低了 5 3 6 % ,也抑制了细胞 .提示JIP可明显抑制细胞的增殖作用 .进一步采用流式细胞术分析 ,结果发现JIP引起细胞G1/S期细胞阻滞 ,说明JIP是抑制细胞增殖的重要调节子 .进一步采用流式细胞术定量发现 ,转染JIP后细胞的 2 4h凋亡百分率由 1 2 5 %上升到 8 2 5 % ,上升约 6 6倍 ,4 8h由 1 0 4 %上升到 31 4 5 % ,上升约 30倍 .采用激光共聚焦显微镜发现 ,转染JIP后细胞核发生显著变化 ,核质由均匀状态固缩成高凝集状态 ,形成了典型的胞膜体 .提示JIP可有效地促进细胞凋亡 .结果表明 ,JIP可通过抑制活化的JNK?
- 胡智陶永光唐发清杨力芳赵燕曾亮罗非君曹亚
- 关键词：JNK蛋白鼻咽癌增殖信号转导细胞增殖
- EB病毒潜伏膜蛋白1通过TRAF/TRADD激活JNK信号途径被引量：19
- 2002年
- 为了探讨在鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)激活c Jun氨基端激酶 (JNK)信号途径的分子机制 ,利用可调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系L7,蛋白质印迹检测 ,发现LMP1能够促进JNK的活化 ;利用稳定表达LMP1的鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1及其三种突变体HNE2 LMP1ΔCTAR 1、HNE2 LMP1ΔCTAR2、HNE2 LMP1ΔCTAR 1,2及LMP1阴性的HNE2 为材料 ,采用蛋白质印迹和报告基因法分析JNK和活化蛋白 1(AP1)活化情况 ,结果显示HNE2 LMP1和HNE2 LMP1ΔCTAR1中磷酸化JNK蛋白表达量和AP1活性都无显著差异 ,而与HNE2 LMP1ΔCTAR2、HNE2 LMP1ΔCTAR1,2、阴性对照HNE2及空白载体转染细胞的JNK蛋白表达和AP1活性具有显著差异 ;进一步比较转染TRAF、TRADD显性负性突变体鼻咽癌细胞系HNE2 LMP1中磷酸化的JNK量和AP1活性 ,结果显示 :TRAF DN和TRADD DN的导入使活化的JNK蛋白和AP 1活性显著降低 ,二者间无显著差异 ,提示TRAF和TRADD可能参与了LMP1对JNK和AP 1的活化 .以上结果提示在鼻咽癌细胞系中LMP1功能结构域CTAR2通过结合TRAF/TRADD激活JNK从而活化重要的转录因子AP1.
- 胡智曾亮陶永光唐发清王海罗非君易薇曹亚
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1鼻咽癌
- EB病毒编码的潜伏膜蛋白1参与鼻咽癌恶性演进的转录调控实验研究被引量：14
- 2002年
- 探讨EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)激活激活蛋白 1(AP1) ,和核转录因子 (NF κB)在鼻咽癌细胞SUNE 1及亚细胞株恶性演进中的作用 .运用报告基因法和凝胶电泳迁移率法 (EMSA)分析AP1和NF κB反式激活活性和DNA结合活性 ,蛋白质印迹检测蛋白质表达 ;裸鼠致瘤实验结合组织制片研究瘤细胞的成瘤和转移能力 .结果显示恶性程度不同的SUNE 1亚细胞株的反式激活活性、DNA结合活性、LMP1蛋白表达及c Jun氨基端激酶 (JNK)活性均存在明显差异 ,且与细胞恶性程度正相关 .这些结果提示LMP1活化AP1和NF κB的信号通路参与了鼻咽癌细胞SUNE 1的恶性演进过程 .
- 罗非君胡智曾亮唐发清顾焕华唐敏曹亚
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1鼻咽癌转录调控转录因子
- LMP1通过Survivin抑制^(60)Co诱导鼻咽癌细胞凋亡被引量：8
- 2003年
- 目的 研究EB病毒编码的潜伏膜蛋白 1(LMP1)介导凋亡抑制蛋白 (Survivin)表达对辐射效应的影响。方法 利用LMP1可调控表达鼻咽癌细胞系 (Tet on LMP1HNE2 )诱导LMP1表达 ,同时 60 Co照射 5Gy ,采用形态学观察、流式细胞术和半胱氨酸蛋白酶 3(Caspase 3)活性检测等方法 ,分析LMP1表达对60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡的影响。用反义Survivin寡核苷酸阻断Survivin表达 ,观察Sur vivin表达阻断对60 Co辐射效应的影响。结果 LMP1表达抑制60 Co诱导鼻咽癌细胞凋亡 ,LMP1表达60 Co照射组形态学和流式细胞术检测凋亡率 (32 .7%± 2 .1% ,6 .3% )明显低于LMP1表达阴性组 (6 6 .0 %± 3.0 % ,2 9.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;转染Survivin反义寡核酸后细胞凋亡率 (5 9.3%± 3.2 % ,3.0 % )明显高于对照组 (2 6 .0 %± 2 .6 % ,8.6 % ) (P <0 .0 5 ) ;同样转染Survivin反义寡核酸组Caspase 3活性 (3.78nmol/ 10 6)高于对照组 (2 .79nmol/ 10 6)。结论 提示LMP1通过介导Survivin表达而抑制60 Co照射诱导凋亡 ,Survivin反义核酸协同辐射诱导肿瘤细胞凋亡 ,Survivin作为增敏放射治疗靶 ,具有潜在的临床意义。
- 唐发清唐敏顾焕华易薇胡智曹亚
- 关键词：SURVIVIN细胞凋亡鼻咽癌癌细胞
- EB病毒潜伏膜蛋白1在鼻咽癌细胞中调节表皮生长因子受体磷酸化的研究被引量：7
- 2002年
- 目的 阐明EB病毒潜伏膜蛋白 1(LMP1)在鼻咽癌 (NPC)中调节表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化水平。方法 采用已建立的、受四环素调控的、LMP1表达的NPC细胞系 (pTet on LMP1HNE2 ) ,定量诱导pTet on LMP1HNE2细胞LMP1动态表达水平 ,并观察EGFR表达和磷酸化水平。采用瞬间转染方法 ,将EGFR显性负性突变体和LMP1antisense表达质粒分别导入pTet on LMP1HNE2细胞中 ,采用免疫共沉淀和Westernblot检测EGFR磷酸化 ;同时观察EGF刺激后对EGFR磷酸化前后的影响。结果 在pTet on LMP1HNE2细胞中 ,LMP1能诱导EGFR的表达和磷酸化 ,并随LMP1表达增加而增加。pTet on LMP1HNE2细胞在导入EGFR显性负性突变体后 ,不但完全阻断EGFR磷酸化 ,而且完全抑制EGF所引起的EGFR磷酸化 ;而导入LMP1antisense后 ,可显著地抑制EGFR磷酸化水平。结论 LMP1能同时诱导EGFR表达和上调EGFR磷酸化 ,并呈剂量相关效应 ,提示EGFR磷酸化可能在NPC发生发展过程中起着重要作用。
- 陶永光邓锡云胡智唐敏顾唤华易薇王承兴罗非君曹亚
- 关键词：EB病毒潜伏膜蛋白1鼻咽癌磷酸化
