耿学军
- 作品数：17 被引量：45H指数：4
- 供职机构：内蒙古民族大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- bpti基因的克隆及其在烟草中的表达
- 耿学军
- 关键词：BPTI烟草转基因
- 文献传递
- 人热休克蛋白70在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的在毕赤酵母(pichiapastoris)中高效表达人热休克蛋白70(hHSP70),制备具有天然与hHSP70相同结构和活性的重组hHSP70(rhHSP70)。方法用PCR法自人DNA文库中克隆hHSP70的DNA,构建真核表达载体pPICZα/hHSP70。经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X33。用PCR法筛选Zeocin抗性的转染阳性克隆,Westernblot法鉴定甲醇诱导的培养上清液中的rhHSP70,筛选高表达工程菌。结果经PCR法克隆的hHSP70DNA序列与GeneBank登录的cDNA序列一致。将hHSP70DNA定向插入pPICZα,构建pPICZα/hHSP70真核表达载体并经电转化获得Zeocin抗性的转染阳性克隆。SDSPAGE和Westernblot分析显示了甲醇诱导的培养基上清中含有rhHSP70,分子量72kD。氨基酸序列分析证实rhHSP70氨基端15个氨基酸与天然rhHSP70完全一致。rhHSP70表达量高达250mg·L-1。结论获得高效表达rhHSP70的毕赤酵母工程菌。
- 马杰焦平宿晓云贺巾超杨莉莉王建秋耿学军范伟全魏传宇张英罗琳孔宁颜炜群
- 关键词：基因表达毕赤酵母
- rhHSP70-HER2/neu抗原肽对小鼠乳腺癌的治疗作用研究
- 2008年
- 目的:使用在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽在特定条件下形成复合物,探讨其用于肿瘤生物治疗的可行性。方法:在ADP存在的条件下,将rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽体外非共价结合形成复合物,并分次免疫BALB/c小鼠,检测该复合物诱导特异性CTL的能力和对小鼠乳腺癌的治疗作用。结果:rhHSP70-HER2/neu抗原肽复合物免疫小鼠后,可以诱导出肿瘤特异性CTL,并对小鼠的乳腺癌有明显的治疗作用。结论:在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70可以在体外与一定的抗原肽非共价结合形成复合物,该复合物具有较强的诱导特异性CTL的能力。
- 马杰焦平陈月王毅耿学军宿晓云周余来颜炜群
- 关键词：抗原肽乳腺癌免疫治疗
- 沙葱总RNA的提取与质量分析被引量：2
- 2014年
- 以沙葱种子和沙葱幼叶为材料,分别用RNAiso Plus试剂法、RNAiso Plus醋酸钠改进法、CTAB-异丙醇法、CTAB-LiCl法4种不同的方法提取沙葱总RNA,经琼脂糖凝胶电泳,采用紫外分光光度法测定总RNA纯度并进行RT-PCR检测.结果表明,沙葱不同组织总RNA提取的最优方法有所不同.采用CTAB-LiCl法能有效地提取出沙葱种子高质量、完整性好而且无胶状不溶物的RNA,没有明显的蛋白和基因组DNA的污染.采用RNAiso Plus醋酸钠改进法能有效地去除沙葱幼叶中多糖的干扰,所提取的RNA条带清晰,完整性好,是沙葱幼叶总RNA提取的有效方法.
- 耿学军冯紫洲李晓江王海霞冯磊康宇王亚楠张美琳吴瑞芳张继星
- 关键词：沙葱PLUS总RNA
- 蓖麻RcAKT1基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2017年
- [目的]对蓖麻Rc AKT1基因进行克隆和序列分析。[方法]提取盐胁迫处理的蓖麻新鲜叶片总RNA,采取RACE法克隆蓖麻Rc AKT1基因的3'末端和5'末端,利用生物信息学软件DNAman对两端序列进行拼接,最后设计一对特异性引物,从而获得蓖麻Rc AKT1基因的ORF全长序列,并对该序列进行生物信息学分析。[结果]该基因的开放阅读框序列长度为2 253 bp,推测可不间断编码751个氨基酸。选取其他植物的AKT1序列与蓖麻Rc AKT1序列进行比对,结果显示同源性很高,其一致性在84%~97%。[结论]经过生物信息学分析,发现蓖麻Rc AKT1属于ANK超级家族,是亲水性蛋白质。
- 包丽坤耿学军
- 关键词：蓖麻基因克隆生物信息学分析
- 植物生理学设计性实验教学模式的探讨与实施被引量：2
- 2019年
- 为了培养学生的质疑能力、探索精神和创新能力,以"比较在逆境条件下同种植物不同品种抗性的强弱及各项生理指标的变化规律"为例,在内蒙古民族大学本科生中探讨和实施了植物生理学设计性实验教学模式.结果表明,设计性实验教学培养了学生独立动手能力、独立思考与探究能力,提高了学生操作仪器设备能力、综合运用知识能力,锻炼了学生创造性思维能力、分析问题和解决问题的能力.
- 刘海臣范伟全张继星耿学军霍红雁唐东娟杨艳妹张婷婷
- 关键词：植物生理学设计性实验
- 构建生物技术专业实践教学体系 培养创新型人才被引量：4
- 2012年
- 本研究从生物技术专业建设的三个层次(完善教学大纲、加强教学平台建设、强化教学环节)和实践教学的三大环节(即实验、实习、科研活动)为立足点,构建生物技术专业的实践教学体系(即基本技能训练—专业能力训练—综合能力训练—创新能力训练),培养本专业创新型人才。
- 黄凤兰陈永胜张继星李国瑞范伟全耿学军刘海臣刘燕锡林高娃乌日汗
- 关键词：生物技术实践教学体系
- 重组人热休克蛋白70-抗原肽复合物对肿瘤的免疫治疗作用研究被引量：8
- 2008年
- 目的:使用以毕赤酵母X-33为宿主菌,重组表达制备的rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽体外结合形成复合物,探讨其在肿瘤免疫治疗中的有效性。方法:在ADP存在的条件下,将rhHSP70与纯化的HER2/neu抗原肽体外非共价结合形成复合物,并分次免疫BALB/c小鼠,通过ELISPOT和颗粒酶释放法,检测该复合物诱导特异性CTL的能力。通过检测小鼠体内肿瘤的生长情况和肿瘤的组织切片,来观测该复合物对小鼠乳腺癌的免疫治疗作用。结果:rhHSP70-HER2/neu抗原肽复合物免疫小鼠后,可以增加T细胞分泌IFN-γ的能力,诱导出肿瘤特异性CTL,并对小鼠的乳腺癌有明显的治疗作用。结论:在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70可以在体外与一定的抗原肽非共价结合形成复合物,该复合物具有较强的诱导特异性CTL的能力,可对实验鼠的乳腺癌起到明显的治疗作用。
- 马杰蒋春晓焦平陈月耿学军颜炜群
- 关键词：细胞毒性T细胞肿瘤免疫治疗
- 蓖麻RcNHX2基因克隆与生物信息学分析被引量：11
- 2016年
- 液泡膜型钠氢逆向转运蛋白(Tonoplast Na^+/H^+antiporters,NHX)在植物耐盐方面具有重要意义。本研究利用RACE方法克隆了蓖麻Rc NHX2基因的3'端和5'端片段。最后设计全长引物获得蓖麻Rc NHX2全长序列,并对其进行生物信息学分析。结果表明,蓖麻液泡膜型钠氢逆向转运蛋白基因的c DNA完整的开放阅读框序列为1 626 bp,推测其可编码541个氨基酸;含有典型的液泡膜型钠氢逆向转运蛋白典型的Na^+/H^+交换泵(^(50)NES^(52))和氨氯吡嗪咪的结合位点(^(84)LFFIYLLPPI^(93));存在12个跨膜结构域,属于跨膜蛋白;预测其定位于细胞质膜和液泡膜及内质网膜。
- 冯紫洲耿学军李平张继星陈永胜陈永胜冀照君霍红雁冀照君穆莎茉莉
- 关键词：蓖麻基因克隆生物信息学分析
- 毒草小花棘豆的地下与地上部分生物碱成分对比分析被引量：1
- 2007年
- 为考察小花棘豆地上部分和地下部分中生物碱主要成分种类和含量的异同.采用酸碱法提取,LC-MS法检测生物碱成分.分别获得了小花棘豆地上部分和地下部分的总离子流图和主要成分准分子离子的质谱数据.结果表明,小花棘豆地下部分含有生物碱成分,地上部分和地下部分主要生物碱成分的种类和含量略有不同,地下部分至少比地上部分多2种生物碱成分.
- 范伟全刘永刚张宏桂耿学军张继星
- 关键词：小花棘豆液-质联用生物碱
