罗秋平
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组腺病毒Ad5F35-SH2-DED对K562细胞裸鼠致瘤能力的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:研究融合蛋白SH2-DED(SD)对白血病K562细胞裸鼠皮下移植瘤的影响。方法:建立K562细胞裸鼠皮下移植瘤的重组腺病毒预防和治疗模型。预防模型采用皮下注射经重组腺病毒Ad5F35-SD或Ad5F35-SmD预处理的K562细胞;治疗模型采用皮下注射K562细胞建立皮下移植瘤后,进行Ad5F35-SD或Ad5F35-SmD的瘤体内多点注射。观察裸鼠移植瘤的生长情况以及移植瘤肿瘤细胞的形态学变化。应用TUNEL法和电子显微镜观察移植瘤肿瘤细胞的凋亡情况。结果:治疗模型组中,Ad5F35-SD处理组移植瘤体积明显缩小,肿瘤细胞核浓缩,细胞质染色加深。TUNEL法和电子显微镜检测结果提示,肿瘤细胞发生凋亡,且凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-8表达上调。Ad5F35-SD在预防模型组中同样具有抑制移植瘤生长的作用。结论:重组腺病毒Ad5F35-SD能够抑制K562细胞在裸鼠体内的致瘤能力以及裸鼠皮下移植瘤的生长,并促进肿瘤细胞凋亡。
- 邓晶荣史静肖青胡晶彭智罗秋平冯文莉
- 关键词：K562细胞
- 重组腺病毒Ad5-hSH2抑制Bcr-AbI Y177磷酸化对白血病K562细胞增殖的影响
- ＜正＞目的:具有强烈激活酪氨酸激酶活性的Bcr-Abl融合蛋白可异常激活其下游RAS-MAPK、PI3K-AKT等多条细胞信号转导途径,导致血细胞的恶性转化。本课题构建并鉴定与Bcr-Abl Y177磷酸化位点相关的SH...
- 李亚娟王海霞史静彭智罗红伟罗秋平冯文莉
- 文献传递
- 重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP的构建及其对K562细胞增殖的影响被引量：3
- 2011年
- 目的构建表达SH2-DED融合基因的新型重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP,观察其对K562细胞增殖的抑制作用。方法重叠PCR扩增SH2-DED融合基因并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建成穿梭质粒pAdT-SD-EGFP并进行酶切和测序鉴定。穿梭质粒经Pme I酶切后转化pAd5F35-GFP的BJ5183感受态,通过细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAd5F35-SD-EGFP及其突变体,Pac I酶切后转染AD293细胞进行包装。重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP经PCR和western blot鉴定后进行病毒扩增和滴度测定。体外感染K562细胞,通过MTT和流式周期检测实验观察Ad5F35-SD-EGFP对K562细胞增殖的影响。结果 PCR、酶切和测序结果均表明pAdT-SD-EGFP和pAd5F35-SD-EGFP构建成功;PCR、EGFP检测结果证明重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP包装扩增成功,滴度可达1.4×1012 pfu/ml。转染K562细胞后,Western blot可检测到目的蛋白的表达,MTT实验和流式周期检测结果证明其对K562细胞的增殖有明显的抑制作用。结论成功构建并鉴定了携带SH2-DED融合基因的重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP,其对BCR-ABL阳性K562细胞的增殖有明显的抑制作用。
- 史静胡晶肖青彭智曹唯希罗秋平王方冯文莉
- 关键词：SH2重组腺病毒
- 重组腺病毒AdE-SH2-Caspase8-HA-GFP对耐伊马替尼的K562/G01细胞增殖的影响
- 2013年
- 研究表达融合蛋白SH2-Caspase8的重组腺病毒AdE-SH2-Caspase8-HA-GFP对耐伊马替尼的BCR/ABL阳性的慢性粒细胞白血病(CML)K562/G01细胞增殖的影响。荧光显微镜观察病毒感染效率,Western blot检测融合蛋白的表达情况,MTT和细胞计数检测细胞的生长情况,流式细胞仪分析细胞增殖周期,甲基纤维素克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力。结果显示,荧光显微镜观察病毒感染效率高,Western blot能检测到目的蛋白的表达,MTT和细胞计数检测可见,与对照组相比AdE-SH2-Caspase8-HA-GFP能显著抑制细胞的生长;流式周期检测发现,AdE-SH2-Caspase8-HA-GFP组G1期细胞比例增加,S期和G2期细胞比例减少;克隆形成实验可见,AdE-SH2-Caspase8-HA-GFP能显著抑制细胞克隆的形成。综上所述,重组腺病毒AdE-SH2-Caspase8-HA-GFP表达的SH2-Caspase8融合蛋白能明显抑制耐伊马替尼的K562/G01细胞的增殖。
- 王林罗秋平黄峥兰李会刘张玲祖白玲冯文莉向华
- 关键词：细胞增殖BCRABLSH2结构域CASPASE8
- 重组腺病毒Ad5F35-SD对耐伊马替尼的慢性粒细胞白血病细胞株K562/G01效应的体外实验研究
- 目的：具有强烈酪氨酸激酶活性的BCR-ABL融合蛋白在慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia，CML)发生和发展过程中起着关键性的作用。BCR/ABL蛋白激酶特异性抑制剂伊马替尼(Imatin...
- 罗秋平
- 关键词：慢性粒细胞白血病BCR-ABL融合蛋白SH2结构域重组腺病毒载体伊马替尼
