李金龙
- 作品数：31 被引量：76H指数：6
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- 三氯氧磷中毒与处理被引量：2
- 2014年
- 三氯氧磷（phosphorus oxychloride,POCl3）室温下为无色液体,易挥发,遇潮湿空气形成白烟,水解为磷酸和盐酸液滴.工业生产中三氯氧磷可作为催化剂、反应试剂等参与多种有机反应,从而广泛应用于农药、医药、染料、磷酸酯及阻燃剂的生产[1].如：POCl3作为催化剂可明显降低合成喹唑啉环的Niementowski反应温度,且产物易于分离纯化,因此被用于合成以喹唑啉酮为母体结构的药物[2].三氯氧磷作为原料用于合成新型磷系阻燃剂,磷系阻燃剂可有效地克服传统的卤系阻燃剂的缺点,越来越受到人们的重视[3-4].三氯氧磷对人有很高的毒性,在生产和使用过程中可因容器破裂、管道泄漏等意外事故造成三氯氧磷中毒事件.对其毒性作用的研究具有重要的临床与科研意义.
- 程文伟张春华李金龙
- 关键词：反应温度喹唑啉酮毒性作用阻燃剂分离纯化中毒事件
- 链亲和素标记的白细胞介素4双功能融合蛋白锚定治疗小鼠浅表性膀胱癌被引量：3
- 2012年
- 目的探讨链亲和素标记的白细胞介素4（IL-4-SA）双功能融合蛋白治疗小鼠浅表性膀胱癌的效果。方法制备IL-4-SA双功能融合蛋白，测定其体外生物学活性。建立小鼠浅表性膀胱癌模型，膀胱经生物素化后给予IL4-SA灌注治疗，观察小鼠生存期，并以链亲和素标记的绿色荧光蛋白（GFP—SA）＋IL-4和磷酸盐缓冲液（PBS）作为对照组。检测各组小鼠脾细胞的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤活性和CD8＋肿瘤浸润淋巴细胞。结果IL4．SA能够锚定于生物素化的膀胱表面达5d以上。在MIM9细胞种植后的第80天，PBS组小鼠全部死亡，GFP-SA＋IL-4组小鼠存活2只，而IL4-SA组小鼠存活5只。在肿瘤特异性杀伤实验中，在效靶比为1：1、25：1、50：1时，PBS组小鼠的CTL杀伤率分别为（3．3±0．6）％、（7．3±0．6）％和（12．7±2．1）％，GFP．SA＋IL4组小鼠的CTL杀伤率分别为（4．3±0．6）％、（9．0±1．0）％和（14．3±1．5）％，而IL4-sA组小鼠的CTL杀伤率分别为（11．3±1．2）％、（22．7±1．5）％和（31．0±3．0）％，IL4-SA组与PBS组和GFP—SA＋IL-4组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。CD8＋淋巴细胞检测结果显示，PBS组和GFP．SA＋IL4组的肿瘤组织内仅有少量的CD8＋淋巴细胞浸润，而IL-4-SA组则有较多的CD8＋淋巴细胞浸润。结论IL4-SA锚定膀胱表面能够产生强烈、持久的免疫应答反应，有可能成为浅表性膀胱癌的一种新灌注治疗方法。
- 张振许晓玲马磊李金龙胡志明高基民
- 关键词：膀胱肿瘤白细胞介素4链亲和素融合蛋白小鼠
- mIL-4-SA双功能融合蛋白的制备和活性测定被引量：2
- 2010年
- 目的制备链亲和素标记的鼠白介素4(mIL-4-SA)融合蛋白,并研究其生物学功能。方法通过RT-PCR克隆mIL-4基因,构建mIL-4-SA-pET21表达质粒,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,对表达的融合蛋白采用镍金属螯合(Ni-NTA)色谱柱纯化、透析复性。MTT法检测融合蛋白对C57小鼠胸腺细胞的增殖作用,流式细胞仪分析融合蛋白对生物素化的B16F10细胞锚定修饰率。结果成功构建了mIL4-SA-pET21质粒,并在大肠杆菌中实现高效表达,表达量达菌体总蛋白质的35%,纯化后的mIL-4-SA融合蛋白纯度达95%,并具有双重活性,即mIL-4对C57小鼠胸腺细胞具有增殖作用和SA介导的高效结合至已生物素化的B16F10肿瘤细胞表面的功能(表面锚定修饰效率96.69%)。结论研制的mIL-4-SA融合蛋白具有双重活性,可为研制表面修饰的新型肿瘤细胞疫苗提供基础。
- 张振法萍萍李金龙胡志明高基民
- 关键词：链亲和素融合蛋白
- mIL21-SA双功能融合蛋白锚定治疗膀胱癌实验研究
- 2012年
- 目的:制备链亲合素标记的鼠白细胞介素21融合蛋白(mIL21-SA),治疗小鼠表浅膀胱癌。方法:构建mIL21-SA-pET21质粒,BL21表达,Ni-NTA纯化,透析复性,Western blot鉴定,MTT法检测其对小鼠胸腺细胞的增殖作用,流式检测其对生物素化的MB49锚定修饰率。建立小鼠MB49表浅膀胱癌模型,将mIL21-SA锚定在小鼠膀胱表面进行治疗并观察小鼠存活时间。60d后对mIL21-SA治疗后存活小鼠进行二次攻击。结果:mIL21-SA可以促进T细胞增殖,且具有SA介导的高效结合已生物素化的MB49表面的功能(修饰率98.74%)。膀胱灌注60d后,mIL21-SA组有10只(10/25)存活,二次攻击后,仍有6只(6/10)存活。与对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论:该实验研制了具有双重活性的mIL21-SA,mIL21-SA锚定修饰治疗表浅膀胱癌是一种有效的免疫治疗方法。
- 王菲胡志明法萍萍白莉石小军罗满生李金龙高基民
- 关键词：白细胞介素21表浅膀胱癌
- 短暂性脑缺血发作危险等级分层策略
- 2012年
- 短暂性脑缺血（TIA）有进展为缺血性卒中的风险，是脑梗死的先兆症状，也是治疗干预的最佳时机。未经治疗的TIA患者1／3发展成为脑梗死，1／3反复发作，1／3可自行缓解。TIA病程可逆，对于TIA患者进行快速危险等级分层并积极进行干预可防止脑梗死的发生，如何正确评估、处理应对TIA是临床医生尤其是急诊医生面临的难题。
- 程文伟李金龙
- 关键词：短暂性脑缺血发作级分TIA患者治疗干预缺血性卒中先兆症状
- 去甲斑蝥素诱导肿瘤干细胞凋亡作用研究被引量：9
- 2017年
- 目的探究去甲斑蝥素(NCTD)对肿瘤干细胞促凋亡作用。方法分别以UMUC-3膀胱癌和Hep G2肝癌细胞为研究对象,通过无血清、低吸附、单克隆的方法筛选肿瘤干细胞(CSC),实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测CSC干性标志物表达变化,MTS法检测NCTD及紫杉醇(PTX)对CSC的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 2种细胞经筛选获得成球生长细胞克隆,其干性基因NANOG、OCT4、ABCG2、CD133、CD34表达明显升高,释放入含血清培养基后干性基因表达下调。经筛选所得的CSC对PTX高度耐药,但对NCTD耐药性低。NCTD可诱导CSC凋亡,但对干性基因表达没有显著影响。结论 NCTD诱导凋亡杀伤CSC,但对CSC分化没有显著影响。
- 颜道宇郑典鹏高维鸿李金龙
- 关键词：肿瘤干细胞去甲斑蝥素细胞分化细胞凋亡
- 生物技术专业大学生创新教育研究与实践被引量：7
- 2010年
- 该文根据生物技术专业的学科特点,以培养学生创新素质为目标,从重视理论教学、优化实验教学和建立有效的教学反馈机制等方面,对生物技术专业的理论与实验教学进行了创新教育研究与实践。
- 李金龙胡志明高基民
- 关键词：生物技术创新教育教学方法
- 去甲斑蝥素抑制紫杉醇诱导的UMUC-3人膀胱癌细胞有丝分裂滑脱被引量：2
- 2016年
- 目的:探究有丝分裂滑脱在UMUC-3细胞紫杉醇(PTX)耐药中的作用,以及去甲斑蝥素(NCTD)对有丝分裂滑脱的抑制作用.方法:以UMUC-3膀胱癌细胞为研究对象,通过Giemsa染色、流式细胞术观察UMUC-3细胞有丝分裂相;台盼蓝染色测定细胞活力;Western bloting检测Cdc6、p-Cdk1蛋白表达水平变化;通过TCGA数据库,分析Cdc6表达与膀胱癌病人生存及预后关系.结果:PTX作用后出现多倍体细胞,G2/M期比例呈现先上升后下降趋势,表明细胞出现有丝分裂滑脱.滑脱呈时间依赖性增加;第4天滑脱细胞数超过50%,且细胞活力开始升高.PTX处理第3天加入NCTD,可有效地阻止多倍体细胞的出现,阻滞细胞于G2/M期,并逆转PTX耐药.机制研究发现,滑脱细胞中Cdc6蛋白表达明显上调,Cdk1活性受到抑制;NCTD可下调Cdc6,维持Cdk1活性.TCGA数据分析显示,Cdc6在膀胱癌中高表达,并提示预后不良.结论:Cdc6通过促进有丝分裂滑脱可介导PTX耐药,NCTD可以通过降解Cdc6逆转PTX耐药.
- 何悦颜道宇尤昕冉郑典鹏李金龙
- 关键词：去甲斑蝥素紫杉醇CDC6
- 趋势分析和预测在VoD系统中的应用
- 首先,文中论述了三种典型的分布式VoD服务器(层次型DVS、网状DVS和基于集群服务器DVS)的节目存储和轮换策略.其次,经对中山大学软件所VoD系统的用户点播数据进行细致分析,发现大部分节目点播概率的变化过程均由增长、...
- 李金龙
- 关键词：VOD系统
- 文献传递
- CD80-链亲和素融合蛋白锚定的鼻咽癌CNE2细胞增强T细胞的杀伤活性被引量：1
- 2010年
- 目的:制备CD80-链亲和素(streptavidin,SA)融合蛋白,研究CD80-SA锚定的鼻咽癌CNE2细胞对T细胞杀伤活性的影响。方法:pET21a-CD80-SA-6His质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导CD80-SA融合蛋白的表达,经Ni-NTA亲和层析纯化后透析复性。流式细胞仪检测CD80-SA融合蛋白在CNE2细胞表面的锚定效率;LDH释放法检测CD80-SA锚定的CNE2细胞对T细胞杀伤活性的影响。结果:成功制备和纯化了CD80-SA融合蛋白。CNE2细胞表面低表达CD80分子[(2.2±0.18)%]。CD80-SA融合蛋白可有效地锚定于生物素化的CEN2细胞表面,锚定效率可达73%。CD80-SA锚定的CNE2细胞可有效激活T细胞的杀伤作用,效靶比在1∶1、1∶20、1∶40时T细胞的杀伤率分别约为(37±3.12)%、(51±2.63)%和(58±2.47)%,均显著高于对照CNE2细胞激活的T细胞(均P<0.01)。结论:CD80-SA融合蛋白可有效锚定于生物素化的CNE2细胞表面,从而增强T细胞对CNE2细胞的杀伤活性。
- 李金龙常红胡志明高基民
- 关键词：CD80链亲和素鼻咽癌细胞T细胞杀伤
