李萍华
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结缔组织生长因子介导高糖诱导肾小管上皮细胞肥大的机制
- 李萍华汤珣郭婷婷章俊
- 针对CTGF的siRNA对高糖诱导小鼠足细胞nephrin、podocin减少的影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在高糖诱导小鼠足细胞nephrin、podocin表达减少中的作用,及针对CTGF基因的siRNA对其影响。方法将体外培养的小鼠足细胞分为6组:(1)正常对照组,1640培养基含D-葡萄糖1 g/L;(2)等渗对照组,1640培养基含D-葡萄糖1g/L,甘露醇3.5 g/L;(3)高糖组,1640培养基含D-葡萄糖4.5 g/L;(4)高糖+空白对照组:细胞转染空白质粒后于含D-葡萄糖4.5 g/L中的1640培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:细胞转染含无关序列的重组质粒后于含D-葡萄糖4.5 g/L中的1640培养基中培养;(6)高糖+干扰组:细胞转染针对CTGF的siRNA表达质粒后于含D-葡萄糖4.5 g/L中的1640培养基中培养。应用Realtime PCR检测nephrin、podocin、CTGF mRNA水平,Western blot检测CTGF、nephrin、podocin蛋白表达水平。结果高糖可诱导CTGF mRNA及蛋白表达增加,下调足细胞的nephrin、podocin mRNA及蛋白水平,而通过特异性siRNA抑制CTGF mRNA表达后,CTGF表达减少,同时伴有细胞nephrin、podocin表达升高。结论 CTGF是高糖诱导小鼠足细胞损伤的重要介质,高糖可通过CTGF诱导nephrin,podocin表达减少。针对CTGF的siRNA能明显改善这种损伤,为DN发病机制的研究提供新的实验依据。
- 杨蕾汤珣李萍华杜庆生郭婷婷章俊
- 关键词：结缔组织生长因子小分子干扰RNA足细胞
- 高糖通过结缔组织生长因子诱导足细胞减少podocalyxin的表达被引量：7
- 2011年
- 目的探讨高糖对小鼠足细胞podocalyxin表达的影响及结缔组织生长因子(CTGF)参与其损伤的可能机制。方法构建针对CTGF基因的特异性siRNA质粒并转染至小鼠足细胞。将体外培养的足细胞分为6组(1)正常对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1g/L;(2)等渗对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1g/L,甘露醇3.5g/L;(3)高糖组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖4.5g/L;(4)高糖+空白对照组:足细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:足细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6)高糖+干扰组:足细胞转染针对CTGF的siRNA表达质粒后于高糖培养基中培养。Western blot方法检测小鼠足细胞Podocalyxin、CTGF蛋白表达及细胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平。结果高糖培养足细胞24、48h时均可下调其Podocalyxin蛋白表达量(P<0.05),并可诱导CTGF蛋白表达增加(P<0.05)。同时高糖可以活化足细胞ERK1/2信号途径,在高糖刺激30min时开始活化,持续活化至24h。特异性siRNA干扰CTGF合成后,ERK1/2活化减少,并且足细胞Podocalyxin表达升高。结论 CTGF是高糖诱导小鼠足细胞损伤的重要介质,可通过ERK1/2途径诱导podocalyxin表达下降,针对CTGF的siRNA能明显改善podocalyxin表达量,为DN的治疗提供新的思路。
- 章俊李萍华杨蕾杜庆生郭婷婷汤珣
- 关键词：结缔组织生长因子小分子干扰RNA糖尿病肾病足细胞
- siRNA沉默CTGF表达对高糖诱导小鼠足细胞损伤的影响
- 研究背景
糖尿病肾病/(Diabetic nephropathy, DN/)临床上以持续性蛋白尿和肾功能进行性减退并最终进展至终末期肾衰竭为主要特征,目前是糖尿病严重并发症之一。在DN发病早期,以尿微量白蛋白为主...
- 李萍华
- 关键词：结缔组织生长因子小分子干扰RNA足细胞
- 文献传递
