李沫
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 翻译后修饰可能影响黄瓜花叶病毒2b蛋白抑制子活性及稳定性
- 2011年
- 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)编码的2b蛋白具有RNA沉默抑制子功能,为了研究翻译后修饰对2b功能的影响,利用反向PCR定点突变方法对CMV-Q株系2b蛋白的1个预测的磷酸化位点(S40)和2个预测的泛素化/SUMO化位点(K22,K39)进行了点突变,同时将点突变体插入植物表达载体。通过农杆菌共注射法对3个2b突变体的抑制子活性进行了分析,结果证明,当S40突变为A(2bS40A)后,2b抑制局部和系统沉默的活性均大幅降低;当K22突变为R(2bK22R)后,2b的抑制子活性无明显变化;而将K22和K39均突变为R(2bK22R/K39R)后,2b抑制系统沉默的活性则大幅减弱。对叶片中2b突变体的蛋白含量的Western blotting检测表明,与野生型2b蛋白相比,2bK22R在植物中积累水平变化不大,而2bS40A和2bK22R/K39R的蛋白积累量则明显降低,说明K39和S40位点在维持2b蛋白的抑制子活性及其在植物细胞中的稳定性方面起重要作用。
- 李沫贾燕涛方荣祥
- 关键词：黄瓜花叶病毒翻译后修饰
