曹景林
- 作品数：5 被引量：55H指数：3
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 适用于蛋白质双向电泳的棉花胚性培养物蛋白质提取技术被引量：9
- 2009年
- 以陆地棉品种Coker 201为材料,对与甲醇/醋酸铵丙酮沉淀结合的酚抽提法和裂解液配方进行了优化,建立了适用于蛋白质双向电泳体系的棉花胚性培养物蛋白质样品制备技术。对胚性培养物,通过添加PVPP研磨和丙酮、TCA/丙酮、甲醇/醋酸铵等有机溶剂的系列洗涤,然后再进行酚抽提,蛋白质质量得到显著改善,获得的2-DE图谱质量高、可分辨的蛋白质点数多。比较分析3种裂解液对蛋白质的溶解效果发现,在裂解液中混合采用7 mol.L-1尿素2、mol.L-1硫脲以及4%CHAPS是最有效的配方。
- 曹景林朱龙付谭家福邓锋林李允静郝娟徐士成张献龙
- 关键词：棉花蛋白质双向电泳
- 棉花高效体细胞胚发生及同步控制培养体系研究被引量：12
- 2008年
- 棉花体细胞胚胎发生的频率低,且体细胞胚的发育存在着不同步性,给体细胞胚胎发生发育过程的生理学、生物化学和分子生物学的研究带来许多困难。本研究以陆地棉品种Coker201为材料,建立了一种简单有效的棉花体细胞胚高频率发生和同步发育的培养体系。经过多次继代获得的胚性愈伤,首先在液体培养基中振荡培养2d使其分散,然后过30目筛去除大的颗粒,重新悬浮于同样的液体培养基中。悬浮培养14d后,过50目筛,将筛上的胚性愈伤重悬浮于新鲜的培养基中,并用吸管吸取悬浮液,将其均匀地接种在表面垫有滤纸的同成分固体培养基(附加2.46μmolL-1IBA和0.70μmolL-1kinetin)上。培养21d后,用垫有滤纸的相同的固体培养基继代培养。利用这种培养体系,获得的体细胞胚数量分别是单纯悬浮培养和固体培养(不垫滤纸)的16.5倍和4.0倍。其中,球形胚、鱼雷形胚和子叶胚的同步发生率分别为70.2%、52.3%和73.0%。
- 曹景林张献龙金双侠杨细燕朱华国付莉莉
- 关键词：棉花体细胞胚胎发生同步控制
- 棉花体胚同步发生及相关基因表达和蛋白磷酸化分析
- 体细胞胚胎发生是体细胞向胚胎发生途径转变的发育再建过程，也是植物全能性预言的最好说明。体细胞胚发生现象被看作是开展生物学理论研究的良好模型。研究棉花体细胞胚发生对于阐明植物发育的分子机理，促进作物的遗传工程改良，无论在基...
- 曹景林
- 关键词：棉花基因表达蛋白磷酸化同步控制CKII双向电泳
- 文献传递
- 一种用植物介导CRISPR技术挖掘烟草青枯病抗性基因的方法
- 本发明涉及植物基因工程技术领域，且公开了一种用植物介导CRISPR技术挖掘烟草青枯病抗性基因的方法，包括以下步骤：1)、2)和3)。该用植物介导CRISPR技术挖掘烟草青枯病抗性基因的方法，以NtTOGT基因序列作为靶序...
- 金双侠张献龙曹景林孙艺文斯欢
- 文献传递
- 棉花纤维发育和体细胞胚发生过程中实时定量PCR内对照基因的筛选被引量：33
- 2007年
- 实时定量PCR技术(qRT-PCR)能够快速地对多个样品进行基因表达分析,因此已成为芯片和微点阵数据验证的常用手段.为了得到更精确的数据,通常需要一个和多个内对照基因来平衡化qRT-PCR数据.目前一般选择持家基因(housekeeping gene)作为内对照,但很多持家基因的表达水平随着环境的改变而改变.在棉花纤维发育和体细胞胚发生机制研究过程中已经产生大量芯片和微点阵数据,但目前在采用实时定量PCR验证这些数据时都只用了一个持家基因来平衡化数据.为了验证其可靠性,本研究根据常用的持家基因(18S rRNA,Histone3,UBQ7,Actin,Cyclophilin,Gbpolyubiquitin-1和Gbpolyubi-quitin-2)设计了7对引物,用相对的绝对定量法验证了在棉花不同组织和不同发育阶段(21个样品)表达水平的稳定性,发现在纤维发育的后期(17 DPA(day post anthesis)以后),这些基因的表达都下调,而纤维发育后期特异表达基因AGP的表达从15DPA开始到27DPA一直都呈上升趋势.因此对于纤维系列特别是纤维发育后期基因的qRT-PCR更好的选择是相对的绝对定量.而对于非纤维系列,这些持家基因的表达水平相对纤维系列变化幅度较小,但为了得到更精确的表达数据,应该同时用Histone3,UBQ7和Gbpolyubiquitin-1一起来平衡化qRT-PCR数据.
- 涂礼莉张献龙刘迪秋金双侠曹景林朱龙付邓锋林谭家福张存斌
- 关键词：棉花纤维发育体细胞胚胎发生
