房青 作品数:78 被引量:234 H指数:8 供职机构: 中日友好医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 航空宇航科学技术 更多>>
新型细胞太空无源搭载装置可行性的深入分析 本文对新型细胞太空无源搭载装置可行性进行了分析。文章通过详尽地研究长期培养于无源搭载装置中B16和CHO(dhfr-)细胞的生理特性,证明此装置对细胞无显著影响,适合太空长期无源搭载. 房青 向青 徐梅 徐波 李红艳 郭宇鹏 耿传营 唐劲天关键词:空间生物学 太空环境 细胞生存 文献传递 同一组织来源的肝癌干细胞分化能力异质性的体外研究 被引量:1 2014年 目的通过比较肝癌干细胞的不同单细胞克隆的体外分化能力,分析同一组织来源的肿瘤干细胞分化能力是否具有异质性,以进一步明确肿瘤干细胞的分化特性,为靶向肿瘤干细胞的治疗提供实验依据。方法通过有限稀释法对肝癌干细胞进行单细胞克隆培养,获得的单细胞克隆通过MTT测定比较其增殖能力。然后分别挑选增殖速度较快和较慢的3个克隆,采用RT-PCR方法比较其干细胞标志物表达水平。对干细胞标志表达水平高的3个克隆(A2、A3和B2)进行向成骨、软骨和脂肪方向的诱导分化。采用实时荧光定量PCR方法检测诱导前后成骨、软骨和脂肪标志分子的表达。结果获得的20个单细胞克隆增殖能力不同,并且增殖能力快的克隆表达干细胞标志物CD133、Oct4、c-kit、SCF、nestin比增殖能力慢的克隆强。向成骨方向诱导后,A2、A3和B2克隆I型胶原mRNA表达水平分别升高了(4.71±0.11)、(2.13±0.15)和(3.82±0.3)倍;骨钙素mRNA的表达水平分别升高(8.55±0.18)、(7.02±0.03)和(7.91±0.09)倍,说明A2克隆向成骨细胞分化能力最强。向软骨方向诱导后,B2分化能力最强,软骨标志分子蛋白聚糖和II型胶原的表达分别上调(25.01±0.19)倍和(17.49±0.19)倍,而在A2未发生明显变化,A3只轻微上调。向脂肪方向诱导后,A2、A3和B2克隆脂联素mRNA表达水平分别升高了(6.12±0.15)、(11.45±0.36)和(12.41±1.03)倍,过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA的表达水平分别升高(4.92±0.02)、(9.54±0.18)和(8.96±0.11)倍。结论来源于同一组织的肝癌干细胞在分化能力上具有异质性,这可能是导致肿瘤组织异质性的原因之一,也提示靶向肿瘤干细胞的治疗需要联合用药。 刘虹麟 许世清 彭亮 王在 房青 娄晋宁 秦蕾 王培刚 张文健关键词:肿瘤干细胞 细胞分化 间质细胞 胰岛素样生长因子基因在非酒精性脂肪变性肝细胞模型中的表达及其意义 2012年 目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)基因在非酒精性脂肪变性肝细胞模型中的表达变化及其意义。方法用油酸诱导永生化人肝细胞(IHH)建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型,油红O染色和细胞内甘油三酯含量检测观察细胞脂肪变情况。IHH细胞分为对照组和NAFLD组,对照组细胞以DMEM/F12培养基培养,NAFLD组给予油酸0.5mmol/L处理72h。采用逆转录酶-聚合酶链反应及Westemblot和免疫荧光染色方法检测IGF-1和IGFBP-3在两组细胞中的mRNA及蛋白质表达变化。组间均数比较采用t检验。结果0.5mmol/L油酸可成功诱导IHH细胞脂肪变性,油红O染色显示细胞内脂肪滴明显增多,细胞内甘油三酯含量从对照组的(150.2±15.6)μg/mg升高到(275.7±27.2)ug/rag(t=21.67,P〈0.01)。油酸诱导后,NAFLD组细胞中IGF-1和IGFBP-3的mRNA相对表达量(分别为0.76±0.04和1.58±0.93)均较对照组(分别为4.82±1.51和5.41±1.37)明显下降,t值分别为17.915和12.893,P值均〈0.01;IGF-1和IGFBP-3的蛋白质相对表达量(分别为1.00±0.29和0.65±0.36)也较对照组(分别为2.56±0.71和1.23±0.91)明显下降,t值分别为29.17和32.12,P值均〈0.01。免疫荧光染色结果也证实NAFLD组细胞中IGF-1和IGFBP-3的蛋白质表达较对照组明显下降。结论非酒精性脂肪变性肝细胞模型的IGF-1和IGFBP-3表达下降,为深入研究临床上部分非酒精性脂肪肝病儿童身高受限的机制提供了实验基础。 张琼 张知新 房青 高福云 赵秋玲 杨晔 苏慧敏 刘应科关键词:脂肪肝 胰岛素样生长因子1 胰岛素样生长因子结合蛋白质3 永生化人 肝细胞 空间环境对恶性黑色素瘤血管生成拟态的影响 2008年 观察空间诱变后恶性黑色素瘤B16细胞株的在小鼠体内肿瘤组织中血管生成拟态数目的改变,并探讨可能的机理。应用细胞低温长期生存系统,将B16细胞株搭载于中国第20号返回式卫星,返地后单克隆化,从得到的110株单克隆空间诱变B16细胞株中随机选取7株,编号为38#~44#,常规培养6代后和对照细胞株在荧光倒置显微镜下观察肿瘤细胞的形态;同时采用MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,又称噻唑蓝)法,检测细胞增殖情况,将增殖差异较大的39#和44#细胞株接皮下种于C57BL/6J小鼠,两周后颈椎脱臼法处死小鼠,取出瘤体,经福尔马林固定后,采用CD31和PAS套染的方法观测肿瘤组织血管生成拟态的情况,并推测其与肿瘤生长速度和转移可能关系。 柴大敏 鲍正齐 唐劲天 向青 房青 徐梅 徐波 李红艳 耿传营 陈志华 陶仪声关键词:空间环境 B16细胞 诱变 血管生成拟态 参芪扶正注射液对无源搭载系统中淋巴细胞的保护作用 <正>目的:将淋巴细胞(Jurkat)接种于无源搭载系统中并加入参芪扶正注射液,观察参芪扶正注射液对无源搭载生存系统中淋巴细胞(Jurkat)的作用,为预防太空环境对宇航员免疫系统功能的影响提供线索。方法:①MTT法:将... 徐波 徐梅 赵天德 李红艳 向青 房青 唐劲天文献传递 神经干细胞三维立体培养体外扩增的方法 本发明涉及神经干细胞三维立体培养体外扩增的方法,它包括:选择具有三维立体环境的微载体,对微载体进行预处理,然后用含有40-60ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子、40-60ng/ml表皮细胞生长因子和B27的DMEM/F... 蔡哲 潘琳 张岚 舒峻 房青文献传递 低温条件对肿瘤细胞长期存活的影响 被引量:1 2003年 目的 :摸索哺乳动物细胞低温长期生存条件及培养程序 ,为太空搭载肿瘤细胞及建立太空生物医学研究平台提供研究基础 ;了解低温情况下肿瘤细胞长期生存的细胞形态、细胞周期变化 ;初步探讨低温长期培养在肿瘤疫苗制备中的意义。方法 :3种肿瘤细胞接种于自行设计的低温细胞长期生存系统中 ,摸索出低温下细胞培养程序。细胞株存活 1 5d后复温单克隆化 ,观察细胞生存情况及形态变化。其中对小鼠黑色素瘤B1 6细胞进行了低温 2 5d生存实验。结果 :肿瘤细胞可在低温细胞长期生存系统中成功存活 1 5d ,细胞形态无明显变化 ,细胞复温后可生长增殖 ,单克隆化。B1 6细胞可在低温不更换培养基的情况下生存 2 5d ,细胞形态发生明显变化。低温培养可使细胞周期阻滞 ,G1期细胞增多。结论 :成功建立了哺乳动物细胞低温条件下的长期生存方法 ,初步了解低温长期培养条件下肿瘤细胞形态及细胞周期的变化。 房青 向青 陈志华 徐梅 徐波 李红艳 周东辉 孔晶 高福云 刘国玲 董晞 孙瑞娟关键词:肿瘤细胞 细胞周期 细胞形态 肿瘤疫苗 胰高血糖素样肽-1通过抑制糖原合成酶激酶-3β活性保护内质网应激诱导的β细胞凋亡 被引量:1 2016年 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对内质网应激诱导的胰岛β细胞系INS-1细胞凋亡的影响及其机制。方法:培养INS-1细胞,接种后分组:正常对照组、0.1μM毒胡萝卜素(TG)处理组、0.5μM TG处理组、1μM TG处理组、GLP-1(10n M)处理组、TG+GLP-1处理组、SB415286(10μM)处理组和TG+SB415286处理组。细胞处理后,TUNEL染色法检测细胞凋亡,Western blot检测蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,TG组INS-1细胞凋亡率均显著升高(P<0.05,P<0.01),随着TG浓度的增加Caspase-3活性逐渐升高。与TG处理组相比,TG和GLP-1共同处理组INS-1细胞凋亡率显著下降(P<0.01),且Caspase-3活性下降;TG和GLP-1共同处理组糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的活性下降。TG和SB415286共同处理组INS-1细胞凋亡率显著下降(P<0.05),且Caspase-3活性下降。结论 :GLP-1可以通过抑制GSK-3β活性减轻内质网应激引起的损伤从而保护β细胞。 王猛 张文健 许世清 彭亮 王在 刘虹麟 房青 邓婷婷 娄晋宁关键词:胰高血糖素样肽-1 Β细胞 糖原合成酶激酶-3Β 从无源太空搭载系统中回收微载体上细胞的方法 本发明涉及从无源太空搭载系统中回收微载体上细胞的方法,经过太空飞行后,返回地面的微载体上的哺乳类动物细胞的状态较差,因此不能直接进行消化处理,这时应进行消化处理前的细胞孵育,即从无源太空搭载系统中返回的装有微载体和细胞的... 向青 徐梅 房青 李红艳 徐波 唐劲天文献传递 永生化人肝细胞治疗小鼠急性肝衰竭的实验研究 被引量:4 2010年 目的评价微载体培养的永生化人肝细胞(immortalized human hepatocytes,IHH)对裸鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)的治疗作用。方法采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)建立裸鼠ALF模型,将微载体培养的IHH注射于裸鼠腹腔内进行腹膜透析治疗,并设未治疗组和空微载体治疗组,比较各组动物的肝功能损伤指标,肝组织病理和动物生存率。结果腹腔注射CCl4后24h,所有动物的转氨酶升高达正常值10倍以上,未治疗组和空微载体治疗组动物48h内全部死亡,肝组织检查发现肝细胞广泛坏死;而采用IHH微载体治疗组,48h的动物生存率为83.3%,持续14d后转为长期存活。存活的动物转氨酶降至正常水平,肝组织检查显示肝细胞坏死显著减少,免疫组织化学染色显示腹腔微载体上肝细胞仍存活,并表达人肝细胞特异蛋白α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)。结论采用微载体培养的IHH腹腔透析治疗小鼠ALF是有效的,表明IHH适合作为生物人工肝的细胞材料。 房青 高福云 徐梅 张文健 叶丽亚 许世清 许亚平 李成辉 娄晋宁关键词:腹膜透析