张俊杰
- 作品数：3 被引量：21H指数：2
- 供职机构：武汉大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- Harpin的表达及其诱导抗烟草花叶病毒感染的活性被引量：16
- 2003年
- 采用人工分段合成梨火疫病细菌(Erwinia amylovora)Harpin基因A、B、C、D片段,然后连接构建全长harpin基因,克隆到pET-23(+)表达载体中,在E.coli BL21中表达Harpin蛋白。通过His Bind Resin Ni^(++)层析柱纯化,获得Harpin蛋白。经SDS-PAGE和Western blot分析,该蛋白分子量为45kDa。采用叶片穿刺法,5μL 30μg/mLHarpin能诱发烟草叶片的过敏反应。采用叶脉注射法,5μL 30μg/mL Harpin能诱发辣椒叶片的过敏反应。将烟草和辣椒用30μg/mL Harpin喷雾处理5d后,接种烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV),观察植株病症,并采用ELISA检测TMV含量。结果表明经Harpin处理的烟草和辣椒对TMV侵染有一定的抑制作用。
- 徐进平孟小林王健鲁伟张俊杰
- 关键词：HARPIN蛋白纯化烟草花叶病毒
- 蚯蚓纤溶酶基因的cDNA克隆及其序列分析被引量：3
- 2004年
- 从粉正蚓成体中提取总RNA,以寡核苷酸Oligo(dT)20为引物合成cDNA第一条链;用RT PCR的方法扩增蚯蚓纤溶酶的cDNA,将其克隆到pUCm T载体上进行DNA序列测定.结果表明,所克隆的蚯蚓纤溶酶cDNA长度为747bp,其中编码区段为738bp,共编码246个氨基酸.将该序列与GenBank中其它的4种蚯蚓纤溶酶序列(LumbricusrubellusEFE III 1、Lumbricusrubelluslumbrokinase 3(1)precursor、Lumbricusbimastuslumbroki nase、Lumbricusrubelluslumbrokinase 1T4precursor)相比,同源性分别为99%,97%,89%,88%;与同源性最高的序列相比,本序列有7个碱基、3个氨基酸与该序列不同.
- 胡燕孟小林徐进平张俊杰王健鲁伟
- 关键词：蚯蚓纤溶酶CDNA克隆RT-PCR血栓病
- 墨胸胡蜂毒腺基因cDNA文库的构建及鉴定被引量：2
- 2004年
- 从墨胸胡蜂毒腺中提取总RNA,经Oligo(dT)磁珠纯化mRNA后,用AMV反转录酶合成第一链cDNA.完成第二链cDNA合成后,过柱纯化50bp以上的片段,与载体pUC118连接,转化E.coliJM109,建立了cDNA文库.得到的780个阳性克隆中,重组率达到98.5%.大部分插入片段在500～900bp.随机挑选10个短序列测序,一个为蜂毒激肽基因序列.
- 赵耀儒孟小林徐进平张俊杰王健鲁伟杜欣然
- 关键词：墨胸胡蜂毒腺CDNA文库
