帅光泽
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：成都大学校医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达及抗原性研究被引量：2
- 2010年
- 目的构建HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达载体,诱导表达HIV抗原,为HIV快速诊断和蛋白疫苗研究提供材料基础。方法用PCR方法对HIV-1包膜蛋白gp41和HIV-2包膜蛋白gp36基因序列进行全长、截短扩增,分别或以融合表达方式克隆入原核表达载体pQE30、pET32a（＋）及pGST-MOLUC,重组质粒经异丙基硫代半乳糖苷（isopro-pyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导表达,并经Ni-NAT或谷胱甘肽-Sepharose-4B层析柱亲和纯化HIV跨膜糖蛋白抗原,对获得的纯化抗原进行Western blot检测,利用HIV抗原制备ELISA检测试剂盒,并分析HIV临床样本。结果成功构建了HIV包膜蛋白的原核表达载体,利用亲和层析纯化得到了纯度较高的HIV包膜蛋白;Western blot分析结果证实表达纯化的HIV跨膜蛋白gp41（aa.538~718）、gp36（aa.533~764）以及gp41-gp36均能和HIV阳性血清反应;ELISA试剂盒检测临床样本显示,特异性达95%以上,灵敏度达100%。结论获得了有生物学活性的HIV截短包膜蛋白,并可用于HIV快速检测试剂盒的研发。
- 袁作为帅光泽张君胡接力郑建
- 关键词：抗原性
- 抗登革病毒2型E蛋白单克隆抗体的制备和生物学特性的鉴定被引量：1
- 2008年
- 为了制备可用于胶体金快速检测试纸条的抗登革病毒2型(DEN2)E蛋白单克隆抗体(mAb),通过基因克隆获得E基因与质粒pET32a(+)的重组质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21,IPGT诱导表达重组蛋白。以DEN2重组E蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗DEN2E蛋白的mAb,以间接ELISA法和Western blot进行mAb特异性鉴定;同时采用间接ELISA法鉴定mAb的Ig亚类。结果表明获得1株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(7C7),其抗体亚类为IgG1。Western blot显示该株mAb能特异识别重组pET32a-DEN2E蛋白。因此,成功制备出抗DEN2E的1株mAb,为建立快速特异检测登革病毒感染的实验方法提供了有力的工具。
- 陶萍帅光泽赖梅梅王雪梅郑健黄爱龙
- 关键词：登革病毒单克隆抗体生物学特性E蛋白
- 氯胺酮单克隆抗体的制备及生物学特性的研究被引量：2
- 2008年
- 目的制备抗氯胺酮(ketamine)的单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性,为氯胺酮的胶体金免疫试纸条研制奠定基础。方法氯胺酮-BSA免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗氯胺酮的mAb。采用间接ELISA、竞争抑制ELISA和Western blot对mAb的特异性进行鉴定。采用间接ELISA法鉴定mAb的Ig亚类、检测其腹水效价及相对亲和力,并进行表位分析。结果获得2株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞(FB12b和CH10),其Ig亚类分别为IgG2a和IgG3;腹水mAb的效价均为1∶106;mAb FB12b和CH10的相对亲和力均在105以上。ELISA相加实验的结果显示,2株mAb可识别不同的抗原表位。结论成功制备抗氯胺酮的2株mAb,为建立快速特异检测氯胺酮滥用的现场检测方法提供了有力的工具。
- 张君帅光泽但研Jerry Zheng
- 关键词：氯胺酮单克隆抗体生物学特性
