目的探讨在体外受精(IVF)/卵母细胞胞浆内单精子显微注射(ICSI)-胚胎移植(ET)中,垂体降调节后血清卵泡刺激素(FSH)水平的动态变化与获卵数的相关性。方法回顾性分析我中心使用促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)对垂体进行降调节超促排卵的751个IVF/ICSI-ET周期。促性腺激素(Gn)启动日及人绒毛促性腺激素(HCG)日测血清FSH水平,并计算HCG日与Gn启动日的FSH的差值,应用Pearson相关分析法分析Gn启动日FSH及HCG日FSH值与Gn日FSH差值与获卵数、成熟卵泡数的相关性,根据Gn日FSH水平分两组:FSH<4 m IU/L组和FSH≥4 m IU/L组。按HCG日与Gn启动日FSH差值分4组,分别为A组:差值<0;B组:0≤差值<10 m IU/ml;C组:10 m IU/ml≤差值<20 m IU/ml;D组:差值≥20 m IU/ml。用t检验比较组间Gn天数、Gn总用量、获卵数、成熟卵泡数的情况。结果 (1)Gn启动日FSH值与获卵数、成熟卵子数呈显著性负相关,r值分别为-0.307、-0.301(P<0.05),HCG日FSH值与Gn日FSH值的差值与获卵数、成熟卵子数呈显著性负相关,r值分别为-0.166、-0.179(P<0.05);(2)FSH≥4 m IU/ml组的获卵数[(11.93±4.13)枚]及成熟卵子数[(10.01±3.93)枚]比FSH<4 m IU/ml组[分别为(13.55±3.81)枚、(11.45±3.75)枚]显著性少,(3)根据HCG日FSH值与Gn日FSH值的差值分组,4组获卵数分别为(8.67±2.87)枚、(13.12±3.90)枚、(12.36±4.20)枚及(10.23±3.90)枚,其中A组获卵数最低,与其他三组相比差异有统计学意义(P<0.05),B组获卵数、成熟卵子数与其C、D组相比显著性增加。结论 Gn启动日FSH值及HCG日FSH与Gn日FSH的差值和获卵数呈负相关,其中Gn启动日的FSH水平与获卵数相关性更高。
目的以全血为起始模板直接进行PCR多重扩增,建立一种快速、简便的Y染色体微缺失检测方法。方法用作者自行研制的“HpH-Buffer”,以不经基因组DNA提取的抗凝全血为模板直接进行多重PCR扩增。分别在5管中检测无精症因子(azoospermia factor,AZF)区域的a区、b区和c区共12个序列标签位点(sequence tagged sites,SIS)。为保证方法有效性,加做Y染色体性别决定区(sex-determining region Y,SRY)和X/Y连锁锌指蛋白基因(X-linked or Y-linked zinc fingergene,ZFX/Y)作为内控。同时,为考察方法的准确性,对每例血液样本提取基因组DNA平行实验。结果共检测了156例男性血液样本,每组实验均加做阳性对照(正常已生育男性样本)和阴性对照(正常女性样本),以保证实验有效性。结果表明,156例样本中有144例无缺失,AZFa区缺失1例,AZFb区缺失1例,AZFc区缺失7例,AZFb和AZFc区缺失1例,AZFa、AZFb和AZFc区全缺失2例。以全血为模板和以基因组DNA为模板进行扩增所得到的实验结果完全一致。结论所建立的方法省略了DNA提取这一繁琐的步骤,减少了PCR实验过程中可能出现的污染,缩短了操作时间,节约了实验成本。可在2小时内完成所有检测过程,有效地提高了临床检测效率。“HpH-Buffer”的试剂成本很低,全部检测成本与普通PCR扩增基本相同。