周玲
- 作品数：131 被引量：390H指数：10
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理电子电信更多>>
- 91例EB病毒相关疾病儿童血浆EB病毒DNA的检测被引量：10
- 2009年
- 目的了解EB病毒(EBV)感染患儿外周血血浆中游离EBVDNA的拷贝数,确定EBV原发感染后外周血血浆中EBV游离DNA的拷贝数与发病天数及病情轻重的关系。方法应用荧光定量PCR方法,测定73例EBV原发感染和18例EBV相关重症疾病患儿外周血血浆中EBV游离DNA。结果①原发EBV感染患儿外周血血浆中EBV游离DNA随发病天数呈下降趋势,发病2周后很难检测到。②EBV相关重症疾病组患儿外周血血浆中EBV游离DNA阳性率明显高于原发EBV感染组,差异有显著性(89%vs16%,P<0.05)。结论原发EBV感染后随病程天数的增加,病毒复制水平逐渐下降。血浆中EBV游离DNA检测对评价EBV相关疾病的严重程度有一定参考价值。
- 段红梅姚瑶谢正德闫静胡英慧幺远周玲申昆玲
- 关键词：EB病毒慢性活动性EB病毒感染噬血细胞性淋巴组织细胞增生症传染性单核细胞增多症儿童
- Ad5F35-LMP2重组腺病毒免疫效果的研究被引量：2
- 2007年
- 目的了解含有EB病毒潜伏膜蛋白2的非复制型重组腺病毒（Ad5F35-LMP2），免疫恒河猴的特异性细胞和体液免疫的效果。方法分别使用高剂量（1．5×10^10TCID50/只）、中剂量（1．5×10^9TCID50/只）、低剂量（1．5×10^8TCID50/只）Ad5F35-LMP2重组腺病毒，同时设对照组（PBS4．0 ml／只）。肌内注射免疫恒河猴，每个月一次，共免疫3次，第0、4、8、12周时使用Elispot方法检测猴外周血EBV—LMP2细胞毒性T细胞应答，同时应用免疫酶方法检测血清中LMP2抗体。结果3个剂量Ad5F35-LMP2腺病毒免疫恒河猴均可以诱导出有效的细胞免疫应答及一定的抗体应答，免疫应答水平的高低与病毒剂量的高低有一定的关系，较高剂量产生的细胞及体液免疫应答水平比低剂量的高。结论Ad5F35-LMP2非复制型重组腺病毒疫苗可以有效的诱导恒河猴产生EBV—LMP2特异性细胞和体液免疫反应。
- 莫武宁周玲吴小兵王湛唐安洲黄光武余双庆王琦叶树清杜海军曾毅
- 关键词：腺病毒疱疹病毒4型膜蛋白质类恒河猴
- 含HPV16L1基因重组腺病毒和1型重组AAV载体联合免疫效果的研究
- 2008年
- 目的对表达HPV16L1抗原的重组腺病毒及1型重组AAV载体联合免疫效果进行研究。方法分别构建含密码子优化型HPV16L1基因重组腺病毒rAd-mod．HPV16L1及1型重组AAV载体rAAV1-mod．HPV 16L1，将纯化的重组AAV病毒载体以肌注及滴鼻途径单独及联合免疫C57BL／6小鼠，使用体外中和实验检测各组小鼠血清中特异性中和抗体。结果rAAV1-mod．HPV16L1单独及与rAd-mod．HPV16L1联合肌注可诱导高滴度的血清中和抗体，在初免后第16周抗体滴度显著高于其他免疫组，联合肌注组诱导的抗体滴度高于单独肌注组；重组病毒联合滴鼻虽能产生一定的免疫加强作用，但抗体滴度仍显著低于rAAV1-mod．HPV16L1单独及联合肌注组。结论型重组AAV载体联合重组腺病毒以初免-加强模式肌注町诱导更高滴度的血清中和抗体。
- 周玉柏李泽琳周玲盛望马洪涛曾毅
- 关键词：乳头状瘤病毒基因L1腺病毒科
- 用甲醇酵母表达经基因优化的HPV 6型L1蛋白被引量：5
- 2003年
- 目的利用甲醇酵母系统Pichia pastoris高效表达HPV 6型L1蛋白。方法按照Pichiapastoris偏爱密码子合成L1全长基因,构建pPIC3.5K-HPV6-L1表达载体,转化KM71,经组氨酸缺陷的MD培养基和G418筛选,PCR确认L1基因整合,使用BMGY/BMMY培养/诱导目的基因的表达。结果筛选到3株阳性表达克隆,Western blot显示表达产物有部分糖基化现象,使用能识别完整VLP的单抗进行间接免疫荧光检测提示L1蛋白在Pichia细胞内以空间构象形式存在。通过离子交换和亲和层析两步纯化从1L发酵液中得到125μg纯的L1蛋白。结论通过基因优化在甲醇酵母中表达HPV6-L1蛋白,这将为结构与功能研究以及疫苗开发提供条件。
- 李平川张晓光周玲曾毅
- 关键词：乳头状瘤病毒HPV克隆尖锐湿疣
- 293细胞检测致癌物的应用研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨应用293细胞对致癌物进行细胞转化及致瘤性等研究，为检测可疑致癌物提供实验依据。方法应用微囊藻毒素LR（Microcystin LR，MC．LR）对293细胞进行转化培养，取转化后的细胞进行软琼脂克隆实验、血清依赖性实验以及免疫缺陷小鼠体内致瘤实验来验证MC-LR转化的293细胞的致癌性。结果293细胞在MC-LR的作用下，逐渐表现出转化细胞的特性：血清依赖程度显著降低，在软琼脂培养基中锚着独立生长并形成细胞集落，在SCID小鼠体内形成浸润性肿瘤组织。结论293细胞易于培养并对环境致癌物敏感，可用于可疑致癌物的检测。
- 赵蕊张磊钟儒刚周玲曾毅
- 关键词：细胞系微囊藻毒素细胞转化肿瘤致癌物
- 人乳头瘤病毒感染与不同地域食管癌发生相关性Meta分析被引量：7
- 2013年
- 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染与不同地域食管癌(EC)发生的病因学关系。方法在中国知网,检索有关EC发生与HPV感染相关的研究文献,研究纳入标准是:以原位杂交或聚合酶链反应为检测方法检测高危型HPV DNA,并且研究文献所选用病例既有EC组织又有正常对照组织。结果入选17篇文献中:EC组织标本HPV检出率为44.0%,正常对照组织中HPV阳性率为16.7%,EC组织中HPV感染率与正常对照组织有显著差异(P<0.05);分布在香港、上海、福建、广东、河南、四川、河北和新疆8个区域的被检标本中HPV感染率存在明显的地域差异(P<0.05)。结论高危型HPV感染在不同地域普遍存在,可能是EC发生的重要病原因子。
- 邰智慧张科李淑英李劲涛杜海军周玲杜君朱丽华刘爱华熊亚南
- 关键词：人乳头瘤病毒食管癌META分析
- 携带EBV-LMP2基因的DNA疫苗、腺相关病毒疫苗和腺病毒疫苗免疫小鼠的特异性细胞免疫应答被引量：7
- 2009年
- 细胞免疫应答，尤其是CD3^＋CD8^＋细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL），在控制病毒感染中扮演着重要角色，鼻咽癌（nasopharyngenl carcinoma，NPC）与EB病毒（epstein-barr virus，EBV）持续感染密切相关，在鼻咽癌疫苗的研究中，人们将研究重点放在增强特异性抗病毒CTL应答上，本研究单独或联合使用表达EB病毒潜伏膜蛋白抗原2（epstein-barr virus latent membrane protein 2, EBV-LMP2）的DNA疫苗、腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）疫苗、非复制5型腺病毒疫苗（Ad5），分别于0，2，4周肌肉注射免疫4-6周龄的雌性Balb／C小鼠，IFN-γ，免疫斑点法检测EBV—LMP2特异性细胞免疫应答水平，疫苗诱导的特异性细胞应答水平与疫苗的免疫策略有关，其中，使用3种载体疫苗联合免疫的效果最好，其次则是先使用DNA疫苗免疫两次，再用腺病毒疫苗加强免疫一次的联合免疫方法，DNA疫苗和AAV疫苗单独免疫能够诱导出特异性的CTL，但与联合免疫相比诱导的应答水平很低，结果表明，使用DNA，AAV和腺病毒载体疫苗联合免疫，能够更好地诱导机体产生特异性细胞免疫应答，为鼻咽癌的防治提供了很好的疫苗策略。
- 杨松梅王湛周玲杜海军莫武宁曾毅
- 关键词：疫苗重组腺病毒疫苗联合免疫特异性细胞免疫应答
- 乙型肝炎病毒和黄曲霉素协同在裸鼠体内诱发人胎肝细胞癌变的研究被引量：2
- 2001年
- 为了研究乙型肝炎 (乙肝 )病毒 (HBV)和黄曲霉素 (AFB1)在肝癌发生过程中的作用 ,用HBV感染的人胚胎肝细胞移植至裸鼠背部皮下 ,以后每周注射AFB1,能诱发裸鼠成瘤。实验分为 4组 :A组为HBV +AFB1组 ,即用HBV感染的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,同时注射ABF1;B组为HBV+ 组 ,用HBV感染的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,不注射AFB1;C组为AFB1+ 组 ,用不感染HBV的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,注射AFB1;D组为对照组 ,用不感染HBV的人胚胎肝细胞移植于裸鼠 ,也不注射AFB1。结果 :A组成瘤率为 2 7 3% (6 / 2 2 ) ,B组 0 % ,C组 13 3%(2 / 15 ) ,D组 0 % ,所有肿瘤病理诊断均为肝细胞癌。用EMA单抗检测 ,证实为人来源细胞。PCR和DNA狭缝印迹显示 :HBVX和HBVS基因阳性 ,证明HBV基因已到瘤细胞中。实验首次用人乙肝病毒协同AFB1在裸鼠体内诱发成功人肝细胞癌 ,证明了HBV协同AFB1在人肝细胞癌发生过程中的病因作用。同时 。
- 蓝祥英郭秀婵周玲张永利沈忠英曾毅
- 关键词：乙型肝炎病毒黄曲霉素恶性转化癌变
- 乙型肝炎病毒和黄曲霉素协同作用诱发人肝细胞癌细胞株的建立被引量：2
- 2001年
- 为了研究人乙型肝炎病毒 (HBV)和黄曲霉素 (AFB1)在肝癌发生过程中的作用 ,我们用HBV感染的人胚胎肝细胞移植至裸鼠背部皮下 ,以后每周皮下注射AFB1,在裸鼠体内成功地诱发了人肝细胞癌。选 3只裸鼠所形成的肿瘤组织 ,分别再接种裸鼠传代。在裸鼠体内传至 5代后 ,将瘤组织在体外培养、传代 ,建立了 3个肝癌细胞株 ,分别为CBH - 1a、CBH - 1b和CBH - 2。对 3个细胞株进行生物学特性分析发现 ,细胞生长迅速 ,接触抑制消失 ,细胞增殖核计数Ki6 7阳性细胞占 38 2 %。用EMA单抗检测证实为人来源细胞。核酸原位杂交显示 ,细胞中HBV-X和HBV-S基因阳性 ,PCR可扩增出X 基因 ,证明HBV基因已到瘤细胞中。 3个细胞株细胞再接种裸鼠皮下 ,可再生成肿瘤。此实验证明了HBV协同AFB1在人肝细胞癌发生过程中的病因作用。同时 。
- 郭秀婵蓝祥英周玲滕智平张永利陈炯玉沈忠英曾毅
- 关键词：乙型肝炎病毒黄曲霉素肝癌细胞株癌变
- EB病毒对不同分化程度胃癌细胞的易感性
- 2014年
- 目的建立携带EB病毒(EBV)的人胃癌细胞株,探讨EBV对不同分化程度胃癌细胞的易感性。方法用携带EBV的B95-8细胞系制备EBV,感染胃癌细胞BGC823、MKN45及MKN28,用有限稀释法对感染细胞进行克隆,观察细胞形态,并用PCR法检测未感染及感染细胞中EBV编码核抗原EBNA1、EBNA2、潜伏感染膜蛋白LMP1、LMP2A、裂解感染早期基因BARF1、晚期基因BLLF1及Bc LF1的表达状况。结果已感染细胞的形态由原来的梭形变为多形态,并检测到EBNA1、BARF1及Bc LF1的表达,而未检测到EBNA2、BLLF1、LMP1及LMP2A的表达。结论不同分化程度的胃癌细胞对EBV都易感,并且EBV感染可改变细胞的表型,提示不同分化程度的胃癌细胞系可作为EBV感染的靶细胞。
- 张科邰智慧李淑英杜海军李劲涛朱丽华赵莹张云茹周玲曾毅
- 关键词：胃癌EB病毒
