史志明 作品数:10 被引量:27 H指数:3 供职机构: 南京医科大学 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 江苏省科委社会发展基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
卫氏并殖吸虫活动性感染的诊断 1996年 应用单克隆抗体(Mab)和 Dot-ELISA 方法检测血清中卫氏并殖吸虫(Pw)种、期特异性抗原(Ag),以进行并殖吸虫病活动性感染的血清学诊断。结果所有痰卵阳性的患者和大部分痰卵阴性的可疑患者血清中检出成虫期特异性 Ag。部分两类患者中血清还检出囊蚴期特异性 Ag。其它蠕虫感染、肺结核患者和健康中国人血清,囊蚴和成虫 Ag 均为阴性。以吡喹酮治疗实验感染犬可激发血清中 Pw 成虫 Ag 明显而短暂的增加,但在2个月内逐渐消失。本研究结果表明,我们建立的以自制 Mab 为探针的并殖吸虫 Ag 检测方法对于 Pw 活动性感染的诊断具有高度的敏感性和特异性。 章子豪 张耀娟 史志明 申克飞 刘力田 胡志刚 Willy F.Piessens关键词:卫氏并殖吸虫 并殖吸虫病 BALB/C小鼠感染卫氏并殖吸虫后血清中循环抗原的动态 被引量:1 1994年 用滤纸血以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体G2B3间接双抗体夹心-ELISA检测感染卫氏并殖吸虫BALB/C小鼠血中循环抗原(CAg),结果显示:小鼠感染卫氏并殖吸虫囊蚴后第3天检出CAg,其阳性率为38%,第15天起CAg达高峰,阳性率100%,26~56天CAg维持高水平,第71天CAg滴度下降,以后维持在一定水平,说明滤纸血可以代替血清作CAg检测。以抗卫氏并殖吸虫囊蚴单克隆抗体G2B3间接双抗体夹心-ELISA检测感染卫氏并殖吸虫小鼠血中CAg时,具有简便,敏感和特异的优点,可试用于肺吸虫感染的早期诊断和流行病学调查。 史志明 张耀娟 章子豪关键词:并殖吸虫 循环抗原 关于扁囊并殖吸虫的研究 被引量:5 1997年 自1985年起作者发表了系列研究文章,详细观察了扁囊和卫氏并殖吸虫生活史中的囊蚴、后尾蚴、成虫、虫卵等阶段的形态,上述两种囊蚴的结构相似,后尾蚴的脱囊率、成虫在犬体内的寄生部位、成熟时间等均相似。后尾蚴、成虫的形态及成虫各部位的大小经统计学处理无明显差异。对这两种成虫相应的六个部位的体棘进行了扫描电镜观察未见明显差异。对扁囊、卫氏并殖吸虫的囊蚴和成虫的全虫蛋白分别进行了盘状电泳和等电点聚焦电泳分析,发现这两种虫盘状电泳和等电点聚焦电泳的蛋白质区带数目与模式均一致。并用等电点聚焦电泳的方法检测了这两种虫的苹果酸脱氢酶、酯酶、过氧化物酶等三种同工酶,结果显示这两种虫的三种同工酶的酶带数目及等电点分布完全一致。此外还对扇囊和卫氏并殖吸虫的基因组DNA限制性内切酶酶谱和PWB19片段探针的Southern印迹杂交进行了分析,结果基本相同。上述各项研究结果均显示扁囊和卫氏并殖吸虫之间无明显差异,鉴于此,我们认为扁囊并殖吸虫似应为卫氏并殖吸虫的同物异名。 张耀娟 沈一平 史志明 章子豪 冯笑川 俞小淙关键词:卫氏并殖吸虫 同功酶 肺吸虫病活动性感染诊断和疗效考核的研究 章子豪 张耀娟 史志明 沈一平 刘力田 邵向云 刘云霞 该成果获得了卫氏肺吸虫在犬、大小鼠感染前后囊蚴和成虫循环抗原抗体的动态资料、肺吸虫病吡喹酮治疗前后Cag的动态资料。证明囊蚴Cag和Ab检测有早期诊断价值。制备、鉴定的单一卫氏肺吸虫囊蚴和成虫单克隆抗体、混合单抗或多抗E...关键词:关键词:肺吸虫病 三种免疫学方法检测肺吸虫病人血清IgG抗体 1996年 应用酶联免疫吸附剂试验、间接荧光抗体试验和免疫酶染色试验检测168例肺吸虫感染者血清IgG抗体,阳性率分别为95.83%、93.45%、92.26%;10例肺吸虫卵痰检阳性者三种方法均为阳性。50例健康人和30例肺结核病人血清未出现交叉反应,183例其它寄生虫病人血清部分出现交叉反应。 史志明 章子豪 张耀娟 倪忠耘关键词:肺吸虫病 抗体 IFAT 应用尿素溶性抗原制备抗猪囊虫单抗的研究 被引量:3 2000年 目的 为提高抗猪囊虫单抗的特异性。方法 使用猪囊虫尿素溶性抗原 ( Ag- u)并用水溶性抗原 ( Ag- w)作对照分别免疫 BABL / c小鼠 ,取其脾细胞分别与 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,EL ISA法进行筛选。同时筛选出的阳性克隆扩大培养 ,取上清单抗分别与包虫、血吸虫、肝吸虫、肺吸虫、姜片虫和丝虫抗原进行交叉反应性测定。结果 Ag- u和 Ag- w的阳性克隆率分别为 13.5 % ( 13/ 96 )和 12 .5 % ( 12 / 96 ) ,特异性阳性克隆率分别为 30 .8% ( 4/ 13)和 8.3% ( 1/ 12 )。 SDS- PAGE分析 Ag- u和Ag- w的条带数分别为 9和 17,分子质量 >97.4ku的条带比率分别为 6 6 .7% ( 6 / 9)和 2 9.4% ( 5 / 17)。免疫组化显示来自 Ag-u的 2株单抗定位于囊虫的头节 ,而来自 Ag- w的 1株单抗定位于囊虫的囊壁。结论 Ag- u用于制备单抗的阳性克隆得率与Ag- w没有明显的差异 ,而特异性阳性克隆的得率是 Ag- w的 4倍 ,亦即 Ag- u不仅有良好的免疫原性 。 殷竹君 刘静 张耀娟 章子豪 史志明 侯敏关键词:猪囊虫 抗囊虫单抗的制备及其应用研究 被引量:11 2003年 目的 制备分泌特异性抗猪囊虫单抗的杂交瘤细胞株 ,建立以特异性单抗检测囊虫病患者循环抗原 (CAg)的特异敏感的 EL ISA方法。 方法 制备水溶性抗原 (Ag- w)和尿素溶性抗原 (Ag- u) ,将实验用 BAL B/ c小鼠分为 Ag- u和 Ag- w组 ,分别以 Ag- u和 Ag- w免疫 ,取两组免疫鼠脾细胞与 SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,EL ISA法进行筛选 ,所获特异性阳性克隆加以扩大培养 ,并分别与包虫、血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、姜片虫和丝虫抗原进行交叉反应性测定。 结果获得稳定分泌特异性抗囊虫单抗的杂交瘤细胞 5株 ,其中 1株 N1B10来自于 Ag- w组 ,另 4株 U2 A6、U2 B3、UB5 H6和UE10 H5来自于 Ag- u组。对 N1B10、U2 A6和 U2 B3初步鉴定结果表明 ,其抗体类型分别为 Ig G2 b、κ,Ig G1、κ,Ig G2 b、κ;腹水的效价分别为 1.0 2 4× 10 6、1.6× 10 4和 3.2× 10 4 ;免疫组化显示 N1B10定位于囊虫囊壁的基底膜 ,U2 A6和 U2 B3定位于囊虫的头节。杂交瘤细胞经连续培养 ,液氮反复冻存复苏后仍能稳定分泌单抗。取 3株单抗和兔抗囊虫血清建立了检测囊虫病患者 CAg的 EL ISA方法 ,测定 4 8份临床确诊囊虫病病人血清 ,阳性率达 95 .8%。 结论 成功制备了抗囊虫单克隆抗体 ,所建立的 EL ISA方法敏感性高 ,特异性强 ,可用于? 殷竹君 张耀娟 章子豪 刘静 史志明 侯敏关键词:猪囊虫 单克隆抗体 ELISA IEST诊断肺吸虫病的影响因素及诊断价值的进一步研究 被引量:2 1996年 以肺吸虫童虫、成虫冰冻切片抗原与14例痰卵阳性血清作免疫酶染色试验(IEST)因素的观察。其最适切片厚度为6μm,4℃、30天抗原片的反应性下降不明显,-30℃、180天抗原片的抗原反应性不减。血清量、血清孵育时间、酶结合物作用时间、试液离子强度及酸碱度均能影响试验结果。童虫、成虫冰冻切片抗原作IEST诊断肺吸虫病,均呈现较高的敏感性、特异性及较低的交叉反应性,值得现场推广。 史志明 章子豪 张耀娟 倪忠耘关键词:肺吸虫病 成虫 童虫 冰冻切片 免疫酶染色试验 感染丝虫的母亲对子代免疫应答的影响─丝虫循环抗原检测比较 被引量:1 1996年 应用抗牛丝虫多抗ELISA双抗体夹心法检测皖北丝虫病流行区119对产妇及其婴儿脐带血清和170对妇女及其子女血清中丝虫循环抗原(FCAg),其中阳性231例,阳性率为40.0%(231/578)。83例微丝蚴(mf)阳性者中67例检出FCAg,阳性符合率为80.7%(67/83)。54例FCAg阳性产妇中33例婴儿脐带血清中检出FCAg,阳性符合率为61.1%(33/54)。表明母体FCAg有可能通过胎盘屏障进入胎儿体内。84例FCAg阳性妇女中35例子女血清中检出FCAg,阳性符合率为41.7%(35/84)。肺吸虫病和日本血吸虫病患者假阳性率分别为2.5%和16.7%。50名健康大学生的FCAg检测均为阴性。 张耀娟 章子豪 史志明 沈一平 赵勇进 王增贤 沈际佳 江宝玲关键词:丝虫 微丝蚴 循环抗原 丝虫病 成虫童虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验和免疫酶染色试验诊断肺吸虫病 被引量:4 1995年 以肺吸虫成虫童虫冰冻切片抗原片做间接荧光抗体试验(IFAT)及免疫酶染色试验(IEST)对比检测94份肺吸虫感染者和40例正常健康人血清,两法的阳性率分别为93.6%、95.7%和89.1%、93.6%,假阳性率均为0。IFAT和IEST对比检测34份血吸虫病人血清,35份华支睾吸虫病人血清和30份肺结核病人血清。IFAT出现的交叉反应率为14.7%、5.7%、0和14.7%、8.6%、0。IEST出现的交叉反应率为5.9%、0、0和8.8%、5.7%、0。结果表明两法用于肺吸虫病的诊断均有较高的敏感性和特异性,而且抗原定位好,IEST不需荧光显微镜或荧光设备。 史志明 章子豪 张耀娟关键词:并殖吸虫病 间接荧光抗体