刘谨
- 作品数：5 被引量：25H指数：3
- 供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 瑞氏木霉木聚糖酶Ⅱ启动子及转录激活因子研究
- 该文克隆瑞氏木霉木聚糖Ⅱ基因(xyn2)的1080 bp的5'调控区,并对序列进行测定(GenBank accession number:AY263380)及丝状真菌转录因子结合位点分析,发现该调控序列上存在许多丝状真菌...
- 刘谨
- 关键词：瑞氏木霉启动子转录激活因子多拷贝
- 文献传递
- 丝状真菌表达分泌系统中受体菌的构建被引量：15
- 2002年
- 黑曲霉糖化酶高产菌株T2 1经紫外诱变后 ,通过酪蛋白平板和蛋白酶活性测定筛选出胞外酸性蛋白酶活力仅为原株 0 76 %的菌株A .nigerT2 1 2 0 1,其生长特性和产糖化酶活力与原株基本一致。利用原生质体 PEG法将含有报告基因vhb的表达分泌质粒pGT10 vhb通过与选择标记质粒的共转化导入此蛋白酶部分缺陷株及其原株T2 1,检测在蛋白酶缺陷株AspergillusnigerT2 1 2 0 1和原株T2 1中VHb的分泌表达 ,结果表明在A .nigerT2 1 2 0 1中VHb表达水平显著高于原株 ,但Northernblot却显示在两菌株中vnb基因的转录水平近似 。
- 刘丽刘谨仇润祥朱兴国唐国敏
- 关键词：丝状真菌受体菌VHB
- 产适冷木聚糖酶的海洋产青霉的筛选和诱变被引量：6
- 2003年
- 从黄海深层海底泥样中分离到1株产低温木聚糖酶的青霉,经EMS诱变得到11株酶活性提高的菌株,对其中1株产低温木聚糖酶活力最高的菌株产酶性质进行了初步研究。所产木聚糖酶在pH4.6,45℃时酶活可达25.8u/ml,比出发菌株提高126%。诱变后菌株所产木聚糖酶在0℃仍有显著酶活性,达8.2u/ml。
- 刘世利汪天虹秦楠侯运华刘谨
- 关键词：青霉EMS诱变
- 瑞氏木霉外源基因表达系统中受体菌株的改造被引量：4
- 2004年
- 将解除了葡萄糖阻遏的纤维素酶高产菌株瑞氏木霉TrichodermareeseiRutC30经EMS诱变后,在酪蛋白平板上筛选出部分蛋白酶缺陷突变菌株T.reeseiRutC30M3。RutC30M3的胞外蛋白酶活力比亲本株降低约74%,但生长特性、产纤维素酶活力等性状与亲本株相同。用携带潮霉素磷酸转移酶基因(hph)的表达质粒pAN7-1分别转化瑞氏木霉RutC30和RutC30M3原生质体,转化结果显示RutC30M3(pAN7-1)对潮霉素的抗性比RutC30(pAN7-1)提高约20%,而Northernblot分析结果显示在两菌株中潮霉素基因转录水平相似,由此证明宿主菌蛋白酶缺陷对保护重组蛋白免于降解有明显作用。蛋白酶缺陷菌株RutC30M3适于作为瑞氏木霉外源基因表达系统中的受体菌株用于大量生产同源与异源蛋白。
- 汪天虹刘倜刘世利龙昊刘谨
- 关键词：瑞氏木霉外源基因
- 瑞氏木霉木聚糖酶Ⅱ启动子功能区缺失分析的初探被引量：1
- 2004年
- 木聚糖酶Ⅱ (XylanaseⅡ )是瑞氏木霉中两种主要的内切木聚糖酶之一 .序列分析显示其 1.1kb的启动子区含有多种丝状真菌转录因子结合位点 ,可受多种激活因子、抑制因子、增强子的转录调控 .以编码 β -葡糖苷酸酶(GUS)的E .coliuidA基因为报告基因 ,分别与木聚糖酶Ⅱ启动子及功能区 (- 312～ - 10 80 )缺失启动子融合 ,构建报告质粒pXIIPU与pXIIPΔEXU ,引入瑞氏木霉蛋白酶缺陷株TrichodermareeseiRutC30U4 .先后对转化子进行发酵实验 ,测定GUS活性 ,结果显示功能区 - 312～ - 10 80缺失后的启动子活性是原启动子活性的 19% .结果表明在缺失的木聚糖酶Ⅱ启动子 - 312～ - 10 80区仍存在调节转录活性的顺式作用元件 ,值得进一步研究 .
- 刘谨李晓汪天虹
- 关键词：瑞氏木霉GUS
