买制刚
- 作品数:26 被引量:62H指数:3
- 供职机构:深圳大学更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 多拷贝脑钠肽基因表达质粒的构建及其表达被引量:3
- 2008年
- 目的构建多拷贝脑钠肽(BNP)基因重组表达质粒,并探讨BNP基因的拷贝数与其表达水平的相关性。方法通过人工合成和PCR技术扩增BNP基因,将其克隆至载体pCW111中,构建表达质粒pBNP11,并通过亚克隆构建含有不同数量表达盒的正向串联表达质粒,分别转化大肠杆菌DH5α和BL21(DE3),经温度诱导表达,SDS-PAGE分析,并经激光扫描测定目的蛋白的表达量。结果测序及酶切鉴定证明1~3拷贝BNP重组表达质粒构建正确,重组蛋白在大肠杆菌DH5α和BL21(DE3)中均可获得表达,表达量分别为菌体总蛋白的8.12%、9.94%、和9.18%。结论已构建了多拷贝BNP的重组表达质粒,BNP的表达水平随BNP拷贝数的增加而升高,但并未成倍增加。
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- 关键词:脑钠肽质粒拷贝数原核表达
- 弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析被引量:2
- 2012年
- 目的制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析。方法根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET KDO中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析。结果从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白。结论运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白。
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- 关键词:刚地弓形虫免疫印迹
- 基于G蛋白偶联受体的哺乳动物细胞定向引导技术
- 买制刚
- 产品概况:该技术通过改造趋化因子受体的结合功能域而形成新受体,新受体保留了趋化因子受体结合配体后的生物学效应,但却改变了能引起这些效应的趋化因子受体发生反应的配体。新受体不再对趋化因子发生反应,而对新的配体发生作用。并能...
- 关键词:
- 关键词:肿瘤治疗基因工程
- 顶空毛细管气相色谱法测定重组人心钠肽中残留乙腈被引量:3
- 2009年
- 目的:建立重组人心钠肽中残留溶剂乙腈的气相色谱分离测定方法。方法:采用DB-624弹性石英毛细管色谱柱(30m×0.32mm,1.8μm),载气为氮气,氢火焰离子化检测器FID,进样口温度为250℃;检测器温度为250℃;柱温为40℃保持8min。分流比10∶1,水为溶剂,乙醇为内标物。结果:使用该方法被测物乙腈能得到良好的分离与测定,峰面积与浓度呈良好的线性关系,精密度良好。结论:方法准确可靠,可用于重组人心钠肽药品中有机溶剂残留量的检测。
- 易俊波买制刚邱岗峰李凌云周兆平林枫
- 关键词:顶空进样法毛细管气相色谱法乙腈
- 一种B细胞筛选方法及其在单克隆抗体制备中的应用
- 本申请涉及一种B细胞筛选方法及其在单克隆抗体制备中的应用。该B细胞筛选方法包括如下步骤:S11、在Protein A蛋白基因的N端加上分泌表达的信号肽序列,在C端加上跨膜蛋白基因序列,得到融合外源基因;S12、将所述融合...
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- Syntabulin诱发线粒体在微管上融合
- 细胞中的线粒体处于经常运动、分裂与融合的活动状态。线粒体的不断分裂与融合确保了线粒体之间DNA的混合从而保证了线粒体代谢功能的正常运转。线粒体的融合是由一组dynamin类GTP酶所调节的,到目前为止的研究表明,这类分子...
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- 关键词:线粒体微管
- 文献传递
- 丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原和抗-HCV抗体同步检测试剂盒
- 买制刚
- 该试剂盒采用的多功能聚合物膜免疫层析技术把HCV双抗原夹心检测抗体、分片段检测抗体、双抗体夹心检测核心抗原集于一身。聚合物免疫层析技术是把聚合物和免疫层析相结合而产生的灵敏、高效、方便、快速的检测技术,不仅能运用到HCV...
- 关键词:
- 关键词:丙型肝炎病毒疾病诊断
- Syntabulin诱发线粒体在微管上融合
- 李凌云薛秀芬王晓红买制刚李世和易俊波许进英陈龙苏庆宁
- 关键词:线粒体微管
- 一种免疫定量检测方法和应用
- 本发明公开了一种免疫定量检测方法,包括以下步骤:步骤S1、通过标准品和拮抗剂建立竞争指数‑浓度的标准曲线方程;步骤S2、检测样品的竞争指数,根据样品的竞争指数利用标准曲线方程来计算样品中待测抗原的浓度。本发明的免疫定量检...
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- 基于G蛋白偶联受体的哺乳动物细胞定向引导方法
- 本发明提供了一种新型G蛋白偶联受体,该新型受体由引起定向迁移效应的第一G蛋白偶联受体、以及第二G蛋白偶联受体的结合功能域复合而成,其中第二G蛋白偶联受体的结合功能域取代第一G蛋白偶联受体的结合功能域。本发明还提供一种基于...
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- 文献传递