龙军
- 作品数:18 被引量:78H指数:6
- 供职机构:首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金:首都医科大学校长研究基金北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 抗人rBPI<Sub>23</Sub>的单克隆抗体及其应用
- 本发明提供了抗人rBPI<Sub>23</Sub>单克隆抗体,其是以rBPI<Sub>23</Sub>作为免疫原制备获得的既能与rBPI<Sub>23</Sub>特异结合、也能与人天然BPI(即nBPI<Sub>55</...
- 龙军安云庆胡智颖
- 文献传递
- 文献汇报课在医学免疫学教学中的实践和探讨被引量:7
- 2016年
- 医学免疫学是医学教育重要的基础和桥梁课程,在教学实践中发现,将文献阅读,尤其是将精读、翻译并PPT汇报、讨论1篇高质量和高影响力的SCI英文文献应用于七年制临床医学专业医学免疫学课程的教学方法,可以提高学生对免疫学前沿进展的认识,有助于培养学生的自主学习能力和初步的科研思维,促进其对科学问题和科研思路的把握,提升学术研究中必备的科研素质和外语能力,符合七年制临床医学专业学生的培养目标。
- 袁慧慧龙军
- 关键词:医学免疫学教学方法
- 抗人BPI_(23)单克隆抗体的制备和鉴定被引量:1
- 2009年
- 目的采用杂交瘤技术制备抗人BPI23单克隆抗体,并对其应用进行初步分析。方法免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按常规方法融合;用间接ELISA法和Western-blot筛选分泌抗体的杂交瘤细胞株;阳性克隆用有限稀释法亚克隆3次获得稳定分泌抗人BPI23单克隆抗体的杂交瘤细胞株;扩增杂交瘤细胞注入小鼠腹腔后制备腹水;纯化腹水中的单抗并对抗体类型进行鉴定;用Western-blot分析抗体的特异性;用间接ELISA法测抗体效价;将分离纯化的正常人外周血中性粒细胞和单个核细胞制成涂片,用抗人BPI23单克隆抗体进行免疫染色。结果获得3个(1B4、9C12和2H11)稳定分泌抗人BPI23单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗类型分别为κ型IgM、κ型IgG1和κ型IgG1;抗体效价分别为1.28×105、1.28×105和4.1×106,纯化后抗体含量分别为0.208g/L、2.03g/L和3.88g/L;3种纯化抗体均能与本实验制备的人BPI23和市售人BPI55标准品特异性结合,而不能与小鼠BPI25和人LBP结合;在免疫组化实验中,1B4、9C12和2H11单抗均能与人中性粒细胞中的BPI特异性结合。结论成功制备了人BPI23特异性单克隆抗体,为BPI检测试剂盒的研制奠定了基础。
- 胡智颖万云霞郭素娟李蕴何秀娟龙军安云庆
- 关键词:杂交瘤细胞单克隆抗体
- 单羧酸转运蛋白4(MCT4)在前列腺癌中的表达及调控研究被引量:3
- 2019年
- 目的探讨单羧酸转运蛋白4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)在前列腺癌组织及细胞系中的表达情况,明确其在前列腺癌细胞中的调控作用。方法应用免疫组织化学方法检测MCT4蛋白在前列腺癌(prostate cancer,PCa)、良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)及癌旁组织(para-carcinoma tissues,PCT)中的表达,分析其与前列腺癌Gleason评分及淋巴结转移的关系。免疫印迹(Western blotting)法检测不同前列腺癌细胞系中MCT4蛋白表达差异,分析抑制MCT4蛋白表达对Ncadherin、E-cadherin及p ERK1/2的调控作用。结果免疫组化检测显示,MCT4蛋白在前列腺癌、前列腺增生及癌旁组织中均有表达;但PCa中MCT4表达水平明显高于BPH及PCT(P=0. 003)。另外,MCT4蛋白表达与前列腺癌是否有淋巴结转移密切相关,转移组显著高于非转移组(P=0. 022)。Western blotting检测结果显示,在前列腺正常上皮细胞及激素依赖性前列腺癌细胞LNCap中MCT4表达较弱,而在恶性程度较高的去势抵抗性前列腺癌细胞PC3及DU145中表达明显增强。抑制PC3细胞中MCT4表达可以使N-cadherin及p ERK1/2的蛋白表达下降,而使E-cadherin蛋白表达水平升高。结论单羧酸转运蛋白4可能参与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程及ERK1/2通路的调控,促进前列腺癌的进展和转移,对前列腺癌的临床诊断和治疗有重要意义。
- 平浩马林祥王明帅龙军牛亦农刘跃新邢念增
- 关键词:前列腺癌淋巴结转移
- 人rBPI<,23>在E.coli DH5α中的表达及其多克隆抗体和单克隆抗体的制备
- 目的:利用原核表达系统制备人rBPI23蛋白,免疫家兔获得多克隆抗体,免疫小鼠制备单克隆抗体,为后期建立BPI免疫学检测方法并开发研制试剂盒奠定基础。
方法:
(1)将本室构建的PBV220-synBPI60...
- 龙军
- 关键词:原核表达多克隆抗体单克隆抗体抗原表位
- 人rBPI_(23)在大肠杆菌DH5α中的表达及其多克隆抗体的制备被引量:5
- 2007年
- 目的制备人rBPI23蛋白并免疫家兔获得特异性多克隆抗体。方法将本室制备的pBV220-synBPI600表达载体转化感受态E.coliDH5α,温控诱导后,获得以包涵体形式表达的目的重组蛋白;用SDS-PAGE鉴定分子质量,West-ernblot鉴定抗原性;免疫家兔获得抗rBPI23抗血清,经饱和硫酸铵沉淀获得多克隆抗体,间接法ELISA检测抗体效价,Westernblot分析抗体的特异性。结果重组蛋白主要以包涵体形式表达,SDS-PAGE显示其分子质量约23ku,与预期结果相符;重组蛋白能与市售兔抗人BPI抗体特异性结合;免疫家兔获得高效价(1∶320000)抗血清,上述抗体能与rBPI23及人BPI标准品特异性结合。结论成功制备了人rBPI23,免疫家兔获得高效价抗人rBPI23多克隆抗体,为制备单克隆抗体及后期建立BPI免疫学检测方法奠定基础。
- 龙军李蕴陈艳秋李丽吕喆安云庆
- 关键词:原核表达多克隆抗体制备
- 传统教学与PBL结合在医学免疫学教学中的应用被引量:14
- 2010年
- 目的:探索医学教育的内在规律,比较传统教学和传统教学与PBL结合两种教学方法的优缺点。方法:实验组采用传统教学与PBL结合的教学方法,对照组采用传统教学,以学生的自我评价和考试成绩为指标进行综合分析。结果:考试成绩没有明显差异,但实验组学生在知识获取等方面的能力有明显提高。结论:在传统教学基础上结合PBL,能激发学生学习的主动性,提高学生独立思考及分析能力,培养团队合作精神。
- 龙军赵文明李蕴何秀娟温铭杰王炜孔庆利安云庆
- 关键词:医学免疫学教学方法PBL高等教育
- 小鼠BPI N端功能片段(muBPI_(25)蛋白)体外杀菌和中和内毒素作用研究被引量:2
- 2010年
- 目的:建立胞内杀菌和体外中和内毒素实验模型,检测muBPI25目的蛋白对胞内寄生菌的抑杀作用和对内毒素的中和作用。方法:将pcDNA3.1(+)-muBPI36-259质粒导入RAW264.7细胞,用胞内寄生G+/G-菌感染上述细胞建立muBPI25目的蛋白胞内杀菌实验模型;将pSecTag2B-muBPI36-259与双荧光素酶报告基因质粒共转染RAW264.7细胞,建立体外检测muBPI25蛋白中和内毒素实验模型。结果:胞内杀菌实验模型证实muBPI25目的蛋白对G-伤寒杆菌具有抑杀作用;中和内毒素实验模型证实muBPI25目的蛋白对内毒素具有中和作用。结论:首次证实小鼠BPI N端功能片段,即muBPI25目的蛋白对G-菌具有抑杀作用,对其裂解产物内毒素具有中和作用。
- 吕喆王炜范宜强刘振龙孔庆利温铭杰龙军李晨许晴安云庆
- 关键词:RAW264.7细胞内毒素
- 传统教学结合PBL或结合文献汇报在医学免疫学理论教学中的应用体会被引量:11
- 2010年
- 医学免疫学是一门重要的基础医学课程,交叉渗透于其他学科。为提高教学质量,以适应当代医学教育的要求,需要探索新的教学方法。在教学实践中发现,传统教学结合PBL教学方法或和结合文献汇报的教学方法在医学免疫学理论课的教授中可让学生在切实掌握基本理论的同时,培养学生的独立思考及分析问题能力。
- 李蕴何秀娟龙军温铭杰王炜孔庆利赵文明
- 关键词:医学免疫学PBL教学方法教学改革
- 小鼠BPI_(36-259)抗菌蛋白在原核细胞中的表达及其抗血清的制备被引量:8
- 2008年
- 目的采用原核表达系统获得小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白,免疫家兔制备目的蛋白特异性抗血清。方法利用生物信息学方法预测小鼠BPI功能片段,构建pUC57-muBPI1-281质粒;PCR扩增获得mu BPI36-259基因片段,构建pET28a-mu BPI36-259重组质粒;用IPTG诱导重组质粒转化的E.coli BL21(DE3)感受态细胞,获得以包涵体形式表达为主的mu BPI36-259目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得兔抗鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清;用间接ELISA法检测血清抗体特异性及其效价。结果成功构建了pET28a-mu BPI36-259重组质粒,转化E.coli BL21(DE3)获得以包涵体表达形式为主的目的蛋白;用变性目的蛋白免疫家兔获得小鼠BPI36-259蛋白特异性抗血清(效价1∶10000)。结论在原核细胞中成功获得了以包涵体表达形式为主的抗菌蛋白,免疫家兔获得的特异性抗血清可用于小鼠BPI36-259目的抗菌蛋白的检测。
- 冯颖李丽龙军范宜强刘振龙孔庆利吕喆王炜安云庆
- 关键词:E.COLIBL21(DE3)