黄艳琴 作品数:13 被引量:32 H指数:4 供职机构: 江西省医学科学研究所 更多>> 发文基金: 江西省自然科学基金 江西省教育厅科技计划项目 江西省科技支撑计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
两种配方胰酶消化法对兔角膜内皮细胞活性影响的比较 被引量:2 2008年 目的研究两种不同配方的胰蛋白酶对兔角膜内皮细胞生物活性影响。找出一种更适合于角膜内皮细胞(corneal endothelial cell,CEC)消化的方法。方法采用0.125%胰蛋白酶和0.05%胰蛋白酶-0.01%EDTA-Na2分别对CEC进行消化、培养,用台盼蓝染色法和24h细胞贴壁率观察CEC存活率及细胞活性。结果两种配方胰酶消化CEC,细胞存活率都在95%以上,无统计学差异(P>0.05)。而细胞贴壁率,胰酶消化法<30%,胰酶-EDTA-Na消化法>90%,有统计学差异(P<0.05)。结论胰酶-EDTA-Na消化法对CEC的作用较温和,活性影响小,此方法更适合CEC的消化、培养。 戴志芳 黄艳琴 胡银英 袁芳 袁铿关键词:胰酶 角膜内皮细胞 活性 神经调节蛋白-1与碱性成纤维细胞生长因子对大鼠神经干细胞增殖和分化的影响 2009年 目的:探讨神经调节蛋白-1(NRG-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响。方法:从新生大鼠大脑组织分离NSCs,进行体外培养,分别用bFGF、NRG-1和NRG-1加bFGF处理,观察各组神经球的形成情况;应用免疫细胞化学法鉴定NSCs及检测分化后神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNP)的表达。结果:NRG+bFGF组和bFGF组形成的神经球数量和直径的差别不明显,但都明显多于和大于NRG组和对照组。免疫细胞化学显色结果显示,NRG+bFGF组、bFGF组中的神经球分化出的NSE、GFAP、CNP阳性细胞数量明显多于NRG组和对照组,尤其是NRG+bFGF组分化的NSE、CNP阳性细胞的突起较bFGF组更长和增多。结论:NRG-1与bFGF合用能促进NSCs的增殖和分化,促进分化的神经元、少突胶质细胞突起的生长。 胡小令 袁铿 袁芳 吕诚 戴志芳 黄艳琴 胡银英 温蔚关键词:神经干细胞 增殖 分化 神经调节蛋白-1 碱性成纤维细胞生长因子 雷公藤内酯醇对耐顺铂人卵巢癌细胞株(COC1/DDP)体外活性影响机制的初步探讨 被引量:5 2011年 目的:通过研究雷公藤内酯醇(TP)对COC1/DDP体外活性的影响,初步探讨雷公藤内酯醇促进COC1/DDP细胞凋亡的机制,为TP成为治疗晚期或耐顺铂卵巢癌药物提供实验依据。方法:采用MTT法检测顺铂(DDP)、TP及两者联用对COC1/DDP的生长抑制作用;用透射电镜观察TP作用24h后细胞超微结构的变化;采用流式细胞术分析不同浓度TP对COC1/DDP细胞周期和细胞凋亡的影响;用DNA电泳分析用药后细胞基因组DNA断裂状况;以免疫组化分析TP对Caspase-7蛋白表达的影响。结果:DDP在24h、48h和72h三个时间段对COC1/DDP细胞的半数抑制量(50%concentration of inhibi-tion,IC50)分别为5.567μg/ml、2.866μg/ml和1.161μg/ml,其对COC1/DDP细胞增殖表现出浓度-时间依赖性的抑制作用(P<0.05);TP可抑制COC1/DDP细胞增殖,其抑制率呈浓度-时间依赖性(P<0.05);TP作用细胞24h后,电镜下可见凋亡小体形成;流式细胞术分析表明,各浓度TP组G1期细胞明显升高,细胞凋亡率呈浓度依赖性(P<0.05);DNA电泳分析可见细胞凋亡特有的DNA断裂形成的"梯形"条带;免疫组化表明Caspase-7参与了TP诱导COC1/DDP细胞凋亡过程。结论:TP对COC1/DDP具有明显的杀伤和促凋亡作用,凋亡机制与Caspase-7蛋白表达上调有关。 胡辉 谭布珍 袁铿 杨丽兰 胡银英 黄艳琴 朱四红关键词:雷公藤内酯醇 CASPASE-7 大蒜素抑制卵巢癌SKOV-3/DDP细胞生长作用浓度的实验研究 被引量:4 2009年 目的:筛选大蒜素有效作用于人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP的合适的浓度范围,为进一步探讨大蒜素抑制卵巢癌SKOV-3/DDP细胞生长的作用机制奠定基础。方法:首先培养人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP,细胞生长至对数生长期后选取0.625~200μg/ml共9个浓度的大蒜素分别作用SKOV-3/DDP细胞株24、48小时后,用MTT法测定细胞活力。结果:0.625—2001μg/ml大蒜素均能抑制SKOV-3/DDP细胞的生长,且呈时间——剂量依赖性,但高浓度(100—200μg/nd)时细胞毒性作用明显,作用24小时细胞抑制率分别为75.12%、82.79%,作用48小时细胞几乎全部死亡。结论:以上MTT结果可作为后期药物实验的大蒜素浓度及观察时间筛选的实验依据,可选择中低浓度(0.625—50μg/ml)作为进一步探讨大蒜素抑制卵巢癌SKOV-3/DDP细胞生长的作用机制(如观察大蒜素对SKOV~3/DDP细胞周期的影响等)的浓度范围。 张飞凤 谭布珍 袁铿 袁芳 黄艳琴关键词:大蒜素 SKOV-3/DDP MTT法 大蒜素对人卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP超微结构的影响 被引量:1 2011年 目的:通过观察大蒜素对体外培养的人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV-3/DDP)的超微结构的影响,以期寻找对耐顺铂治疗的上皮性卵巢癌患者的有效治疗药物。方法:细胞培养:体外培养人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株SKOV-3/DDP,细胞生长至对数生长期后,调整细胞密度为5×l04/ml置于200ml的培养瓶中培养。用透射电子显微镜观察大蒜素作用后SKOV-3/DDP细胞的超微结构:大蒜素组用含25μg/ml大蒜素的培养液培养SKOV-3/DDP细胞,空白对照组用不含药的培养液培养SKOV-3/DDP细胞,两组作用24小时后收集细胞,通过透射电子显微镜观察SKOV-3/DDP的超微结构。结果:大蒜素对SKOV-3/DDP细胞超微结构的影响:透射电子显微镜观察未加药物培养的SKOV-3/DDP细胞呈椭圆形,细胞核为卵圆形,未出现凋亡细胞,经过大蒜素作用后的SKOV-3/DDP细胞则出现明显的超微结构改变并具有典型凋亡细胞特征:细胞核固缩,核膜皱缩,胞浆浓缩并出现大小不等的空泡,染色质浓聚,形成凋亡小体。结论:大蒜素可诱导SKOV-3/DDP细胞呈凋亡改变。大蒜素可诱导SKOV-3/DDP细胞凋亡可能是其对人耐顺铂上皮性卵巢癌的抗癌机制之一,为使大蒜素成为治疗耐顺铂上皮性卵巢癌患者的有效药物提供了可靠的体外实验依据。 张飞凤 谭布珍 袁铿 袁芳 戴志芳 黄艳琴 胡银英关键词:大蒜素 卵巢癌 超微结构 小剂量雷公藤内脂醇对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株体外活性的影响研究 本文用小剂量雷公藤内脂醇对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株(COC1/DDP)进行干预,观察其对体外培养的COC1/DDP活性的影响及作用时间和量效关系。以期寻找对耐顺铂治疗的人上皮性卵巢癌患者的有效治疗药物。 谭布珍 罗丽萍 袁铿 黄艳琴 胡银英 袁芳关键词:雷公藤内脂醇 卵巢癌 体外活性 量效关系 文献传递 蛔虫体腔液对肿瘤细胞的细胞毒作用 被引量:6 2008年 目的观察蛔虫体腔液(ascaris body fluid,ABF)对小鼠黑色素瘤细胞(B16)、小鼠宫颈癌细胞(U14)和小鼠腹水瘤细胞(S180)的细胞毒作用及其与浓度的关系。方法用6种不同浓度的ABF对B16细胞、U14细胞和S180细胞进行作用,采用四氮唑盐酶还原法(Microculture tetrazolium test,MTT)观察其细胞毒性。结果在一定浓度范围内蛔虫体腔液对上述三种肿瘤细胞均产生细胞毒作用。当浓度为1600mg/ml时,对S180细胞的细胞毒性为57.4%;对B16细胞的细胞毒性达59.6%;对U14细胞的细胞毒性达63.2%,表现出极显著的细胞毒作用。结论在一定浓度范围内蛔虫体腔液对肿瘤细胞有明显的细胞毒作用,且与浓度有依赖关系。 杨小军 袁芳 黄艳琴 胡银英 戴志芳 彭卫东 袁铿关键词:肿瘤细胞 细胞毒作用 雷公藤内脂醇对人卵巢癌耐顺铂细胞株超微结构的影响 被引量:2 2008年 目的探讨雷公藤内脂醇对体外培养的人卵巢上皮性癌耐顺铂细胞株(COC1/DDP)超微结构的影响。方法空白对照组加入9mLCOC1/DDP专用细胞培养液培养,雷公藤内脂醇作用组加入9mL含50μg/L雷公藤内脂醇溶液培养,2组作用48h后收集细胞,通过透射电子显微镜观察COC1/DDP的超微结构。结果透射电子显微镜下观察可见空白对照组中COC1/DDP细胞膜表面有丰富的微绒毛,细胞核大而明显,染色质丰富;雷公藤内脂醇作用组中COC1/DDP细胞表面微绒毛消失,细胞核固缩、染色质凝集成新月状,有凋亡小体形成。结论50μg/L雷公藤内脂醇可诱导COC1/DDP呈凋亡改变。 罗丽萍 谭布珍 袁铿 黄艳琴 胡银英 袁芳 虞功清关键词:雷公藤内脂醇 超微结构 不同冻存时间对兔角膜内皮细胞活性的影响 2007年 目的探讨适合角膜内皮细胞(corneal endothelial cell,CEC)超低温冷藏保存的最佳期限。方法将CEC经-196℃液氮冷冻保存。在冷冻后1、6、12、24个月分别复苏,培养。观察CEC的生长情况和细胞存活率及24h贴壁率。结果冻存1、6、12个月复苏的CEC细胞存活率均≥80.0%,冻存24个月的CEC细胞存活率(72.0%)较前三个时间段稍有下降但没有差异;冻存1、6、12个月CEC24h贴壁率均≥72.5%,此三个时间段比较没有明显差异,冻存24个月CEC24h贴壁率(59.2%)与前三个时间段比较有统计学差异(P<0.05)。结论在供体来源短缺,细胞需要长期保存的情况下,深度冷藏是保存CEC的一种较好的方法。 戴志芳 黄艳琴 袁铿 袁芳 胡银英关键词:角膜内皮细胞 活性 小剂量雷公藤内酯醇对荷卵巢癌大鼠体内抑瘤作用的观察 被引量:6 2009年 目的研究小剂量雷公藤内酯醇对荷卵巢癌大鼠体内抗肿瘤作用。方法将40只F344大鼠右腋窝接种F344大鼠卵巢上皮低分化腺癌细胞株细胞悬液,成瘤后随机分为5组:空白荷瘤组,顺铂组,0.1、0.05、0.025mg雷公藤内酯醇组,每组8只。上述5组大鼠分别给予腹腔注射生理盐水2mL/d,顺铂3mg/(kg·d),雷公藤内酯醇0.1、0.05、0.025mg/(kg·d),均隔天给药,连续10d。结果0.025、0.05、0.1mg雷公藤内酯醇组对大鼠卵巢癌皮下瘤具有明显的抑瘤作用,抑瘤率分别为27.85%、35.63%、49.34%;上述3组大鼠瘤重与空白荷瘤组相比,有显著差异(P<0.01或P<0.05)。结论雷公藤内酯醇在体内具有抑制大鼠卵巢癌的作用。 邹党华 谭布珍 黄艳琴 袁铿 袁芳 戴志芳关键词:雷公藤内酯醇 卵巢癌