韩新峰
- 作品数：3 被引量：41H指数：2
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家科技重大专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 鹅细小病毒强毒PCR检测方法的建立被引量：23
- 2004年
- 参照GenBank中登录的鹅细小病毒 (GPV)B株的全基因序列 ,针对GPV的VP3保守基因设计了 1对引物 ,建立了GPV的PCR检测方法。采用该方法检测GPV能够扩增出预期大小约 4 41bp的特异性片段 ,而对鸭瘟病毒 (DPV)、鹅源致病性大肠埃希氏菌 (E .coli)O8和O1、雏鹅新型病毒性肠炎病毒 (NGVEV)呈阴性反应。该法检测GPV核酸的灵敏度可达 0 .4 7pg ;对GPV强毒皮下注射感染雏鹅各器官的检测结果表明 ,感染后 8h即可从心、肝病料中检出病毒DNA ,感染后 2 4h可从延髓、胸腺、胰腺、十二指肠、空肠、盲肠、腔上囊、心、肝、脾、肺、肾、血液、小脑、直肠、肌肉、粪便中检出GPVDNA ,感染 4 8h后可从骨髓中检出病毒DNA ,感染 312h后仍能从十二指肠、空肠、盲肠、心、肝、肾、粪便中检出病毒DNA。病毒分离阳性的可疑病料PCR检测为阳性 ,对临床送检病料的检测结果表明 ,PCR的敏感性显著高于病毒分离。
- 黄诚程安春汪铭书刘菲韩新峰王刚周伟光文明贾仁勇郭宇飞陈孝跃周毅
- 关键词：PCR鹅细小病毒
- 鸭疫里默氏杆菌病原及其防控关键技术研究被引量：17
- 2012年
- 文章回顾了鸭疫里默氏杆菌的病原鉴定、主要抗原、耐药机制等若干基础问题的研究进展,分析了鸭疫里默氏杆菌全基因组测序工作的完成对进一步深入开展致病机理研究和疫苗研发的重要意义。同时,从我国水禽生产的角度对鸭疫里默氏杆菌病的防控关键技术进行了详细阐述。
- 程安春朱德康王晓佳王雪平张莎秋贾仁勇罗启慧韩新峰陈孝跃汪铭书
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌鸭疫里默氏杆菌病
- 鸭瘟病毒UL51基因在COS-7细胞中的瞬时表达被引量：1
- 2009年
- 为阐明鸭瘟病毒(DPV)UL51基因的特性和功能,根据DPVUL51基因序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增UL51基因,并将其克隆至pMD18-T载体上,经双酶切和测序鉴定后,再将该目的片段亚克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体上,得到重组质粒pcDNA3.1-UL51,通过脂质体介导将其转入COS-7细胞;应用实时荧光RT-PCR、Western-blotting和间接免疫荧光法检测UL51基因在COS-7细胞中的转录、表达和定位情况。结果表明,UL51基因在转染后6 h即已开始转录,12 h开始表达,24 h时转录和表达量均达最高峰,之后逐渐降低。该基因在COS-7细胞中表达蛋白的分子质量为33 ku,比预测的分子质量(约27.1 ku)大。间接免疫荧光法显示,该基因产物早期聚集于COS-7细胞的近核区域,晚期位于胞浆和胞核中。
- 沈婵娟程安春汪铭书郭宇飞信洪一徐超贾仁勇韩新峰
- 关键词：鸭瘟病毒真核表达载体COS-7细胞实时荧光RT-PCR免疫印迹间接免疫荧光法
