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郭虹凤
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1
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供职机构:
哈尔滨医科大学附属第一医院
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发文基金:
黑龙江省教育厅科学技术研究项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
王政
哈尔滨医科大学附属第一医院
周宏艳
哈尔滨医科大学附属第一医院
李为民
哈尔滨医科大学附属第一医院
孙文学
哈尔滨医科大学附属第一医院
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MMP-2靶向RNAi质粒的构建及其对小鼠巨噬细胞MMP-2表达的沉默作用
2010年
目的构建基质金属蛋白酶2(MMP-2)靶向的RNA干扰(RNAi)质粒,观察其对小鼠巨噬细胞MMP-2基因表达的沉默作用。方法设计能转录小发卡结构RNA的DNA序列,并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达质粒psiSTRIKETM-MMP-2;将此质粒导入小鼠巨噬细胞内,采用RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术检测小鼠巨噬细胞中的MMP-2 mRNA及蛋白表达。结果重组质粒psiSTRIKETM-MMP-2用限制性PstⅠ内切酶酶切后,琼脂糖凝胶电泳中可清楚地看到重组载体被切为2个片断,证明重组质粒构建成功。将其转染小鼠巨噬细胞后,MMP-2 mRNA及蛋白表达下调。结论成功构建了MMP-2靶向RNAi质粒,其能明显抑制小鼠巨噬细胞MMP-2 mRNA及蛋白的表达。
王政
李为民
周宏艳
郭虹凤
孙文学
关键词:
基质金属蛋白酶
肺纤维化
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