赵伟
- 作品数:21 被引量:74H指数:5
- 供职机构:北京联合大学生物化学工程学院更多>>
- 发文基金:北京市教育委员会科技发展计划面上项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学化学工程理学更多>>
- 中国林蛙Onconase样核糖核酸酶的基因克隆和表达被引量:1
- 2011年
- Onconase是从美洲豹蛙卵中提取的一种核糖核酸酶,由于其抗肿瘤活性而具有潜在的临床应用价值。以中国林蛙基因组为模板,克隆了一个新的RNase基因,并由此推导出了成熟林蛙RNase的氨基酸顺序。该酶是由103个氨基酸残基组成的,它保留了RNase A家族成员酶催化活性必须的组氨酸和赖氨酸残基,以及CKXXNTF的序列特征,与Onconase具有73%的氨基酸顺序的相似性。林蛙酶比Onconase少一个氨基酸,成为迄今为止发现的RNaseA家族中的最小成员;并且,林蛙酶拥有的精氨酸和酪氨酸残基比Onconase多3个。此外,在利用原核表达系统对林蛙RNase基因进行表达的过程中,表达产物对宿主显示出一定的细胞毒性。
- 徐宏博王天航董安康陶凤云赵伟
- 关键词:中国林蛙核糖核酸酶基因克隆和表达
- 中国林蛙卵核糖核酸酶的分离纯化及其抗肿瘤作用被引量:12
- 2010年
- 以中国林蛙卵为原料,采用丙酮分级沉淀、SP-Trisacryl阳离子交换色谱、SephadexG-75凝胶过滤色谱、C8反相色谱等纯化方法,得到一种具有核糖核酸酶活性的蛋白质,采用SDS-PAGE电泳对该蛋白质进行了相对分子质量和纯度测定。结果表明:纯化的中国林蛙卵核糖核酸酶为相对分子质量13kDa的单一成分。该酶最适反应温度为65℃,最适反应pH为5.5~6.0,米氏常数为4.11μmol/L,最大反应速率为2.82pmol/s。在体外细胞毒性实验中,对人三种肿瘤细胞HeLa、K562、MCF-7具有抑制作用,其IC50分别为0.6μmol/L、0.8μmol/L和4μmol/L,而对于正常人成纤维细胞在酶浓度达到8μmol/L时仍未见明显细胞毒性。这种从中国林蛙卵中分离纯化出的具有选择性细胞毒性的小分子量核糖核酸酶,为肿瘤的治疗提供了新的候选蛋白分子。
- 陶凤云赵伟林强马润宇
- 关键词:中国林蛙核糖核酸酶分离纯化抗肿瘤
- 生物工艺学课程教学改革实践与探索被引量:1
- 2011年
- 生物工艺学是生物工程专业的核心课程。结合我校生物工艺学课程的教学实践探讨了在教学内容、教学方法和实践教学等方面所进行的多层次的教学改革,以达到提高教学质量,提升学生的综合素质、创新能力和特色竞争力的目标。
- 冀颐之龚平赵伟
- 关键词:生物工艺学课程建设教学改革
- 五步蛇蛇毒的分离纯化及综合利用被引量:6
- 2005年
- 五步蛇蛇毒冻干粉经过SephadexG-75分子筛层析,使纤溶酶和类凝血酶初步分离;DEAE阴离子交换层析对2种酶进一步分离纯化,分别得到了纤溶酶和类凝血酶。2种酶在HPLC图谱上均呈单一峰,在SDS-PAGE图谱上均为单一条带,纤溶酶分子量大约为24.1kDa,类凝血酶分子量大约为14.4kDa,与以往报道相符。酶的总活力回收率大大提高,纤溶酶的活力回收率达23.9%,类凝血酶的活力回收率达34.5%。实现了对蛇毒的综合利用,为进一步开发利用蛇毒探索了一条有效的途径。
- 付大雁赵伟郭锴俞军
- 关键词:综合利用分离纯化五步蛇SEPHADEX类凝血酶纤溶酶
- 液相色谱在生物大分子分离研究中的应用
- 2012年
- 本文讨论了液相色谱法在生物大分子分离过程中的应用,主要探讨色谱柱的选择以及分离条件的确定。以糖类为例介绍了液相色谱分离生物分子的具体方法,同时对柱温流动相等因素进行分析和讨论。液相色谱法应用于生物大学子实验教学,对学生掌握先进的分离方法具有很重要的意义。
- 谷春秀赵伟于志勇谷雪枫徐宏博
- 关键词:生物大分子糖类液相色谱法
- 人类核糖核酸酶A家族被引量:1
- 2012年
- 核糖核酸酶A(RNase A)是脊椎动物所特有的蛋白质家族。除了水解RNA以外,它们还参与细胞成熟、细胞凋亡、血管生成以及宿主防御等过程,在疾病的诊断和治疗方面表现出重要的应用价值。随着人类基因组计划的完成,人们已经发现了13个RNase A基因。本文综述了人类RNase A的酶活性和结构特点,特别论述了其特殊的生物学活性,以及酶活性与特殊生物学活性之间的关系,为进一步的研究和应用提供信息。
- 徐宏博李丹赵伟
- 关键词:酶活性杀菌活性
- 核糖核酸酶A超家族成员杀菌作用研究进展被引量:4
- 2009年
- 核糖核酸酶A超家族是一类以牛胰腺核糖核酸酶A为代表的、从不同脊椎动物中分离到的同源蛋白组成,其中几个成员具有选择性抗微生物活性,不同成员杀菌作用的机制不同。本文对近年发现的核糖核酸酶A超家族成员的杀菌谱及其作用机制的研究成果进行了总结,并分析了当前存在的问题和解决的思路。核糖核酸酶独特的杀菌作用机制在新药开发中具有引人瞩目的前景,基于其独特的分子骨架设计合成新一类抗生素,可能在微生物感染的临床治疗中发挥作用。
- 陶凤云赵伟马润宇
- 关键词:核糖核酸酶A抗生素
- 中国林蛙凝集素样核糖核酸酶A的抑菌作用
- 2013年
- 目的:从中国林蛙基因组中克隆核糖核酸酶的基因并分析该基因的特殊生物学功能。方法:采用PCR方法克隆基因,利用原核系统进行基因表达,检测重组蛋白的抑制细菌生长的活性。结果:DNA顺序分析显示:克隆的基因编码了111个氨基酸序列,其中拥有核糖核酸酶A家族的保守序列,与日本稻田蛙的一种凝集素样核糖核酸酶的氨基酸相似性达到82%,与中国林蛙Onconase样核糖核酸酶氨基酸序列仅有40%相似性。重组蛋白对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有生长抑制作用。结论:中国林蛙凝集素样核糖核酸酶有抑制细菌生长的作用。
- 李丹张潮陶凤云赵伟
- 关键词:中国林蛙核糖核酸酶A抑菌作用
- 茶树油对植物病原真菌的抑制作用被引量:7
- 2008年
- [目的]测定茶树油对植物病原真菌的抑制作用。[方法]采用菌丝生长速率法测定茶树油对水稻恶苗菌、尖孢镰刀菌和水稻纹枯菌的最小抑菌浓度。[结果]茶树油对3种测试菌的菌丝生长均具有显著的抑制作用,最小抑菌浓度分别为1.000%、0.750%和0.125%。[结论]茶树油对3种植物真菌菌丝生长的抑制作用显著,为进一步开发农用杀菌剂奠定了基础。
- 陶凤云赵伟林强
- 关键词:茶树油植物病原真菌
- 蚯蚓纤溶酶的分离纯化研究被引量:12
- 2005年
- 目的从赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)中分离纯化出一种相对分子质量(Mr)较小的纤维蛋白溶解组分--蚯蚓纤溶酶(EFE),为其注射剂的研制开发打下基础.方法采用盐析、透析、凝胶过滤色谱、离子交换色谱等方法分离纯化EFE,用SDS-PAGE对纯化的活性组分进行Mr测定,用酶谱分析方法初步探讨蚯蚓中存在的其它纤溶酶活性组分.结果分离纯化得到了EFE单一组分,经SDS-PAGE EFE呈单一条带,Mr约为25 000.经酶谱分析发现纤溶酶活性组分Mr分布在25000~50 000之间.结论反复使用色谱技术可分离纯化EFE,并得到单一组分.
- 李菁华赵伟
- 关键词:蚯蚓纤溶酶凝胶过滤色谱离子交换色谱酶谱分析