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谢万钦: 作品数：16 被引量：28H指数：4; 供职机构：南开大学生命科学学院生物化学与分子生物学系更多>>; 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学更多>>

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CaMBP-10分子中钙调素结合位点的鉴定: ＜正＞CaMBP-10是从白菜中分离到的一种分子量约为10 kD的钙调素结合蛋白,其与钙调素（CaM）的结合具有不依赖于钙的特性,即在有钙和无钙（存在EGTA）条件下均能与CaM结合。通过序列比对和生化性质比较,确认C...; 李振鹏谢万钦白文艳赵玉龙李翠凤; 文献传递

外源茉莉酸和真菌激发子诱导白菜CaMBP10的表达被引量：8: 2009年; Recently,CaMBP10 was identified as a plant lipid transfer protein(LTP).In the study,four leaves old cabbages were treated with exogenous jasmonic acid(JA),JA plus LTP,fungal elicitor,200 mmol/L NaCl and 20% PEG respectively for understanding the functions of CaMBP10 in vivo.The expression of CaMBP10 was determined by using semi-quantitative RT-PCR.The results showed that the expressions of CaMBP10 were dramatically up-regulated in different levels under indicated conditions.It demonstrated that CaMBP10 was involved in biotic and abiotic stress response.; 胡文全谢万钦张蕊张映熠李翠凤; 关键词：白菜钙调素结合蛋白 ATPASE活性 CDNA全长植物生长素

植物转脂蛋白的抗病机制研究进展被引量：6: 2006年; 植物受病原菌侵染后会诱导病程相关蛋白的表达,抑制病原菌的生长和蔓延,并产生系统性获得抗性．目前已确定的病程相关蛋白有14种,植物转脂蛋白被列入其中．关于转脂蛋白的作用尽管已争论多年,但其准确的生理功能及作用机制至今仍不十分明确．近年来人们将焦点集中在转脂蛋白抗性功能与机制的研究上．文中介绍了目前这一领域的研究进展,并根据该室的研究结果,提出钙调素可能参与植物转脂蛋白抗性功能的调节,为全面阐明转脂蛋白的抗病机制提供了新的研究线索．; 谢万钦王喆李翠凤; 关键词：钙调素抗菌肽抗病机制

玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA克隆和表达及表达产物的钙调素结合活性分析被引量：8: 2006年; 用RT-PCR法克隆了成熟的玉米非特异性脂转移蛋白的cDNA,将它连接到表达质粒上并转化至大肠杆菌中表达。以钙调素凝胶覆盖法和钙调素亲和层析下拉实验对表达产物进行分析,证明它具有结合钙调素的活性,并且这种结合不依赖于Ca2+,与前期研究中钙调素结合蛋白-10和拟南芥非特异性脂转移蛋白1的结合特性相同。采用基因删除和缺失突变的方法研究玉米非特异性脂转移蛋白与钙调素结合的结构域,结果表明钙调素结合于47～60位氨基酸,预测的蛋白质二级结构为碱性双亲α-螺旋结构。; 白文艳赵立青李振鹏谢万钦赵玉龙李翠凤; 关键词：非特异性脂转移蛋白钙调素

豌豆质膜内源CDPK对植物转脂蛋白CaMBP-10的磷酸化及CaMBP-10对激酶自磷酸化的影响被引量：2: 2009年; 植物转脂蛋白(LTPs)是多基因编码的蛋白家族,广泛分布于高等植物.虽然LTPs的确切功能至今仍不完全清楚,但它参与植物生物、非生物胁迫反应以及它的抗性功能已成为近年来的研究热点.关于LTPs功能的调节机制目前几乎一无所知.最近,从白菜中分离的钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)被鉴定为植物转脂蛋白家族成员,并且,体外实验证明钙调素(CaM)调节其脂质结合活性.为了深入了解转脂蛋白功能的调节机制,本文研究了CaMBP-10的磷酸化作用,发现CaMBP-10可被豌豆质膜内源性蛋白激酶磷酸化,钙离子(Ca2+)能刺激磷酸化,钙螯合剂EGTA以及CaM拮抗剂W-7和TFP均能显著抑制磷酸化.免疫印迹分析最终确定该激酶为CDPK家族成员.构建突变体进一步研究了CaMBP-10的磷酸化位点,发现其位于蛋白的C-末端区域,并与已确定的CaM结合位点重合.同时,分析结果表明CaM能抑制CaMBP-10的磷酸化.反之,CaMBP-10的磷酸化又能阻断其与CaM的结合,显示出两种调节方式相互竞争的特点.为深入研究磷酸化作用对CaMBP-10脂质结合活性的影响,构建突变体(Ser83Asp,Ser85Asp)以模拟磷酸化状态.实验结果显示,磷酸化作用能显著增强CaMBP-10的脂质结合活性,而且突变体的脂质结合活性不受CaM的影响.采用胶内磷酸化测定法(in-gelkinaseassay)研究了激酶的自磷酸化特点以及CaMBP-10对激酶自磷酸化的影响,发现CaMBP-10能激活激酶的自磷酸化,激酶的自磷酸化又能促进其对底物的磷酸化作用.这样,激酶的自磷酸化与底物的磷酸化形成一种"正反馈环"的调节模式.综合研究结果,本文首次证明了LTP受CaM结合和CDPK磷酸化的双重调节.而且,CaM结合位点与磷酸化位点的重合预示可能存在特殊的调节机制,以协同应答胞内的Ca2+信号.; 赵玉龙谢万钦胡文全张映熠张蕊李翠凤; 关键词：磷酸化自磷酸化

白菜转脂蛋白CaMBP10分子中钙调素结合结构域的鉴定被引量：3: 2011年; 植物转脂蛋白(LTPs)是多基因编码的蛋白家族,广泛分布于高等植物,其确切的生理功能至今仍不清楚.本室从白菜中分离的钙调素结合蛋白-10(CaMBP10)经序列分析被鉴定为植物转脂蛋白家族成员,体外实验证明钙调素(CaM)调节其脂质结合活性.为了深入了解转脂蛋白与CaM的相互作用机制,本文通过删除、缺失和定点突变等分子生物学手段确定了白菜转脂蛋白CaMBP10分子中的钙调素结合结构域.该结构域位于分子C末端64～83位氨基酸残基之间,其中疏水氨基酸的分布具有1-5-8-10的CaM结合模序特征.; 金犂天胖铁良李振鹏谢万钦李翠凤; 关键词：钙调素结合蛋白

外源茉莉酸和真菌激发子诱导白菜CaMBP10的表达: ＜正＞植物转脂蛋白（LTPs）是一类由多基因编码的、广泛存在于高等植物中的碱性小分子蛋白。LTPs作为可溶性蛋白既分布于植物细胞内,又具有信号肽结构可分泌至细胞外,同时分子中具有豆寇酰化结构可定位于细; 胡文全谢万钦张蕊张映熠李翠凤; 文献传递

植物内源蛋白激酶对转脂蛋白BP-10磷酸化的研究: ＜正＞在植物识别病原体并激活防御反应的信号传递过程中,蛋白激酶起到非常重要的作用。近年来,发现有多种蛋白参与植物抗性反应如：防御素、硫素、几丁质酶等。植物转脂蛋白也作为抗性蛋白家族的一员被国际组织命名为“病程相关蛋白-1...; 谢万钦赵玉龙胡文全李翠凤; 文献传递

钙调素对钙调素结合蛋白-10和玉米非特异性脂转移蛋白与脂质结合活性的影响被引量：9: 2006年; 荧光标记的脂质结合实验表明,钙调素结合蛋白-10(CaMBP-10)具有典型的植物非特异性脂质转移蛋白与脂质结合的特性。进一步实验研究了钙调素(calmodulin,CaM)对CaMBP-10和玉米nsLTP与脂质结合的活性的影响,结果显示无论在有钙和无钙条件下,CaM对两者的影响均有不同之处,W-7和TFP能消除CaM的影响。提示CaM不仅与CaMBP-10和玉米nsLTP特异性相互作用,而且对2种脂转移蛋白可能具有不同的调节机制。; 谢万钦赵立青白文艳李振鹏赵玉龙李翠凤; 关键词：钙调素

白菜转脂蛋白基因CaMBP10的RNAi沉默体系的初步建立: 2011年; 为研究白菜转脂蛋白——CaMBP10的体内功能,构建含有该基因片段的RNAi质粒,以农杆菌介导法对大白菜‘津育60’进行遗传转化,通过对转基因植物在生物与非生物胁迫中表型变化的研究,确定其体内功能。文章报告RNAi质粒的构建、鉴定及其转化植株基因组DNA中外源片段的鉴定。DNA分析结果显示,外源基因已成功插入了白菜基因组,RT-PCR检测结果显示转化植株内源CaMBP10基因的表达明显降低,为后续的转脂蛋白体内功能研究奠定了基础。; 张蕊胡文全谢万钦李翠凤; 关键词：RNA干扰

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