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嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶基因的克隆与序列分析被引量：5: 2007年; 将GenBank中已报道的罗伊氏乳杆菌亚油酸异构酶基因对已公布的嗜酸乳杆菌NCFM基因组全序列做tblast，找到一个同源编码框，参照此编码框的核苷酸序列及pQE30质粒图谱特性设计上、下游引物，利用PCR法扩增嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶基因，并克隆到pQE30质粒栽体上进行测序，分析测序结果表明，扩增得到的目的DNA全长1776bp，G＋C含量为37.5％，共编码591个氨基酸，理论相对分子质量67.5kDa．用Signal P3.0对其N端前70个氨基酸序列进行分析，结果表明，第20～40位氨基酸有较强的疏水性。不过，N端前70个氨基酸的C值、S值和Y值并不高，最有可能的酶切位点位于第45位与第46位氨基酸之间，但预测其被切割的可能性概率低于1％。可以推断，在嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶的N端氨基酸序列中不存在信号肽序列。; 董理曹健王育军王红军; 关键词：嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因克隆

植物乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的克隆、序列分析及重组表达被引量：8: 2007年; 利用MRS培养基培养植物乳杆菌AS1.555,收集菌体后提取总DNA,用PCR技术扩增其亚油酸异构酶基因,克隆到pQE30质粒载体上,并进行测序。测序结果表明,扩增DNA全长1710 bp,编码569个氨基酸,分子量为64.7 ku。经同源性比较,此核酸序列与罗伊氏乳杆菌、短双歧杆菌、疮疱丙酸杆菌亚油酸异构酶基因核苷酸序列差别较大,推测此基因的来源与上述菌种不同。; 相丽新曹健王红军尹艳丽王育军于海东张琳董理; 关键词：植物乳杆菌克隆

嗜酸乳杆菌共轭亚油酸异构酶基因的表达研究: 共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid，CLA)是一类在9-与11-位、10-与12-位或11-与13-位碳原子处有顺式或反式共轭双键的十八碳二烯酸。在共轭亚油酸的各种异构体中，只有c9，t11-1...; 董理; 关键词：异构酶共轭亚油酸嗜酸乳杆菌基因表达; 文献传递

微生物共轭亚油酸异构酶的生物学研究被引量：8: 2007年; 在各种共轭亚油酸异构体中,c9,t11-18∶2和t10,c12-18∶2这两种天然不饱和脂肪酸异构体被认为具有生物活性,如抗癌、抗动脉粥样硬化、减肥、促进生长、缓和免疫反应副作用等,因而在医药、食品、保健品、化妆品等领域有着广阔的应用前景.一些微生物能产生共轭亚油酸异构酶(Conjugated linoleic acid isomerase,EC 5.2.1.5),该酶又能专一性地催化亚油酸转化为活性共轭亚油酸异构体的反应,因此近几年来倍受关注,利用生物合成法生产共轭亚油酸已成为该领域未来的发展趋势.然而目前,共轭亚油酸异构酶的物种分布及进化关系、在细胞中的生物学功能、结构域、催化反应机理等尚未得到完整的阐释,利用基因工程技术大量高效地表达有活性的重组酶也尚未得到很好的解决.本文在前人对共轭亚油酸异构酶进行的多方面研究的基础上,对近年来共轭亚油酸异构酶的分布、生物学作用、酶的催化反应机理、酶基因的克隆表达等生物学方面的研究进展进行了综述,并利用生物信息学方法对已知的共轭亚油酸异构酶序列进行了初步分析.; 王红军曹健王育军董理相丽新张琳; 关键词：共轭亚油酸异构酶生物学功能基因克隆与表达

嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因的克隆与表达被引量：5: 2007年; 利用分子生物学方法对嗜酸乳杆菌AS1.1854菌株的亚油酸异构酶基因进行克隆与表达.培养菌体后提取总DNA,用PCR法扩增其亚油酸异构酶基因,再将其克隆到pET30a载体上,转入到大肠杆菌BL21株中表达,在低温下诱导表达出重组蛋白,并用Ni2+金属鳌合层析对重组蛋白进行分离和纯化.通过实验,得到了亚油酸异构酶的基因,成功转入到载体中,表达出了可溶性的重组蛋白,并对其进行了纯化.实验表明,在原核细胞中可以表达出可溶性重组亚油酸异构酶,以200mmol/L的咪唑洗脱液进行洗脱可以获得目标蛋白.; 曹健董理王育军; 关键词：嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶基因克隆重组蛋白纯化

共轭亚油酸的生物合成及相关酶基因的克隆与表达被引量：7: 2008年; 共轭亚油酸是一类在9-与11-位、10-与12-位或11-与13-位碳原子处有顺式或反式共轭双键的十八碳二烯酸。在共轭亚油酸的各种异构体中,只有c9,t11-18∶2和t10,c12-18∶2两种异构体具有多种生理活性,如抗癌、抗粥状动脉硬化、抗氧化、降低胆固醇、减肥等。共轭亚油酸异构酶可以专一性地催化亚油酸转化为活性共轭亚油酸异构体,因此近几年来倍受关注,利用生物合成法生产共轭亚油酸已成为该领域的发展趋势。对近年来共轭亚油酸的生物合成以及相关酶基因克隆表达方面的研究进展进行了综述。; 王中太曹健尹艳丽刘莹杨永刚董理; 关键词：共轭亚油酸异构酶生物合成克隆

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董理