葛晓冬
- 作品数：32 被引量：81H指数：5
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- 常染色体三体型胎儿的产前诊断及病理分析
- 2012年
- 目的探讨不同染色体核型异常胎儿的合并畸形的类型,为孕妇提供选择妊娠结局的科学依据,为可出生胎儿分析在生长发育过程中可能出现的生物学现象,同时,为超声影像学诊断染色体病胎儿提供临床资料。方法经腹羊膜腔穿刺抽取羊水或胎儿脐静脉血进行细胞培养染色体核型分析,常规G显带分析,病理分析。结果 40例染色体异常核型中中孕羊水异常31例;中晚孕脐静脉血染色体异常29例(其中羊水已发现异常20例),在发现的染色体核型异常40例中21三体27例(嵌合型2例,易位型1例);18三体12例;13三体1例;其中20例在知情同意的原则下进行了病理尸解,13例21三体尸解中发现2例合并唇腭裂;2例合并十二指肠畸形;3例合并心脏畸形。6例18三体尸解中除共有的握拳手式外,2例合并室间隔缺损及脑室异常;3例合并肾脏或输尿管畸形,1例13三体为心脏多发畸形伴视网膜发育不良。结论常染色体三体型胎儿可选择终止妊娠。本文染色体三体型尸解中不但有常见的心脏及泌尿系统畸形,还有2例唇腭裂及2例十二指肠畸形,提示超声发现的出生后可骄正并正常生存的畸形胎儿,一定要排除染色体三体型的可能。
- 姚宏葛晓冬梁志清常青徐聚春董艳玲胡斌胡华李俊男卞修武
- 关键词：染色体异常核型产前诊断病理分析
- 人乳腺癌组织中Tbx3基因表达变化及其意义被引量：7
- 2005年
- 目的 探讨Tbx3基因在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法 收取新鲜乳腺癌和癌旁乳腺组织各44例,以Tripure试剂提取细胞总RNA,以RT PCR法检测两种组织中Tbx3基因的表达水平,并比较其表达状况与乳腺癌相关临床病理因素之间的关系。结果 Tbx3基因在乳腺癌组织中的表达显著强于癌旁乳腺组织(P<0 01),与患者的年龄、肿瘤大小无关,但随着临床分期的进展、出现腋窝淋巴结转移、肿瘤浸润程度增加和组织学级别的增高,该基因的表达明显增强。结论 高表达的Tbx3基因可能在乳腺癌发生发展过程中起促进作用,并可能是乳腺癌进展中关键性转变的标志性基因之一。
- 邓军刘友生黄涛生葛晓冬陈锐王晓东王长松李红
- 关键词：乳腺肿瘤
- 内毒素结合肽表达质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2003年
- 应用PCR技术 ,从含人NH·LBPcDNA的质粒中扩增出 93bp的内毒素结合肽 (endotoxinbindingpeptide,EBP)基因片段 ,插入原核融合蛋白表达质粒PinpointXa3的多克隆位点构建成表达质粒 ,转化大肠杆菌DH5α,筛选得到阳性重组子PinpointXa3 EBP并进行酶切鉴定及序列分析。异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导重组融合蛋白的表达 ,经SDS PAGE及Westenblot鉴定得到分子量约为 16 .5kD的生物素化EBP融合蛋白 ,为进一步研究其内毒素拮抗效应打下良好基础 。
- 麻莉刘友生王晓东葛晓冬李永旺
- 关键词：质粒大肠杆菌融合蛋白
- 一种改建的抗菌肽及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种改建的抗菌肽及其制备方法和应用，该抗菌肽为序列表中SEQ ID NO：1所示的改建的37肽抗菌肽rLL-37-1，该改建的抗菌肽能够增强LL-37杀菌力，降低溶血等副反应，并且易制备。
- 葛晓冬
- 文献传递
- 人源噬菌体抗体库的构建及抗人NH-LBP抗体的筛选与鉴定被引量：15
- 2005年
- 目的: 构建人源噬菌体抗体库并制备抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段 (NH- LBP)的单克隆抗体 (mAb)。方法:以噬菌体展示系统(pComb3H/VCSM13)建立人源噬菌体抗体库(Fab), 并以昆虫细胞sf21在无血清培养基 (SF 900Ⅱ )中,通过BAC- TO- BAC杆状病毒表达系统来表达NH -LBP。再以NH -LBP为抗原, 从人源噬菌体抗体库中筛选可产生抗NH- LBPmAb的菌株并进行鉴定。结果: 昆虫细胞sf21可表达人源NH- LBP, 经亲和纯化柱芯 (TALON)有效纯化后, 获得约8mg的NH- LBP。成功地建立人源噬菌体抗体库, 库容达5. 0×108 CFU。经 8轮筛选后, 抗体库被富集 1. 85×104 倍。经ELISA法鉴定, 获得 3株可产生抗NH -LBPmAb的菌株(核酸序列及氨基酸序列见GenBank中的: AY337713,AY337714 )。结论: 以昆虫细胞sf21表达NH LBP及以其为抗原制备噬菌体mAb是可行的。本研究为进一步建立抗NH- LBP的二硫键稳定的Fv抗体 ( disulfidestabilizedFvfrag ments, dsFv), 研究人体内LBP的变化规律和过度炎症反应的防治奠定了基础。
- 葛晓冬刘友生王晓东王长松邓军李红
- 关键词：人源噬菌体抗体库昆虫细胞
- 脂多糖结合蛋白和其单克隆抗体、以及制备方法和用途
- 本发明公开了一种脂多糖结合蛋白和其单克隆抗体、以及制备方法和用途。通过从人肝细胞中提取编码NH－LBP的cDNA片段，采用昆虫sf21细胞制备了NH－LBP蛋白，并通过pComb3H噬菌粒建立了人源噬菌体抗体库，以NH－...
- 葛晓冬
- 文献传递
- 内毒素结合蛋白样分子p48体内外生物学活性的初步研究
- 2008年
- 目的以LBP为对照,对比研究p48的体内、外生物学功能。方法采用生物传感器、流式细胞分析技术研究p48与LPS及Lipid A的结合力。通过体外培养人单核细胞(U937)和小鼠体内TNF-α的分泌实验,研究p48的生物学功能。采用ELISA方法初步探索p48与LBP是否具有一定相似的空间结构。结果p48能促进LPS与PBMC结合,其活性为LBP的81%。p48能与LPS及Lipid A结合,其亲和常数(KD)分别为1.59×10-6、1.48×10-6mol/L。体内外实验中p48均能促进TNF-α的分泌,其生物学活性约为LBP的77%。高浓度抗NH-LBP Fab抗体能与p48特异性结合,p48部分空间结构与LBP可能有一定的相似性。结论p48具有与LBP相近似的生物学功能,在机体炎症反应中也发挥较重要的作用。
- 葛晓冬杨艳丽段光杰陈锐潘峰朱江刘友生
- 关键词：生物传感器流式细胞分析技术
- 改良人源LL-37杀菌肽的融合表达及其杀菌活性被引量：7
- 2006年
- 目的:将改良LL37多肽以融合肽形式表达、纯化,并初步研究其杀菌活性.方法:将编码改良的LL37多肽的DNA序列放入载体pET30a(+),转入工程菌BL21star(DE3)中,用IPTG诱导表达得到含6×His标记的改良融合蛋白LL37.再以TALON柱芯亲和层析、SDSPAGE和Westernblot鉴定后,用FXa裂解融合肽.将裂解后多肽进一步用强阳离子交换柱MacroPrepHighS纯化、收集各洗脱峰,脱盐、冻干.采用抑菌圈法检测改良LL37的抗菌活性.结果:改良的LL37多肽于载体pET30a(+)在杆菌BL21star(DE3)中高效融合表达,用凝胶扫描显示融合蛋白的表达量约占全菌蛋白的35%.融合蛋白经纯化后用SDSPAGE鉴定在Mr4000处见单一条带.经抑菌圈法检测改良的LL37多肽对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌都具有很好的杀菌力.结论:改良的人源性LL37多肽以原核细胞进行融合表达是可行的,并具有较强的杀菌活性.
- 杨艳丽葛晓冬刘友生邹佳
- 关键词：杀菌活性
- 438例胎儿和围产儿尸检中先天畸形的临床病理分析被引量：9
- 2012年
- 目的通过病理解剖检查,探讨胎儿和围产儿先天畸形的发生情况及临床病理特点。方法回顾性分析我院2005年1月至2010年12月438例产科和儿科的围产儿及胎儿尸检资料和临床资料,对先天性畸形及主要死因进行分析。结果临床诊断与病理解剖诊断符合率为92.00%。438例围产儿及胎儿尸检中畸形检出率85.84%(376/438),最常见为神经系统(76例)和循环系统(72例),其次为头面五官(42例)、运动骨骼(32例)、泌尿生殖(30例)、呼吸(25例)、染色体病(26例)、消化(20例)等系统畸形。其中单一畸形64.63%(243/376),多发畸形35.37%(133/376)。结论先天畸形是影响围产儿及胎儿死亡的重要因素。病理解剖检查是确诊胎儿畸形及明确死因的有效手段。
- 徐承平葛晓冬李晓林卞修武
- 关键词：围产儿胎儿尸检先天性畸形
- 脂多糖结合蛋白及其单克隆抗体和用途
- 本发明公开了一种脂多糖结合蛋白及其单克隆抗体和用途，通过从人肝细胞中提取编码NH-LBP的cDNA片段，采用昆虫sf21细胞制备了NH-LBP蛋白，并通过pComb3H噬菌粒建立了人源噬菌体抗体库，以NH-LBP为抗原进...
- 葛晓冬
- 文献传递
