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荣曼

作品数：5 被引量：3H指数：1
供职机构：山西医科大学实验动物中心更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 3篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 4篇细胞
  • 2篇凋亡
  • 2篇增殖
  • 2篇转染
  • 2篇细胞增殖
  • 2篇PDGF
  • 2篇GAL
  • 2篇N-
  • 1篇蛋白
  • 1篇动物
  • 1篇动物模型
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇源性
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇脂质体
  • 1篇神经母细胞
  • 1篇神经母细胞瘤
  • 1篇内源

机构

  • 5篇山西医科大学

作者

  • 5篇荣曼
  • 4篇张锐虎
  • 4篇刘田福

传媒

  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇生物技术通报
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇山西医科大学...

年份

  • 5篇2013
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
BALB/c小鼠神经母细胞瘤移植模型的建立及相关影响因素的研究被引量：1
2013年
目的通过在BALB/c小鼠不同部位注射神经母细胞瘤(N2a)细胞建立转移瘤模型,探讨BALB/c小鼠影响造模成功的因素。方法 BALB/c小鼠以注射部位随机分为腹腔、颈背、腋下3个实验组。注射液为用完全培养液和处于对数生长期的N2a细胞配制成含1×107个/ml的细胞悬液,0.2 ml/只皮下注射。实验鼠首次注射在出生1-7 d进行,根据外观和触摸检查对确定未长瘤的鼠只在8-14 d进行再注射;并对仍确定未长瘤者在15-21 d时进行了第3次注射。记录BALB/c小鼠成瘤的潜伏期、成瘤率,及绘制正常鼠与荷瘤鼠的生长曲线等。结果在53只参与实验的BALB/c小鼠中,有50只完成了实验,存活率为94.34%;其中21只成功建模,成瘤率为42%。就接种部位来看,腹腔、颈背和腋下的成功率分别为46.2%,38.1%,33.3%;雌性的成瘤率为57.89%,高于雄性的32.26%(P<0.05);成瘤率随着接种年龄的增长而降低,3个年龄段的成瘤率分别为48.2%,35.7%,20%;荷瘤鼠的潜伏期最短的5 d,最长的在20 d以上,大多在11-15 d,三者分别占荷瘤鼠的比例为4.76%,9.53%和61.9%。荷瘤鼠最终因瘤体过大、极度消瘦而死亡。结论本实验利用完全免疫的BALB/c小鼠成功建立了神经母细胞瘤移植模型,为进一步研究神经母细胞瘤的发病机制和治疗提供了理想的实验材料。
张锐虎荣曼刘田福
关键词：BALBC小鼠N2A细胞动物模型
pcDNA3.1-PDGF β -GAL在Neuro-2a细胞的表达及其对细胞增殖和周期的影响
目的：构建真核表达载体pcDNA3.1-PDGF-GAL；观察重组质粒瞬时转染Neuro-2a细胞后甘丙肽基因（galanin,GAL）的表达水平;建立稳定表达小鼠GAL的Neuro-2a细胞系GAL-Neuro-2a；...
荣曼
关键词：GAL细胞增殖细胞凋亡
文献传递
Lipofectamine^(TM)2000转染Neuro-2a细胞实验条件的优化被引量：2
2013年
目的优化LipofectamineTM2000介导外源基因转染Neuro-2a(N-2a)细胞的条件,以提高转染效率。方法将携带增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的真核表达载体pEGFP-N1在LipofectamineTM2000介导下转染N-2a细胞,对转染时间、细胞融合度、质粒质量与脂质体体积比例及培养基pH值进行优化,荧光显微镜观察EGFP的表达,并计算转染效率。结果在细胞融合度达80%,质粒质量与脂质体体积比为1∶3的条件下转染48 h,EGFP的阳性率最高(P<0.05);培养基pH值为8.0左右时,EGFP的阳性率较高,且细胞凋亡率较低。结论优化了LipofectamineTM2000转染N-2a细胞的条件,提高了转染效率,为外源基因高效转染N-2a细胞奠定了基础。
张锐虎荣曼刘田福
关键词：脂质体转染绿色荧光蛋白
PDGF-GAL真核表达载体的构建及细胞表达
2013年
旨在构建真核表达载体pcDNA-PDGF-GAL,观察重组质粒转染N-2a细胞后甘丙肽基因(galanin,GAL)的表达水平。采用PCR方法,以重组质粒pUC18-PDGF-GAL为模板,扩增PDGF-GAL基因序列,最终定向克隆入载体pcDNA3.1并替换该载体的CMV启动子与增强子序列,从而构建具有神经细胞特异性的表达载体pcDNA-PDGF-GAL。然后利用脂质体法将重组质粒瞬时转染小鼠N-2a细胞,分别在转染后24、48和72 h收集细胞及细胞培养物,采用RT-PCR和ELISA方法,鉴定GAL基因在神经细胞中的过表达。结果显示,经PCR和DNA序列测定证实,目的基因已插入表达载体,RT-PCR和ELISA证明,脂质体法瞬时转染N-2a细胞实现GAL基因的过表达。成功构建pcDNA3.1-PDGF-GAL,实现GAL基因在N-2a细胞过表达,从而为制作过表达GAL的稳转细胞及进一步研究GAL在神经系统的生物学功能奠定基础。
荣曼张锐虎刘田福
关键词：GAL转染
稳定表达小鼠甘丙肽的N-2a细胞株的建立及内源性过表达甘丙肽对N-2a细胞增殖和凋亡的影响
2013年
目的建立稳定表达小鼠甘丙肽(GAL)的N-2a细胞株GAL-N-2a,探讨内源性过表达的甘丙肽对N-2a细胞增殖和凋亡的影响。方法脂质体法将重组载体PcDNA 3.1-PDGF-GAL转染N-2a细胞,通过G418筛选获得稳定过表达GAL的细胞克隆,利用PCR、反转录PCR和Western blot法检测细胞中GAL在N-2a细胞的过表达,通过MTT法检测N-2a细胞的增殖,借助流式细胞仪分别对过表达GAL的单克隆细胞进行细胞周期和细胞凋亡的检测。结果稳定转染N-2a细胞即GAL-N-2a实现GAL基因的高表达,MTT法绘制细胞生长曲线实验显示转染重组质粒PcDNA 3.1-PDGF-GAL的N-2a细胞增殖速度显著低于对照组(P<0.05),相比对照组未转染正常细胞,内源性过表达的GAL能使N-2a细胞周期阻滞在G0/G1期而且对N-2a细胞凋亡有明显的促进作用。结论真核表达载体PcDNA 3.1-PDGF-GAL在转染N-2a细胞中可高表达GAL蛋白,并对N-2a细胞的增殖和凋亡均有影响,为进一步研究GAL的生物学作用奠定了基础。
荣曼张锐虎刘田福
关键词：甘丙肽细胞增殖
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