王帅彪
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:南京农业大学更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪嗜血支原体的猪体感染试验和小鼠感染试验研究
- 猪嗜血支原体病即猪附红细胞体病(PorcineEperythrozoonosis,PE)是由猪嗜血支原体(Mycoplasma.suis,M.suis)寄生于红细胞导致的一种热性、急性、溶血性黄疸贫血人兽共患传染病。慢性...
- 王帅彪
- 关键词:细胞因子实时荧光定量PCR动物模型
- 猪乳转铁蛋白N端活性区的表达和多克隆抗体的制备
- 2012年
- 在采用亲和层析技术筛选猪嗜血霉形体表面黏附蛋白MSG1相关受体的过程中,发现猪乳转铁蛋白(LTF)可能是MSG1蛋白的潜在受体。为了对其受体功能进行确认,对截短的猪乳转铁蛋白进行了原核表达和多克隆抗体的制备。首先,以人工合成的猪乳转铁蛋白全基因为模板,通过PCR扩增猪乳转铁蛋白基因N端762个碱基后连接入pET-32a(+)载体中。其次,将重组质粒导入大肠杆菌BL-21感受态细胞中用IPTG进行蛋白诱导表达,对表达的重组蛋白用His单抗进行特异性鉴定,并对鉴定后的蛋白应用包涵体洗液进行纯化。最后,以纯化的蛋白通过背部多点皮内注射免疫小鼠和家兔制备多克隆抗体。结果,重组蛋白的分子质量在44ku左右,能够与His单抗发生特异性反应。Western-blot反应证明,制备的鼠和家兔多克隆抗体具有高度的特异性。猪乳转铁蛋白鼠和家兔多抗的制备为猪乳转铁蛋白受体功能的确认和激光共聚焦对其定位提供了技术储备。
- 马培培李玉峰常晨王帅彪王晓晔
- 关键词:重组蛋白多克隆抗体
- 猪嗜血支原体猪体感染试验被引量:5
- 2013年
- 为研究猪嗜血支原体致病机制,将其感染健康猪和切脾猪,从临床症状、血液学和生物化学指标、菌血症、抗体水平以及细胞因子、病理剖检和组织学检查等方面系统研究猪嗜血支原体病的发病过程。结果显示,与不切脾猪相比,切脾猪体内的猪嗜血支原体含量(血液中含量1.0×108拷贝·mL-1)更高,维持时间更长。猪嗜血支原体血液中含量和白细胞计数、血细胞比容、红细胞计数和铁等指标显著相关。仅1头猪产生猪嗜血支原体抗体,3组猪血清中均没有检测到细胞因子IL-4和IFN-γ。本研究复制出猪嗜血支原体病病例,记录了该病的发展过程,为该病的病理机制、预防、诊断等方面的研究奠定基础。
- 王帅彪李玉峰常晨程王琨马培培邹垚
- 关键词:致病机制