王业东
- 作品数:61 被引量:410H指数:12
- 供职机构:解放军第302医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 非病毒载体基因复合物经胆道分支导入活体肝脏局部表达的实验研究被引量:1
- 2008年
- 目的经胆道分支逆行导入非病毒载体基因复合物,观察目的基因在正常及急性损害大鼠局部肝脏的定量定位表达。方法运用D-氨基半乳糖制作大鼠急性肝损害模型;非病毒载体基因复合物polylysine-molossin/DNA/fusogenic经胆管分支分别将包含萤火虫荧光素基因质粒pGL3及包含大肠埃希氏菌β半乳糖苷酶基因质粒CMVβ逆行导人大鼠局部肝脏,定量检测荧光素酶和定位检测β半乳糖苷酶在肝脏的表达。结果荧光素酶基因在正常大鼠肝脏极少表达,在急性肝脏损害恢复期(造模后第4—7天)表达水平显著增加(P〈0.05),在造模后第9天表达水平与正常组无显著差别。大肠埃希氏菌β半乳糖苷酶定位检测见急性肝损害大鼠肝脏内显著表达,正常大鼠肝脏几乎无表达,其中可见较多肝细胞表达。基因导入可引起血清ALT、AST水平升高,血清白蛋白水平略下降,但基因表达与肝功能酶生化指标水平及变化无明显相关。组织学改变不显著。结论非病毒载体基因复合物导入急性损害肝脏局部能获得较好表达,且无明显加重肝脏损害,该项方法为肝脏基因治疗的实验研究提供了良好的技术平台。
- 胡瑾华许彪何卫平王业东杜宁王慧芬
- 关键词:基因疗法
- 严重急性呼吸综合征患者血清铁改变与临床意义初探被引量:2
- 2003年
- 目的 探讨血清铁在严重急性呼吸综合征 (SARS)患者血清中的改变及临床意义。方法 用铁络合方法检测 6 0例发病早期 (1~ 7d)、2 5例发病 1周后SARS患者以及 19例排除SARS病人血清铁 (Fe)水平 ,同时与白细胞 (WBC)和淋巴细胞绝对值(LYM)比较。结果 确诊SARS病人 ,在发病 1周内有 72 %患者Fe明显低于排除SARS组、正常对照组及肝病组 ,t检验有显著性差异。以 7.2 μmol/L为临界值时 ,诊断敏感性为 6 7.4 %、诊断特异性为 6 9.2 % ,阳性预示值为 91.9%。发病 1周后大多数SARS患者Fe水平恢复正常。Fe水平、LYM水平在SARS患者发病早期即下降 ,当以其正常参考范围低限为界值时 ,敏感性分别为 72 %和 75 %。WBC在SARS患者发病早期大多数都在正常参考范围。三项指标的改变无相关性。结论 Fe和LYM分别低于 7.2 μmol/L和 1.5× 10 9/L 。
- 毛远丽王业东孙志强李永利陈小倩刘志国刘佳杨静洪炜郭静霞
- 关键词:严重急性呼吸综合征SARS血清铁
- 纤维连接蛋白降解片段(MAD2)单抗的制备及肝细胞癌患者血浆含量检测
- 2001年
- 应用杂交瘤技术制备了纤维连接蛋白 (FN)降解片段MAD2的单克隆抗体 (McAb) ;建立了MAD2检测的双抗体夹心ELISA法 ;对 2 2 7例肝细胞癌 (HCC)、76例肝转移癌 (HMC)、98例消化道癌 (ACC)、15 6例慢性肝病 (CLD)患者和 48例健康人体血浆MAD2含量进行测定。结果显示 ,制备的MAD2McAb属IgG1,与FN无交叉反应 ;HCC组血浆MAD2含量均值与CLD组、HMC组、ACC组和正常对照组比较差异有显著性意义 (分别P <0 0 1) ,以HCC患者的最低MAD2值作临界值时 ,仅 13 5 %CLD、6 6 %HMC和 4 1%ACC超过此值 ,而健康人体血浆MAD2含量均低于临界值 ;6 5例血清AFP正常的HCC患者其血浆平均MAD2值仍明显高于非HCC肿瘤、CLD患者和正常对照。结合以前的结果 ,进一步表明 ,血浆MAD2检测可作为HCC诊断的新标志物 ,并可与AFP相互补充 ;MAD2 McAb的制备使MAD2的检测变得易行。
- 赵景民杨守纯王业东王松山辛绍杰董时军王凝芳刘平
- 关键词:肝细胞肿瘤纤维连接蛋白单克隆抗体MAD2
- 肝脏疾病基因治疗中非病毒性载体的研究进展
- 2007年
- 许彪王业东胡瑾华
- 关键词:肝脏疾病基因治疗自身免疫性肝病病毒性肝炎代谢性肝病基因特异性
- DNA序列测定法与实时荧光PCR法检测YMDD突变结果的比较被引量:5
- 2008年
- 目的比较DNA序列测定法与实时荧光法检测YMDD突变的结果,并对除YMDD突变之外的耐药相关基因突变及其意义进行讨论。方法收集89例慢性乙肝患者的92份血清样本,均用实时荧光PCR法做YMDD突变检测。采用巢式PCR法扩增HBV反转录酶(RT)基因,对PCR产物进行DNA双向测序,采用NTI软件比对结果,并对RT基因上其他11个已知耐药相关突变位点进行分析。结果在37份YMDD突变阴性的样本中,DNA测序法检测结果为33份M204M(未突变)、1份M204I、3份M204V;4份YMDD突变阳性样本均为突变/未突变序列共存;另检出7份样本存在ADV耐药相关突变,占18.9%(7/37)。在55份YMDD突变阳性样本中,DNA测序法检测到52份,阳性结果符合率为94.5%(52/55);另检出5例存在ADV或ETV耐药相关突变,占9.1%(5/55)。结论DNA序列测定法检测HBVRT基因耐药相关突变敏感性高,重复性好,与实时荧光PCR方法的检测结果有较高的符合率,可同时检出YMDD突变以外的各种耐药相关突变,有助于临床全面了解患者对核苷(酸)类似物的耐药情况,合理地制订抗HBV治疗方案。
- 许彪徐东平成军李晓东毛远丽王海滨马洪滨胡瑾华王业东
- 关键词:YMDD突变
- 乙型肝炎病毒前S_2蛋白与HBV血清学标志关系的研究被引量:8
- 1990年
- 近年来,对乙型肝炎病毒(HBV)基因上前S_2区及其所编码的蛋白(前S_2蛋白)的研究已成为HBV的新课题。认为它与HBV的感染和复制有密切关系。为进一步分析前S_2蛋白与HBV血清学标志的关系,我们采用酶联法检测了83例(166例次)各型乙型肝炎活动期和恢复期血清前S_2蛋白水平,同时与血清HBsAg、HBeAg、PHSA、HBV-DNA及ALT进行了比较,现将实验结果报告如下。
- 葛安平王业东朱传琳张玲霞尤大栋
- 关键词:乙肝病毒前S2蛋白血清学标志
- 大鼠FasL全长cDNA真核质粒的构建及转染HepG2细胞体外诱导细胞凋亡的作用被引量:1
- 2011年
- 目的观察HepG2细胞过表达FasL介导细胞凋亡的作用。方法从大鼠睾丸细胞中扩增出rFasL全长cDNA,亚克隆到T载体中,再克隆到pDC315载体中。转染HepG2细胞后用RT-PCR、Wester blot检测rFasL mRNA和蛋白表达,培养48h后收集细胞计数,进行比较分析。结果 rFasL cDNA序列与其在Genbank中的序列完全一致。rFasL真核表达载体转染HepG2细胞后能表达rFasL mRNA和蛋白;转染pDC315-rFasL的实验组HepG2细胞大量死亡。结论成功克隆了rFasL基因并构建其真核表达载体,证明能有效表达于HepG2中,表达FasL的HepG2细胞通过Fas-FasL结合介导周围及自身表达Fas的HepG2细胞凋亡。
- 许彪胡瑾华徐东平李晓东刘妍陈婧王业东王慧芬
- 关键词:克隆细胞
- 传染病医院血清标本库系统建设被引量:2
- 2012年
- 血清标本库是组织库的一种,血清样本是十分重要的临床病例原始资料,对病例回访追踪、科研教学都是重要的资源,尤其是对传染病医院来说,在确认疫情性质、追踪传染病的来源、明确潜在的传染源、为感染者寻找有效的治疗措施等方面发挥着重要的作用,很多新发突发传染病的血清标本本身就是极其重要的第一手临床资料,因此,建设、完善和管理专业的血清标本库对医院甚至对国家来说都是具有战略意义的。我们根据我院自身情况,基于网络数据技术在原有血清库的基础上自行开发研制了血清标本库系统,包括外部浏览使用和内部管理两大部分,在冰箱管理、数据同步、外部浏览方面较前做了很大改进,可以快捷地管理、查询、取用血清标本,本文就其设计、使用及特点等方面做简单介绍。
- 许文涛山丽梅郭晓东王业东赵守住李庆虹
- 关键词:血清标本库数据同步
- cDNA文库噬菌体展示法的建立及乙型肝炎病毒前S1蛋白结合蛋白筛检被引量:35
- 2002年
- 为寻找乙型肝炎病毒 (HBV)前S1蛋白的结合蛋白 ,将前S1蛋白包被于聚苯乙烯平板 ,经过“包被 吸附 洗脱”筛检过程 ,获得前S1蛋白结合蛋白的cDNA序列 ,并将推断的氨基酸序列进行相互比较 ,经生物信息学方法获得结合蛋白的全长序列。共经过 4轮生物淘洗过程。结果提示 ,神经胶质瘤抑制子候选基因区基因 (GLTSCR) 2上游部分序列存在于与HBV前S1结合的重组T7噬菌体中 ,多个克隆的测序结果发现前S1蛋白结合蛋白具有KxPxKSGxxxL结构域。HBV前S1蛋白的结合蛋白可能是GLTSCR 2的编码产物。
- 董菁施双双王业东皇甫竞坤李莉张玲霞成军
- 关键词:CDNA文库乙型肝炎病毒筛检
- 一种治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的中药组合物在制备治疗传染性非典型性肺炎(SA RS)肺纤维化的药物中的应用
- 一种治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的中药组合物在制备治疗肺纤维化,特别是由传染性非典型性肺炎(SARS)所致的肺纤维化药物中的应用,其中所述的中药组合物是以下列原料按照常规方法制成的:鳖甲110-130份、赤芍80-90份、当...
- 陈菊梅韩晋丁晋彪王业东刘西秦
- 文献传递