满贤
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 人类新基因WDR24的研究初报
- 2009年
- WD40家族是一类结构保守、功能复杂的蛋白。目前很多研究显示该家族成员通过参与MAPK信号途径调控细胞内信号转导而影响细胞的基本生命活动。为了鉴定参与细胞生命活动的新基因,运用同源基因克隆法,通过PCR技术扩增获得一个新的人类基因WDR24,其cDNA全长3 302 bp,2 373 bp长的开放阅读框编码由790个氨基酸残基组成的蛋白质。生物信息学分析表明,WDR24蛋白在进化上高度保守,与其他脊椎动物中的同源蛋白组成了一个功能未知的亚家族。蛋白序列分析显示其中有6个WD40重复序列和1个ERK的停泊位点D-domain。RT-PCR分析表明,该基因在所有被检测的人类胚胎组织中表达。
- 周云雷满贤龚琳吴秀山李永青
- 关键词：基因克隆RT-PCR
- 斑马鱼Lefty1特异性多克隆抗体的制备被引量：7
- 2010年
- Lefty蛋白是TGFβ大家族的配体,通过与Nodal以及Nodal的受体结合而抑制Nodal信号转导。本文采用PCR技术扩增出斑马鱼lefty1基因(z-lefty1)的部分编码区,将其插入到pGEX-4T-1原核表达载体中。所构建的重组质粒(pGEX/z-Lefty1)转化入BL21大肠杆菌,通过IPTG诱导表达GST-z-Lefty1融合蛋白。蛋白经尿素洗涤分离后用于免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗体。Western blotting检测结果表明获得了高效价的特异性兔抗z-Lefty1多克隆抗体。这为进一步研究斑马鱼心脏发育的分子机制创造了条件。
- 满贤龚琳王跃群李帆刘华友莫小阳邓云万永奇吴秀山李永青
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 三个斑马鱼心脏发育基因和果蝇基因CG8419多克隆抗体的制备及表达研究
- 心脏发育是一个复杂的过程,受一系列心脏发育基因在时间和空间上的精确调控。这些基因的突变或异常表达都会导致早期胚胎死亡或者各种心脏病。鉴定在心脏发育过程中起调控作用的基因和分子途径,将促进人们从分子水平认识心脏发育和先天性...
- 满贤
- 关键词：多克隆抗体斑马鱼果蝇心脏发育蛋白表达
- 文献传递
- 斑马鱼心脏标记基因VMHC多抗血清的制备被引量：2
- 2011年
- 斑马鱼基因VMHC(Ventricular myosin heavy chain)是心脏发育早期的标志基因,制备该基因多抗血清,首先通过生物信息学方法,选择VMHC基因中特异性强、具亲水性的一段核苷酸序列(3 772～4 221 bp),通过PCR扩增,将片段重组到原核表达载体pGEX-4T-1,通过原核诱导表达获得含有表达目的片段的融合蛋白,以该融合蛋白免疫小鼠,获得VMHC多克隆抗鼠血清.对该多抗血清抗体进行验证,结果具有很好特异性和较高效价,可以用作western-blot、免疫印迹等试验分析.
- 王琨满贤刘华友李志李发祥赵阳廖四芳吴秀山袁婺洲
- 关键词：标记基因融合蛋白
