李壮林
- 作品数：2 被引量：31H指数：1
- 供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 相关领域：化学工程医药卫生更多>>
- 重组人血管内皮抑制素(rh-Endostatin)大肠杆菌表达体系发酵条件的优化被引量：30
- 2005年
- 优化了重组人血管内皮抑制素的E.coli表达体系的发酵条件。利用E.coli表达体系得到了较高的产量,在9h左右的发酵周期内达到OD600值140,包涵体蛋白产量为3g/L。主要优化了异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)的终浓度、诱导时间、培养温度、补料控制方法等条件,并且在诱导后提高培养温度到40℃,在非常短的培养周期内达到了高密度培养的目的。利用E.coli表达,继而通过复性获得有活性的重组人血管内皮抑制素,成本低、生产过程稳定可控、得到的蛋白性质稳定,符合工业生产的需要。
- 常国栋李壮林秦加阳马翠卿罗永章许平
- 关键词：重组人血管内皮抑制素大肠杆菌肿瘤
- 人TNF-α突变体Y87H/A145R的表达及纯化被引量：1
- 2011年
- 用大肠杆菌表达人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的突变体Y87H/A145R,并研究其生物学特性。在5 L发酵罐中培养大肠杆菌工程菌,当菌体密度(D600)增长到35时,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目标蛋白表达,包涵体蛋白的最终表达水平为2.5 g/L。用High Q Micro-prep凝胶柱纯化包涵体蛋白,然后通过透析复性,蛋白纯度大于99%。用分子排阻色谱分析Y87H/A145R的分子特征。结果表明,Y87H/A145R与TNF-α一样,以三聚体形式存在。而且,Y87H/A145R能明显抑制TNF-α诱导的L929细胞凋亡。小鼠试验表明,突变体Y87H/A145R不但失去了TNF-α的细胞毒性,并且能有效抑制TNF-α引起的急性肝坏死。
- 李壮林姚雪静于学珍
- 关键词：人肿瘤坏死因子-Α突变体纯化包涵体
