李坤
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人可溶性CD83基因的克隆、原核表达和纯化
- 2008年
- 目的:构建人可溶性CD83基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达和纯化.方法:利用反转录PCR方法从正常人外周血单个核细胞中获得可溶性CD83基因,克隆到表达载体pET-32a载体,构成重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达6×His融合蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot检测和鉴定.表达产物包涵体经Ni-NTA亲和层析纯化.结果:经酶切鉴定及测序证实可溶性CD83蛋白基因的原核表达载体构建正确.经SDS-PAGE及Western blot显示在Mr约32000处出现融合表达条带.融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的45%.重组蛋白经Ni-NTA亲和层析进行纯化后,得到了高纯度的融合蛋白.结论:成功克隆人外周血单个核细胞来源的可溶性CD83基因片段,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,亲和层析纯化后获得高纯度融合蛋白.
- 李坤王小霞徐皓余春艳张衍国张惠中
- 关键词：树突状细胞原核表达纯化
- 可溶性CD83对树突状细胞体外诱导T细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的:评价可溶性CD83(soluble CD83,sCD83)对树突状细胞(DC)体外诱导的T细胞增殖的影响。方法:采用MTT法检测DC细胞体外诱导的T细胞增殖。结果:与对照组相比,sCD83明显抑制银屑病患者DC细胞体外诱导的T细胞增殖,且与浓度呈正相关。结论:sCD83可望成为治疗银屑病的免疫抑制生物制剂。
- 张衍国王小霞李坤王欢徐皓
- 关键词：免疫抑制银屑病
- 人可溶性CD83基因的克隆、原核表达和纯化
- 目的:构建人可溶性CD83基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达和纯化。方法:利用反转录PCR(RT-PCR)方法从正常人外周血单个核细胞中获得可溶性CD83基因,克隆到表达载体pET-32a载体,构成重组质粒,转化大肠杆...
- 李坤王小霞徐皓余春艳张衍国张惠中
- 文献传递
