曹雪梅 作品数:4 被引量:4 H指数:1 供职机构: 遵义医学院珠海校区 更多>> 发文基金: 贵州省科技计划项目 贵州省优秀科技教育人才省长资金项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
重组hIL-31抗体制备及其拮抗皮肤炎症的研究 2011年 目的:高效表达重组hIL-31制备IL-31抗体,探讨IL-31抗体拮抗皮肤炎症的作用,为研发IL-31抗体治疗性新药奠定基础。方法:①培养工程菌、IPTG诱导、菌体、超声破碎,用镍NTA柱纯化重组蛋白。②重组hIL-31蛋白溶液加佐剂免疫家兔,制备兔抗IL-31多克隆抗体。③将IL-31抗体分为3个剂量,经皮下注射和皮肤直接涂抹的途径,对已经致皮肤炎症的BALB/c小鼠治疗7d,治疗后3d取治疗部位皮肤作石蜡切片进行HE染色观察组织学变化,并检测血清中IL-6、IL-8、L选择素和MIP-3β等细胞因子的变化。结果:①SDS-PAGE电泳证实获得了高纯度的纯化人IL-31蛋白。②用重组hIL-31蛋白疫苗免疫家兔,在免疫后4周抗体滴度达到高峰,经ELISA法测血清抗体滴度为1∶15000~1∶20000,双扩滴度为1∶16。Western blot结果重组IL-31蛋白能与抗IL-31抗体特异性结合。③小鼠皮肤组织切片HE染色显示,治疗组皮下和皮内均有炎症细胞浸润,呈现剂量依赖性趋势。④血清中炎性因子ELISA检测,涂抹组和注射组小鼠血清中IL-6、IL-8、MIP-3β均明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论:①获得稳定表达的重组人IL-31蛋白,以此作为免疫原免疫家兔,诱导分泌高滴度的IL-31抗体。②IL-31抗体使皮肤炎症中炎性细胞减少,血清中炎症相关细胞因子明显降低。 魏培 孙万邦 黄俊琼 曹雪梅 罗军敏 郑静 王胜香 宋明英关键词:IL-31 抗体 拮抗 皮肤炎症 重组人IL-31的原核表达、纯化及其皮肤炎症相关性研究 目的:探索人IL-31在原核细胞中的表达、纯化和复性的方法,研究人IL-31与皮肤炎症的相关性。
方法:(1)将含有表达质粒pET-32a/rhlL-31和pET-28a/rhlL-31的重组菌Ecli.BL2... 曹雪梅关键词:皮肤炎症 淋巴细胞 细胞增殖 原核细胞 原核表达 文献传递 重组人白细胞介素-31表达条件的优化 被引量:1 2008年 目的优化重组人白细胞介素-31(rhIL-31)的表达条件。方法以不同浓度IPTG、不同诱导时间、不同诱导温度对含有pET32a/rhIL-31的工程菌E.coliBL21(DE3)进行诱导表达,用SDS-PAGE对表达产物进行分析。结果诱导时间为5h,IPTG浓度为1.5mmol/L,诱导温度为37℃时,rhIL-31的表达量最高。结论已初步优化了重组蛋白rhIL-31的表达条件。 余妍 孙万邦 黄俊琼 曹雪梅 郑静 魏培关键词:重组蛋白 IL-31与特应性皮炎的相关性研究进展 被引量:3 2009年 白细胞介素31(interleukin31,IL-31)是一种新近发现的细胞因子,属于IL-6家族,主要表达于激活的Th2细胞,其功能受体为IL-31受体与制瘤素M受体(oncostatin M receptor,OSMR)结合组成的异源二聚体复合物。研究发现,过度表达IL-31的转基因小鼠都会出现严重的瘙痒、脱毛以及皮肤炎性细胞浸润,类似于人类特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)患者的病理学、血清学改变;同时还发现,IL-31与特应性皮炎患者的表皮淋巴细胞抗原阳性(CLA+)皮肤归巢T细胞有关, 郑静 曹雪梅 孙万邦关键词:特应性皮炎 DERMATITIS RECEPTOR 炎性细胞浸润 TH2细胞