徐红先
- 作品数：10 被引量：41H指数：3
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- 一种新的BRCA1等位基因
- 2005年
- 目的 对乳腺癌易感基因- 1(BRCA 1) m RNA进行全长序列分析。方法 采用逆转录PCR(RT-PCR)技术和c DNA测序,分析3名个体的BRCA1基因m RNA全长序列,3名个体中,2名为乳腺癌患者,另一名为健康献血者。结果 健康献血者的BRCA1基因m RNA序列与以往报道的正常m RNA序列(U 14 6 80 )完全一致;1名患者的BRCA 1m RNA序列在第11外显子发现5处碱基突变外:2 2 0 1C>T,2 4 30 T>C,2 731C>T,32 32 A>G和36 6 7A>G,在第13和第15外显子各有一处碱基变异:4 4 2 7T>C和4 95 6 A>G;另一名患者则在上述碱基变异位点均表现为正常BRCA1基因和突变等位基因的杂合性。结论 结果表明通过BRCA 1基因m RNA序列分析,发现一新的等位基因,该基因与正常BRCA1编码区序列存在7处碱基差异,新等位基因已由EMBL /Gen Bank/DDBJ收录,注册号为AY75 14 90。
- 徐红先周冬仙熊文邵超鹏
- 关键词：BRCA1基因MRNA等位基因逆转录PCR
- 1例新的弱D型的鉴定被引量：12
- 2012年
- 目的分析1例新的Rh血型弱D型个体的RHD等位基因及其红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,并分析D抗原表位;序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,然后分析RHD编码区全长序列,并检测RHD杂合型。结果血清学显示该个例为D抗原弱表现型,Rh因子为D+C+c+E-e+,PCR-SSP检测RHD基因显示与正常Rh(D)阳性对照相同。RHD编码区序列分析发现第9外显子存在1 212C>A碱基突变,其余外显子序列则与正常RHD基因一致(GenBank EF103573),RHD合子型鉴定为RHD+/RHD-杂合型,提示该个体基因型为CDe/cde。红细胞D抗原表位分析显示其具有基本完整D抗原表位。结论该个例为RHD1 212C>A碱基突变形成弱D72型。
- 吴筱莹庄乃保徐红先何颖军邵超鹏
- 关键词：RH血型D抗原RHD基因碱基突变基因型弱D型
- PCR-SSP技术检测乳腺癌易感基因
- 2005年
- [目的]建立简易的PCR方法检测BRCA1及其等位基因。[方法]根据BRCA1基因(EMBL/GenBank/DDBJU14680)和在中国人乳腺癌患者中高频存在的BRCA1-2201T2430C2731T3232G3667G等位基因(AY304547)序列,设计二对特异性引物,分别针对正常BRCA1和上述等位基因,同时引入一对内对照引物,建立简易的序列特异性引物-PCR技术(PCR-SSP),并用于检测30份已知BRCA1序列的乳腺癌患者DNA样本,以及67名未知的健康女性捐血者样本。[结果]30份已知的患者DNA样本的PCR-SSP检测结果与样本的序列完全相符。67名健康女性检测结果显示6名个体(9.0%)为等位基因纯合体,32人(47.8%)携带正常BRCA1,其余29名个体(43.3%)为杂合体。[结论]PCR-SSP方法能特异性检测BRCA1基因和BRCA1-2201T2430C2731T3232G3667G等位基因,可作为检测该等位基因以及判断个体在这一突变热点位点是否发生变异的简易手段。
- 周冬仙徐红先熊文邵超鹏
- 关键词：BRCA1等位基因
- SLE患者外周血γδT细胞系的建立及表型和功能的研究被引量：1
- 2006年
- 目的:建立体外扩增系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血γδT细胞的方法,并初步分析其表型和功能,探索γδT细胞在SLE发病中的作用。方法:采用单克隆抗体固相法,对15例SLE患者和8例正常人外周血γδT细胞进行体外扩增建系,以流式细胞仪检测γδT细胞表型,并用MTT法观察γδT细胞对Daud i细胞的细胞毒作用。结果:建立了SLE患者外周血γδT细胞系,其平均纯度为(58.1±11.2)%,较正常对照组(80.3±9.2)%偏低(P<0.05);其细胞表型为:Vδ1(34.4±24.5)%、Vδ2(61.9±28.6)%、Vδ3(16.1±10.6)%、Vγ9(76.4±11.8)%,其中Vδ2表达较对照组降低,而Vδ1和Vδ3表达增加(P均<0.05);其细胞毒作用在二组间无明显差别。结论:SLE患者外周血γδT细胞的Vδ、Vγ基因的取用表达存在差异,提示其在SLE的发病中可能起一定作用。
- 孙保东徐红先肖学吕李富荣谭艳红冯小欣刘冬舟洪小平蔡文虹
- 关键词：系统性红斑狼疮ΓΔT细胞细胞毒作用
- RHD mRNA替代剪接区域研究被引量：1
- 2012年
- 目的2007年国内报道一例弱D型个体存在第4—9外显子选择性剪接的转录子，我们探讨正常Rh（D）阳性个体的RHD基因mRNA的选择性剪接区域。方法随机选择3名Rh（D）阳性个体，从新鲜全血中提取总RNA，通过特异性引物，采用“一步法”逆转录-PCR（1iT—PCR），扩增RHDmRNA第1～7外显子区域，以及第6-10外显子区域，然后cDNA琼脂糖凝胶电泳和成像分析。结果未发现第1～7外显子区域存在mRNA的选择性剪接条带，仅存在由特异性引物所扩增的第1—7外显子全长的序列条带；而第6～10外显子区域观察到5种替代剪切条带，序列分析显示分别为无缺失片段，以及完整缺失第7、第9、第7和9、第7—9外显子5种RHD转录子。结论正常Rh（D）抗原阳性个体的RHD基因mRNA的选择性剪接仅存在于第7～9外显子区域。
- 徐红先何颖军吴筱莹庄轶轩邹昕邵超鹏
- 关键词：RHD基因MRNA选择性剪接
- BRCA1基因全长mRNA序列分析技术
- 2005年
- 目的:建立BRCA1基因全长mRNA序列测定方法。方法:根据文献和GenBank(U14680)报道的BRCA1基本序列设计6对特异性引物,建立6个特异性逆转录PCR(RT-PCR)技术,分段且扩增BRCA1全长mRNA,然后采用毛细管电泳进行cDNA测序,方法建立后用于3名健康女性样本。结果:6个特异性RT-PCR反应扩增片段相互覆盖,使序列分析结果包括全长BRCA1mRNA,共5000多bp。3名经PCR技术检测确定携带正常BRCA1基因的样本的mRNA分析结果显示,其BRCA1mRNA序列均与过往报道的正常mRNA序列完全一致。结论:所建立的RT-PCR特异性结合BRCA1基因,能用于其mRNA全长序列分析。
- 徐红先周冬仙熊文邵超鹏
- 关键词：BRCA1基因RNA序列MRNAPCR反应健康女性
- 乳腺癌患者高频BRCA1等位基因研究被引量：3
- 2005年
- 目的观察乳腺癌患者BRCA1基因变异。方法测序分析35例乳腺癌患者和10名正常女性BRCA1基因的全长第11外显子共3427bp,然后与GeneBank记录的BRCA1正常序列比较。结果35名患者中11名(31.4%)存在2处同义突变:2201C>T、2430T>C,和3处误义突变:2731C>T、3232A>G、3667A>G(EMBL/GeneBank/DDBJ基因记录号AY304547),分别造成第871、1038和1183位氨基酸发生替换(蛋白质记录号AAP70031);10例患者和6名正常个体的基因序列与正常BRCA1基因完全相同;另14名患者以及4名健康个体为上述突变基因与正常基因的杂合体:2201、2430和2731位为碱基C/T杂合,3232和3667位A/G杂合。结论乳腺癌患者突变等位基因纯合体的比率明显高于正常人,提示该等位基因纯合体可能与中国人乳腺癌发病存在关联。
- 周冬仙徐红先熊文邵超鹏
- 关键词：乳腺癌患者基因研究BRCA1基因高频正常女性纯合体
- 抗核小体抗体、免疫球蛋白及补体与系统性红斑狼疮活动性的相关性研究被引量：11
- 2005年
- 目的:分析抗核小体抗体(AnuA)在系统性红斑狼疮(SLE)检测中的敏感性,并且探讨AnuA、免疫球蛋白及补体与系统性红斑狼疮活动性的关系。方法:速率散射免疫比浊法检测免疫球蛋白及补体;酶联免疫吸附法检测抗核小体抗体、抗dsDNA抗体,同时用免疫印迹法检测SLE病人血清抗Sm抗体。结果:SLE患者血清AnuA阳性率是59%,其与对照组血清中AnuA阳性率差别具有高度显著性(P<0.001);66例SLE患者血清AnuA与免疫球蛋白IgG、IgM和IgA存在明显相关性,(P<0.01和P<0.05),与补体C3呈明显负相关,P<0.01,但与补体C4无相关性。结论:检测抗核小体抗体较检测抗dsDNA抗体和抗Sm抗体更敏感,对SLE的诊断具有重要意义。
- 徐红先罗贵有何林岳化葵
- 关键词：抗核小体抗体免疫球蛋白补体活动性
- RHD1227A型弱D的D抗原表位分析被引量：3
- 2011年
- 目的分析携带RHD1227A等位基因的Rh血型弱D型个体的红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,并检测RHD杂合型。对确认的弱D型,使用12种抗-D抗原不同表位的单克隆抗体,分析红细胞D抗原表位。结果血清学筛选和PCR-SSP检测鉴定出3例携带RHD1227A等位基因的弱D型样本,Rh小因子均为C+c+E-e+,RHD合子型鉴定均为RHD+/RHD-杂合型,提示3例个体基因型为CDe/cde。3例个体红细胞D抗原表位分析显示均具有基本完整D抗原表位,与Rh(D)阳性对照样本相同。结论发现3例RHD1227A型弱D型;不管RHD1227A等位基因表达DEL型或弱D型,其D抗原表位近似,均表达基本完整D抗原,提示该等位基因不同量的表达可能与其它调节因素有关。
- 吴筱莹何颖军徐红先邵超鹏
- 关键词：RH血型D抗原RHD基因弱D型
- Rh阳性个体RHD杂合性分析被引量：11
- 2011年
- 目的分析中国汉族Rh（D）阳性个体的RHD杂合性，讨论Rh阴性妇女产前Rh同种免疫预防策略。方法血清学检测31115名汉族捐血者的Rh（D）表型，分析Rh（D）阳性个体的RHD杂合率；对其中3628名随机Rh阳性个体采用PCR方法直接测定RHD合子型，计算杂合率与前者比较。结果31 115名捐血者中采用间接抗人球蛋白试验（indirect antiglobulin test，IAT）确认99名个体为Rh（D）阴性（0．318％），d基因频率0．05641，D基因频率0．94359，Dd杂合型0．10645（10．6％），考虑IAT检测D放散型为Rh（D）阴性，计算后实际Dd杂合型为0．09032（约9．0％）；PCR测定3628名Rh阳性个体RHD合子型测定显示DD纯合型3383人（93．2％），Dd杂合体245名（6．8％），由于无效RHD等位基因的PCR结果为阳性（D），重新分析后实际携带1条功能性RHD基因的杂合性个体约7．4％。提示中国汉族Rh（D）阴性妇女当配偶为Rh（D）阳性时，子女Rh（D）阴性的比率约3．7％～4．5％。结论中国新生儿Rh同种免疫预防进行侵入性胎儿Rh（D）血型预测意义不大，或可直接假定新生儿为Rh（D）阳性进行产前检查和同种免疫防护。
- 邵超鹏秦建江孙国栋徐红先马林峰
- 关键词：RH(D)血型RHD基因
