张银辉
- 作品数:59 被引量:238H指数:9
- 供职机构:广东医学院更多>>
- 发文基金:深圳市科技计划项目深圳市福田区卫生系统公益性科研项目广东省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学交通运输工程更多>>
- 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析被引量:7
- 2007年
- [目的]了解本院产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌分布及耐药特点。[方法]采用NCCLS推荐的纸片扩散法对我院从临床标本中分离的107株大肠埃希菌和95株肺炎克雷伯菌进行ESBL的确诊试验,并应用ATB G-5药敏卡对20种抗生素进行药敏试验。[结果]107株大肠埃希菌分离到产ESBLs菌株44株,检出率为41.12%,95株肺炎克雷伯菌分离到产ESBLs菌株35株,检出率为36.84%。ESBLs检出模式以单用头孢噻肟、头孢噻肟/棒酸一组为底物阳性率最高,分别占68.18%和62.85%;单用头孢他定,头孢他定/棒酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.18%和肺炎克雷伯菌62.85%的漏检。产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类的耐药率为55%~100%;但对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率大于77%,对亚胺培南,美洛培南的敏感率均大于91%。[结论]本院分出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs严重,且产ESBLs菌多呈多重耐药。建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况,采用多种底物检测ESBLs。碳青酶烯类应作为治疗产ESBLs菌株的首选药物。
- 黄烈聂署萍张银辉韦洁宏陆学东
- 关键词:大肠埃希菌肺炎克雷伯菌耐药
- 产ESBLs大肠埃希菌基因型分析被引量:5
- 2008年
- 目的分析大肠埃希菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型。方法用表型确定的临床分离产ESBLs的大肠埃希菌47株,分别用TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果PCR扩增结果显示TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2和CTX-M-9的阳性率分别为59.57%、4.26%、17.02%、19.15%和82.98%,CTX-M型总阳性率为93.62%,序列分析证实扩增为目的产物。结论47株ESBLs大肠埃希菌的主要基因型是CTX-M型和TEM型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的63.83%,需引起临床的高度重视。
- 黄烈韦洁宏张银辉林广城王琼陆学东
- 关键词:大肠埃希菌超广谱Β-内酰胺酶基因分型
- 结核分枝杆菌H_(37)Rv株菌体抗原及分泌抗原分析
- 2005年
- 目的对比分析人型结核枝杆菌(结核菌)H37Rv株固体培养菌、液体培养菌及分泌蛋白中抗原成分的差异,寻找结核菌的主要免疫抗原。方法应用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术、免疫印迹技术及单克隆抗体技术分析人型结核菌H37Rv株固体培养、液体培养及其分泌蛋白中的抗原成分。结果固体培养菌与液体培养菌具有基本一致的多肽抗原成分,其主要成分分子量为79000、64000、54000、50000、28000~38000、23000等,而分泌蛋白差异稍大,其主要成分分子量为66000、63000~65000、55000、42000、32000~34000、24000、16000等。单克隆抗体进一步证明66000、55000、16000为分泌蛋白。多克隆抗体免疫印迹分析表明,菌体主要免疫原有79000、54000、38000~50000、28000蛋白成分,而分泌蛋白主要免疫原为分子量66000、55000~64000、30000~34000、24000、16000成分。结论人型结核菌H37Rv株菌体蛋白和分泌蛋白具有不同的主要免疫原,将有助于认识HRv株的总体蛋白组成及寻找与结核病相关的特异性抗原成分。
- 陆学东张银辉张小艳杨来智
- 关键词:抗原免疫印迹法结核分枝杆菌H37RV分泌蛋白
- 梅毒实验室诊断及评价被引量:31
- 2005年
- 陆学东张银辉党倩丽张小艳
- 关键词:梅毒性传播疾病
- 深圳地区轮状病毒分子流行病学研究
- 目的通过对2007~2009年深圳地区5岁以下急性腹泻患儿进行A组轮状病毒(Rotavirus,RV)检测及病毒基因亚型分析,了解RV在深圳地区的分子流行病学特征,为该病原体所致腹泻的防治及RV疫苗的研制和应用提供基础数...
- 王琼张银辉罗小芳黄烈邱羽杨来智陆学东
- 缺血修饰清蛋白对高脂血症患者继发急性冠状动脉综合征的预警作用被引量:5
- 2011年
- 目的探讨缺血修饰清蛋白(IMA)联合血脂指标对高脂血症患者继发急性冠状动脉综合征(ACS)预警作用。方法对109例ACS患者、119例高脂血症患者和104例健康对照者进行血清IMA、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)检测,计算TC/HDL-C、TG/HDL-C、LDL-C/HDL-C、ApoA1/ApoB比值。结果 ACS患者TC/HDL-C、ApoA1/ApoB和IMA水平与健康对照者比较差异有统计学意义(P<0.05)。高脂血症患者IMA水平与健康对照者比较差异无统计学意义(P>0.05),但高脂血症患者随着TC/HDL-C比值升高血清IMA水平也升高。结论对于TC/HDL-C升高的TC、TG均升高的高脂血症患者,若血清IMA水平也升高提示其具有继发ACS的危险性;血清IMA有可能成为评估ACS危险性的指标之一。
- 张银辉萧晓友曾冬梅莫凡张允奇陆学东
- 关键词:高脂血症缺血修饰白蛋白
- 地中海贫血诊断实验的选择在临床的应用价值被引量:16
- 2011年
- 目的探讨地中海贫血不同检测方法的选择及临床诊断应用的价值,针对不同人群建立相对合理的检测程序。方法选择经分子生物学方法确认的215例地中海贫血相关基因携带阳性病例和80例对照组,采用临床常用地中海贫血血液学筛查指标平均红细胞体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)、红细胞压积(HCT)、红细胞体积分布宽度(RDW)及红细胞脆性试验(RBC脆性)进行筛查评价。比较跨跃断裂点PCR(Gap-PCR)技术、膜芯片反向点杂交技术、变性高效液相色技术对地中海贫血确认诊断的应用范围。结果 215例地贫相关基因携带阳性病例组与80例对照组MCV、MCH、HCT及RBC脆性检测数据比对分析表明,地贫组与对照组经统计学分析差异均有统计学意义(P<0.01)。常规筛查指标对215例地贫相关基因携带阳性病例组的漏检分析显示,RBC脆性漏检率为2.33%,MCV漏检率为5.58%,MCH漏检率为6.98%,HCT漏检率为15.81%。分子生物学确认实验中Gap-PCR技术仅适用于α-珠蛋白基因缺失的检测,膜芯片反向点杂交技术可适用于α、β-珠蛋白基因突变位点的检测。结论血液学指标MCV、MCH对地贫筛查敏感性较高,可自动化、大批量操作,适合用于大规模健康体检人群的地贫筛查,而RBC脆性试验虽然敏感性高,但为手工操作,建议用于高危人群的筛查。膜芯片反向点杂交技术结合Gap-PCR技术是目前临床地贫基因确认的最佳手段。
- 张银辉张允奇黄烈曾冬梅萧晓友王琼陆学东
- 关键词:地中海贫血筛查试验基因诊断
- 人博卡病毒重组蛋白表达及间接酶联免疫法检测的建立
- 2016年
- 目的:原核表达并纯化人博卡病毒结构蛋白VP2,并建立间接酶联免疫法,用于病毒感染的检测。方法:本研究采用PCR法从菌种模板WHL-1扩增出人博卡病毒结构蛋白VP2基因片段,克隆至表达载体p ET28a中,转化到菌BL21(DE3),经过诱导产生融合蛋白,使用Western blot检测,并以该蛋白为包被抗原建立检测血清人博卡病毒的间接酶联免疫法。结果:重组原核表达质粒经双酶切鉴定构建正确,并可与人博卡病毒Ig G阳性血清发生特异性反应,建立的间接酶联免疫法最佳抗原包被浓度为2 mg/m L,血清的最佳稀释倍数为1∶200,封闭以1%BSA封闭效果最佳,酶标二抗的最佳工作稀释度为1∶4 000,工作时间最佳为1 h,该检测方法有较好的特异性和重复性。建立的间接ELISA方法Cut-off值为0.1,灵敏度为92%,特异性为98%,与对照试剂检测结果的符合率为97%。结论:原核表达并纯化了人博卡病毒结构蛋白VP2蛋白建立的间接酶联免疫法,为人博卡病毒的血清抗体检测方法提供了依据。
- 张允奇何涛君陆学东张银辉
- 关键词:人博卡病毒原核表达
- 梅毒血清学诊断的方法学比较
- 2004年
- 目的探讨梅毒非螺旋体抗原和特异性螺旋体抗体血清学试验对梅毒病人的筛查和确诊价值。方法比较RPR试验和Trust试验检测172例梅毒血清和228例对照血清非特异性心磷脂抗原的结果,比较TPPA法,ELISA法,免疫印迹法检测172例梅毒血清和228例对照血清梅毒特异性抗体的结果。结果对梅毒血清抗原的检测结果,进口RPR试剂检测阳性率为94.19%,国产RPR试剂检测阳性率为93.02%;对对照血清抗原的检测结果,进口RPR试剂20例阳性,国产RPR试剂4例阳性。进口与国产RPR试剂检测结果间没有显著性差异(P>0.05)。对梅毒血清抗原的检测结果,国产Trust试验试剂1、试剂2检测阳性率均为93.02%;对对照血清抗原的检测结果,国产Trust试验试剂1、试剂2均有4例阳性。Trust试验试剂1与试剂2检测结果间没有显著性差异(P>0.05)。对梅毒血清抗体的检测结果,TPPA法检测阳性率为83.72%,ELISA法检测阳性率为87.21%,免疫印迹法检测阳性率为100%;其中对一期梅毒血清抗体的检测结果,TPPA法诊断阳性率为73.08%,ELISA法为61.54%,而免疫印迹法为100%;对对照血清抗体的检测结果,均无一例阳性。TPPA法、ELISA法与免疫印迹法检测结果相比有显著性差异(P<0.01)。结论免疫印迹法具有高度敏感性和特异性。
- 张银辉陆学东张小艳
- 关键词:梅毒血清学诊断免疫印迹法
- 毛细管电泳仪检测 HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血筛查诊断中的价值被引量:2
- 2014年
- 目的:探讨全自动毛细管电泳系统检测 HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血筛查诊断中的应用价值。方法对经基因检测确诊的249例珠蛋白生成障碍性贫血患者和142例健康体检者进行毛细管血红蛋白电泳检测。以基因检测结果将研究对象分组,比较珠蛋白生成障碍性贫血组及各亚组与健康对照组 HbA2浓度的差异性,计算毛细管电泳系统检测HbA2在不同截断值时诊断α,β及α复合β珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值。结果健康对照组 HbA2均值为(3.03±0.27)%,α珠蛋白生成障碍性贫血组 HbA2均值为(2.38±0.55)%,其中静止型、标准型及血红蛋白 H病分别为(2.61±0.46)%,(2.47±0.32)%和(1.07±0.17)%;β珠蛋白生成障碍性贫血组为(5.65±0.47)%,其中β0杂合子和β+杂合子分别为(5.71±0.48)%和(5.56±0.43)%;α复合β型 HbA2均值为(5.7±0.82)%。与健康对照组相比,α珠蛋白生成障碍性贫血及其静止型、标准型、血红蛋白 H 病亚组 HbA2浓度明显降低(t值分别为11.73,5.02,12.91和33.46,P均<0.01),血红蛋白 H病组较静止型和标准型 HbA2浓度明显减低(t值分别为15.62和21.31,P<0.01),但静止型和标准型亚组之间无明显差异(t=1.50,P>0.05)。β珠蛋白生成障碍性贫血组及β0,β+亚组、α复合β珠蛋白生成障碍性贫血组 HbA2浓度明显升高(t值分别为55.12,44.33,38.94和9.10,P 均<0.01),β0,β+亚组之间,HbA2浓度无明显差异(t=1.79,P>0.05)。124例β珠蛋白生成障碍性贫血,毛细管电泳系统全部检出;117例α珠蛋白生成障碍性贫血,毛细管电泳系统只检出57例。分别以2.5%,3.5%为截断值,毛细管电泳系统检测单纯α,β珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为48.7
- 何英徐玉红张银辉杨来智陆学东
- 关键词:珠蛋白生成障碍性贫血毛细管电泳血红蛋白A2