孙一兵 作品数:5 被引量:4 H指数:1 供职机构: 湖南师范大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 湖南省教育厅科研基金 湖南省科技厅资助项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
EPS8蛋白的表达、多克隆抗体制备及其亚细胞定位 被引量:3 2008年 EPS8(EGFR pathwaysub strate 8)是epidermal growth factor receptor(EGFR)重要的激酶活性底物之一,近年有研究表明其与神经胶质瘤密切相关.为了对该基因进行深入的功能研究,成功地将EPS8基因构建于原核表达载体pGEX-4T-2,转化BL21(DE3)获得融合表达产物,用GST-EPS8(-10-230aa)免疫新西兰大白兔获得兔抗EPS8多克隆抗体.采用Western Blot,用该抗体检测EPS8基因的真核表达产物,证明该抗体有较好的针对EPS8蛋白的专一性,可用于对EPS8的结构和功能研究.同时,用该抗体通过荧光免疫细胞对4种神经胶质瘤细胞系进行定位分析发现,EPS8蛋白主要分布于胶质瘤细胞的细胞质中. 罗畅 丁小凤 孙一兵 韩梅关键词:亚细胞定位 运用染色质免疫沉淀技术筛选AP-2α的靶基因 2008年 在后基因组时代,DNA-蛋白质的相互作用是研究基因表达调控的一个重要领域.染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,简称ChIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法.对与ChIP有关的实验条件进行了优化,获得了较优的实验条件,并运用ChIP实验筛选出了转录因子activatorprotein-2alpha(AP-2α)的未知靶基因,对于进一步研究AP-2α的功能和调控网络打下了基础. 贺爱兰 肖湘文 孙一兵 刘如石 胡翔 周建林 张健关键词:靶基因 AP-2Α 人HTR1E基因在不同细胞系和多种组织中的表达及其功能 2007年 人的HTR1E基因是五羟色胺受体(HTR)家族中的一员.这个家族里面的基因都和精神分裂症、抑郁症以及人的自杀活动有关.但是对于其具体的作用机制目前研究不多.采用实时定量PCR方法分析了HTR1E基因在各个组织和不同细胞系中的表达情况,亚细胞定位发现HTR1E位于细胞膜上,萤光素酶实验分析确定HTR1E可以抑制原癌基因erbB2启动子的转录活性.这些研究结果为进一步研究HTR1E基因在疾病发生中的作用奠定了一定的基础. 吴艳阳 孙一兵 刘如石 甘露 刘明俊 贺爱兰 胡翔 周建林 张健关键词:表达谱 实时定量PCR 转录活性 乡村沼气池污泥微生物多样性的研究 被引量:1 2015年 为了优化沼气池产气效率和开展污泥微生物多样性研究,通过对PCR-DGGE条件的优化,建立了农村户用沼气池污泥微生物16S r DNA V3区DGGE分析技术,通过DGGE技术分析了沼气池污泥中细菌和古细菌微生物多样性随沼气池深度的变化规律。同时通过构建污泥样品mcr A功能基因克隆文库,应用RFLP技术,开展了农村户用沼气池污泥样品中与次级代谢产物相关基因的功能基因多样性研究。结果显示,农村户用沼气池污泥中含有丰富的微生物资源,其中细菌群落受污泥深度因素影响小,而浅层污泥中古细菌群落与深层污泥中古菌群落却存在明显差异。所采集的沼气池污泥中含有较为丰富的产甲烷菌资源,其中可能存在类似功能或产生类似代谢物质的产甲烷菌。该结果为进一步优化群落结构、筛选功能基因提供了科学依据。 李桑 张琳 邱义兰 刘胜姿 孙一兵 颜亨梅 郭向荣 刘如石关键词:农村户用沼气池 总DNA提取 微生物多样性 先天性心脏病突变体小鼠模型的建立 2021年 为研究AP-2α在发育过程中的特定调控作用,利用AP-2α-LacZ转基因小鼠FX18研究AP-2α与先天性心脏病的相关性。在FX18小鼠繁殖过程中,发现该小鼠稳定遗传的突变体,鉴定其基因型,测量体质量与心脏质量,HE染色和心电图观察其表型和检测心脏功能。研究结果表明:突变体小鼠在出生后4周左右即死亡,且在胚胎期就表现出明显的发育迟缓,出生后的体质量和心脏质量均仅为正常FX18小鼠的40%~60%,同时,HE染色和心电图检测结果显示,小鼠表现出较明显的左心室肥大和室性早搏,符合先天性心脏病中动脉导管未闭的特征。因此,成功发现和建立的该突变体小鼠可作为一个较好的研究先天性心脏病小鼠模型。 尹梓豪 孙一兵 向寿莲 张健 丁小凤 李立民关键词:AP-2Α 先天性心脏病