周莎莎
- 作品数:6 被引量:15H指数:2
- 供职机构:上海市儿童医院更多>>
- 发文基金:上海市卫生局科技发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- NELL2基因真核表达载体和microRNA干扰质粒的构建及其体外干预效应的研究
- 2011年
- 目的构建大鼠NELL2基因真核表达载体pcDNA3.1(-)-NELL2的microRNA(miRNA)干扰质粒,观察其转染体外细胞系后对NELL2 mRNA表达的干预效应。方法从SD大鼠下丘脑组织中提取总RNA,设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增NELL2基因全长cDNA,利用T载体将目的片段克隆至表达载体pcDNA3.1(-),得到重组质粒pcDNA3.1(-)-NELL2。针对NELL2基因分别设计4对pre-miRNA序列,通过T4连接酶克隆至pcDNA6.2-GW/EmGFP-miRNA表达载体构建干扰质粒(p-NELL2-miRNA1~4)。将p-NELL2-miRNA1~4分别与pcDNA3.1(-)-NELL2共转染人胚肾细胞系(HEK293)(p-NELL2-miRNA1~4干预组),采用Real-Time PCR技术检测转染后48 h细胞NELL2 mRNA表达;以转染pcDNA3.1(-)-NELL2细胞作为阳性对照组,以共转染pcDNA3.1(-)-NELL2和阴性对照干扰质粒pre-miRNA-neg细胞作为阴性对照组。结果酶切和测序鉴定结果表明:重组质粒pcDNA3.1(-)-NELL2和干扰质粒p-NELL2-miRNA的片段大小与预计相符,且克隆序列正确。Real-Time PCR结果显示:干预组细胞NELL2 mRNA表达显著低于阳性和阴性对照组(P<0.05或P<0.01)。结论成功构建NELL2基因真核表达载体及其microRNA干扰质粒,证实干扰质粒对HEK293细胞NELL2 mRNA表达具有特异性的抑制效应。
- 周莎莎李嫔
- 关键词:MICRORNA真核表达载体
- 复方逍遥合剂治疗肝郁化火证及复方地黄合剂治疗阴虚火旺证女童特发性性早熟临床观察被引量:13
- 2017年
- 目的:观察中药复方逍遥合剂,复方地黄合剂治疗女童特发性性早熟的有效性和安全性,并探讨其作用机制。方法:选取2013年9月—2015年8月,于上海市儿童医院门诊治疗的中医证型为肝郁化火证、阴虚火旺证女童特发性性早熟患儿共140例,每组证型分别随机设治疗组,对照组,各70例。肝郁化火证组予复方逍遥合剂口服,对照组予逍遥丸口服;阴虚火旺证组予复方地黄合剂口服,对照组予知柏地黄丸口服。治疗3个月,B超观察治疗后乳核变化,子宫、卵巢体积变化,3个月后记录黄体生成素(luteinising hormone,LH),卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH),雌二醇(estradiol,E_2),性激素结合球蛋白(sex hormone binding globulin,SHBG)水平变化,同时记录药物不良反应。结果:治疗组乳核直径、卵巢容积及子宫容积的减少均有明显缩小(P<0.05);SHBG值治疗后有明显升高(P<0.05);治疗过程中未发现不良反应。结论:复方逍遥合剂治疗肝郁化火证、复方地黄合剂治疗阴虚火旺证女童特发性性早熟临床疗效显著,且安全性可靠。
- 景晓平邹亚许丽雅吕拥芬周莎莎李嫔何丽
- 关键词:女童特发性性早熟黄体生成素性激素结合球蛋白
- 应用慢病毒载体介导RNA干扰(RNAi)技术动态研究不同发育期雌鼠下丘脑NELL2与GnRH基因及性发育的关系
- 通过慢病毒载体介导RNA干扰(RNAi)技术抑制幼年雌鼠下丘脑NELL2基因表达,动态的研究不同性发育阶段雌鼠NELL2 mRNA、蛋白表达变化,以及其对GnRH mRNA表达和阴门开启时间的影响。初步探讨NELL2调控...
- 周莎莎李嫔
- 关键词:下丘脑性发育
- 应用NELL2-microRNA慢病毒干扰载体动态研究不同发育期雌鼠下丘脑NELL2与GnRH基因及蛋白表达的关系
- 目的:初步探讨NELL2调控GnRH神经元进而参与性发育启动的可能机制。方法:针对大鼠NELL2基因,构建NELL2真核表达载体和4对microRNA干扰质粒,分别共转染HEK293细胞,实时荧光定量PCR检测NELL2...
- 周莎莎李嫔
- 关键词:性发育下丘脑蛋白表达
- 脑性盐耗综合征与抗利尿激素异常分泌综合征的鉴别被引量:2
- 2014年
- 脑性盐耗综合征和抗利尿激素异常分泌综合征在颅脑疾病相关的低钠血症中均占用一定比例.两种疾病临床表现极为相似,且易混淆,而治疗原则却大不相同.因此,正确鉴别两种疾病,对于临床患者的治疗及预后意义重大.该文从发病机制、诊断及治疗等方面对两种疾病进行鉴别.
- 周莎莎李嫔
- 关键词:脑性盐耗综合征抗利尿激素异常分泌综合征