吴晓薇
- 作品数：62 被引量：73H指数：4
- 供职机构：广东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目质检公益性行业科研专项项目广东出入境检验检疫局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 进口猪产品中莱克多巴胺残留的快速检测被引量：3
- 2011年
- 应用经验证可靠的ELISA方法,对进口猪产品进行莱克多巴胺残留快速筛选检测,对ELISA检测阳性的样品采用色谱质谱联用分析方法进行确证检测。1 330份猪产品的检测结果显示,采用ELISA方法检出阳性率达11.4%(152/1 330);对ELISA阳性样品采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)或气相色谱-质谱方法(GC-MS)确证,阳性率达90.8%(138/152)。检测工作表明,综合运用快速筛选检验技术与确证检测技术可实现快速准确检测动物产品中莱克多巴胺残留,提高进出境检验工作效率。
- 陈茹洪振涛吴晓薇王志元曾碧健刘志玲林志雄
- 关键词：莱克多巴胺猪产品ELISA高效液相色谱-串联质谱气相色谱-质谱
- 狂犬病病毒HEP-Flury株N基因的修饰及原核表达
- 2012年
- 为了高效表达狂犬病病毒HEP-Flury的核蛋白,选取抗原决定簇富集区,利用生物信息学技术分析了狂犬病病毒HEP-Flury N蛋白的核苷酸序列.根据大肠埃希菌Escherichia coli对密码子的偏嗜性,首先对所选取的核苷酸序列进行修饰、引入酶切位点,然后定向克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32-NP.将其转化表达宿主菌Escherichia coli BL21(DE3)pLysS,以IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE电泳,发现在相对分子质量34 000处有1条特异的蛋白带,与预期大小一致.Western-blotting检测结果显示,该蛋白可被鼠抗His单克隆抗体及犬抗RV多克隆抗体特异识别,表明所表达的N蛋白具有良好的免疫原性.
- 张良黄永亮官培英王怡飞徐晓娟吴晓薇郭霄峰
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白原核表达
- 广东省供港澳注册养殖猪场猪流感流行病学调查
- 2013年
- 为了解广东省辖区内84个活猪供港澳注册猪场中猪流感的感染情况,从2009年5月至2012年8月,收集各注册猪场的猪鼻拭子12 927份样品,采用荧光定量RT-PCR的方法进行A型流感病毒筛查,同时对A型流感样品采用H1和H3亚型流感病毒荧光定量RT-PCR的方法进行分型。结果 A型流感病毒核酸阳性样品396份,阳性率3.06%。其中H1亚型流感病毒核酸阳性样品142份,阳性率1.1%;H3亚型流感病毒核酸阳性样品12份,阳性率0.17%;H1N1亚型流感病毒核酸阳性样品有23份,阳性率0.32%。
- 吴晓薇陈茹刘志玲朱道中朱事康段燕喻林志雄
- 关键词：猪流感H3亚型
- 牛白血病病毒LUX^TM实时荧光聚合酶链式反应检测方法的建立被引量：4
- 2009年
- 采用LUXTM新型荧光PCR技术原理,设计并合成1对单标记LUXTM荧光引物,建立了LUXTM荧光PCR和RT-PCR方法,可快速检测牛白血病病毒(BLV)前病毒DNA和病毒RNA。结果显示所建立的LUXTM荧光PCR/RT-PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸,而对蓝舌病、牛病毒性腹泻-粘膜病、水泡性口炎、口蹄疫、牛流行热、牛传染性鼻气管炎等病毒核酸以及牛结核分支杆菌、大肠杆菌、健康动物组织核酸扩增均呈阴性反应。敏感性实验表明LUXTM荧光RT-PCR对RNA前病毒的检测敏感性达0.49 ng/μL,荧光PCR对pTblv-gp51重组质粒的检测敏感性可达0.138拷贝,比OIE规程的巢式PCR方法高104倍以上。采用该方法从血清学阳性临床牛血清中检出BLV阳性样品。
- 刘志玲陈茹马静云吴晓薇曾碧健林志雄
- 关键词：牛白血病病毒荧光PCR
- 一组快速检测牛、羊赤羽病病毒的等温扩增引物及其应用
- 本发明公开了一组快速检测牛、羊赤羽病病毒的等温扩增引物及其应用。所述引物的核苷酸序列分别如SEQ？ID？NO.1～4所示。本发明以样品RNA反转录获得的cDNA为模板，利用上述引物进行环介导等温扩增检测，反应结束后，可通...
- 鱼海琼贾坤罗长保赵吟田纯见吴晓薇陈芳罗琼刘志玲张敏
- 文献传递
- 检测犬源狂犬病毒中和抗体ELISA方法的建立被引量：4
- 2012年
- 为了有效监测犬免疫狂犬病疫苗后的保护效力,以狂犬病毒(Rabies virus,RV)糖蛋白的主要优势抗原表位区G3蛋白(RV G3)作为包被抗原,建立了一种检测狂犬病毒中和抗体效价的间接ELISA方法.通过优化反应条件,确定抗原最佳包被量为8 mg/L,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶3 000.特异性试验表明,该抗原不与犬瘟热病毒、犬腺病毒、犬细小病毒阳性血清发生交叉反应;批内和批间重复性试验的平均变异系数都小于10%;敏感性达1∶1 280.此方法检测134份血清样品的结果与美国SYNBIOTICS试剂盒相比,总符合率达95.6%.
- 傅秋玲郑佳琳林颖仪张莹阳佑天潘姣姣吴晓薇郭霄峰
- 关键词：狂犬病毒糖蛋白中和抗体间接ELISA
- 一种鉴别进境动物口蹄疫感染与免疫的试剂盒
- 一种鉴别进境动物口蹄疫感染与免疫的试剂盒，包含3块预包被ELISA微孔板：分别预包被有吸附T4噬菌体表面多拷贝展示的口蹄疫病毒3ABC抗原、吸附T4噬菌体表面多拷贝展示的口蹄疫病毒3B抗原、吸附T4噬菌体表面多拷贝展示的...
- 田纯见林志雄马静云罗琼鱼海琼罗长保陈茹刘志玲王宏吴晓薇毕英佐
- 文献传递
- 使用二重PCR方法快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究被引量：2
- 2011年
- 本研究以单核细胞增生性李斯特菌Hly基因和InlA基因作为靶序列设计2对引物,建立了检测单增李斯特菌的二重PCR方法。结果表明,该方法可以同时扩增出单增李斯特菌的Hly基因和InlA基因,而对大肠杆菌、沙门氏菌等食品中的常见致病菌和英诺克李斯特菌均不能扩增出任何条带,表现出良好的特异性。二重PCR方法的最低检测限为104CFU/mL,并能够用于鉴定实验小鼠攻毒后内脏器官的单增李斯特菌分离培养物。该方法表现出良好的特异性、敏感性和通用性,适用于单增李斯特菌的快速鉴别检测。
- 吴晓薇徐成刚李贺江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词：单增李斯特菌二重PCR
- 荷斯坦奶牛凝血因子Ⅺ缺乏症的PCR-DHPLC检测方法的建立
- 2013年
- 为了有效地检测荷斯坦奶牛凝血因子Ⅺ缺乏症,试验以制备的纯合突变、野生型基因为模板,优化PCR反应体系,制备异源双链体系,建立多聚酶链反应-变性高效液相色谱(PCR-DHPLC)的检测方法,确定最佳的检测条件,并用建立的方法对120个样本进行检测,再与传统的方法进行比较和验证。结果表明:所建立的PCR-DHPLC方法可以用于检测牛凝血因子Ⅺ缺乏症,与传统方法的检测结果一致。说明PCR-DHPLC方法是一种高通量、准确性高、特异性好的检测方法。
- 王振男吴晓薇梁梓森朱道中刘志玲刘中勇詹勋
- 关键词：携带者
- 病毒性神经坏死病病毒核酸检测用标准物质的制备被引量：5
- 2018年
- 利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒(Nervous necrosis virus,NNV)核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至p GEM-T载体;采用体外转录方法,获得大量纯品RNA。初步定量稀释至约10~8 copies/μL,均匀性检验结果显示样品间差异<5%;稳定性检验表明,室温(20~25℃)保存7 d、冷藏(2~8℃)保存1个月和冷冻(-20℃)保存6个月的含量均无明显变化。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法,对转录的RNA片段进行定值,并根据委托单位的定值结果进行不确定度估算。核酸标准物质定值为(8.452±0.068)×10~8 copies/μL,可用作NNV核酸检测的标准质控品。
- 段燕喻陈茹吴晓薇朱道中林志雄田纯见刘志玲
- 关键词：病毒性神经坏死病实时定量RT-PCR标准物质
