刘晓雷
- 作品数：84 被引量：81H指数：5
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生经济管理生物学更多>>
- 伪旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的原核表达及其纯化被引量：2
- 2014年
- 目的原核表达并纯化伪旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(Trichinella pseudospiralis serine protease inhibitor,Tpserpin)基因,并鉴定其抗原性。方法从伪旋毛虫肌幼虫提取总RNA,RT-PCR扩增Tp-serpin基因,插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-Tp-serpin,转化大肠埃希菌(E.coli)Rosetta gami(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析后,用Ni-NTA Agarose亲和层析纯化,纯化产物经SDS-PAGE分析纯度,Western blot鉴定反应原性。结果重组表达质粒pET-28a-Tp-serpin经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确,与GenBank中登录的Tp-serpin基因相似性达99%。表达的重组Tp-serpin蛋白相对分子量约43 000,表达量约占菌体总蛋白的40%,主要以可溶性形式存在;纯化后的重组Tp-serpin蛋白纯度达95%以上,可被伪旋毛虫感染60 d的猪血清特异性识别,具有较好的反应原性。结论成功构建了重组表达质粒pET-28a-Tp-serpin,并在E.coli Rosetta gami(DE3)中表达了重组蛋白,为旋毛虫病的血清学诊断候选抗原的研制及开发提供了科学依据,也为阐明serpin在伪旋毛虫入侵时期调节宿主免疫反应的作用奠定了基础。
- 王艳凤白雪刘晓雷王楠丁静刘明远
- 关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂原核细胞基因表达纯化
- 旋毛虫感染早期小鼠肠道病理变化及免疫调节相关细胞因子表达的研究被引量：5
- 2019年
- 目的探究旋毛虫感染早期如何诱导肠道病理变化及免疫调节相关细胞因子表达情况。方法 通过苏木素伊红染色方法观察旋毛虫感染BALB/c鼠早期4个关键时间节点肠道病理学变化,采用电化学发光免疫分析法(Meso Scale Discovery,MSD)检测感染早期肠系膜淋巴结相关细胞因子表达情况。结果 肠道病理学结果表明,肠粘膜增厚,嗜酸性粒细胞浸润,数量明显增多。MSD结果显示,感染后6 h肠系膜淋巴结Th1型细胞因子(IL-2)表达水平显著降低,其他细胞因子无显著变化;感染后3d至6d,Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)表达水平均显著升高,呈Th1/Th2混合型免疫应答。结论 旋毛虫感染后6 h至6 d肠道炎症随感染时间延长加重,感染后6 h Th1型免疫应答受到抑制,随后旋毛虫通过诱导机体产生以Th2型为主的混合型免疫应答,实现旋毛虫在机体内的长期寄生。
- 宋伊宁徐静庞建达王昕蕊刘晓雷刘明远孙树民
- 关键词：旋毛虫细胞因子免疫抑制
- 旋毛虫肌幼虫期丝氨酸蛋白酶抑制剂的B细胞表位多肽、杂交瘤细胞株、单克隆抗体及应用
- 本发明涉及免疫学领域，特别涉及旋毛虫肌幼虫期高表达的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Ts‑WM5)的B细胞表位多肽、杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用。本发明获得了可以分泌抗Ts‑WM5蛋白特异性抗体的杂交瘤细胞株，并鉴定出其所分泌的...
- 刘明远刘晓雷刘琰杨勇
- 抗2019-nCoV的抗体、制剂及其制备方法和应用
- 本发明适用于医药技术领域，提供了一种抗2019‑nCoV的抗体、制剂及其制备方法和应用，该抗体特异性地与2019‑nCoV病毒的spike蛋白受体结合区域抗原结合；所述2019‑nCoV病毒的spike蛋白受体结合区域抗...
- 刘明远刘晓雷孙岩松高玉伟
- 文献传递
- 一种过氧化物纳米酶-葡萄糖氧化酶双酶复合物、制备方法及其应用
- 一种过氧化物纳米酶‑葡萄糖氧化酶双酶复合物、制备方法及其应用，属于生物技术领域。本发明针对现有化学药物的不足，以生物酶活性为设计理念，以纳米酶为基底，将天然酶(葡萄糖氧化酶)和纳米酶(MOF‑Fe)通过PEG偶联，形成自...
- 李辰刘晓雷刘明远李正强张闯郝志立
- 一种P(NIPAM-co-AM)负载金丝桃素水凝胶的制备方法及其应用
- 本发明涉及一种以P(NIPAM‑co‑AM)为载体的金丝桃素复合水凝胶的制备方法及其应用，属于医药材料技术领域。将N‑异丙基丙烯酰胺单体、丙烯酰胺溶解在去离子水中，加入交联剂和引发剂于上述溶液，形成水凝胶前体溶液；将金丝...
- 王学林谢凌锋孙琳刘晓雷唐斌丁静白慧芳吴小霞江宁陈国梁张姝妍王赛宁党倩倩
- 引物组合、异尖线虫的检测试剂或试剂盒
- 本发明涉及生物领域，特别涉及引物组合、异尖线虫的检测试剂或试剂盒。本发明根据获得的五种异尖线虫的ITS区通过DNAMAN进行序列比对设计通用引物。本发明建立的RPA方法可扩增出异尖线虫基因组的目的片段在340bp左右，可...
- 刘明远刘晓雷白雪杨勇唐斌李辰张春玲
- 文献传递
- 一种检测炭疽芽孢杆菌的引物组、试剂盒及检测方法
- 一种检测炭疽芽孢杆菌的引物组、试剂盒及检测方法，本发明属于检测技术领域，具体涉及检测炭疽芽孢杆菌的方法及成套试剂盒。本发明通过一套基于RPA‑CRISPR‑Cas12a检测炭疽芽孢杆菌的成套引物组制备和试剂盒设计了一种炭...
- 李辰刘晓雷方一鸣刘明远宁琴丁静郭学军王晓晶李媛媛
- 旋毛虫感染诱导的宿主免疫对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响
- 2020年
- 为了探究旋毛虫感染诱导的宿主免疫对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响,试验随机将100只Balb/c小鼠分成空白组、旋毛虫组、荷瘤组、旋毛虫+荷瘤组,每组25只。旋毛虫+荷瘤组小鼠在感染旋毛虫后的第7天(试验第7天)接种小鼠肝癌H22细胞,荷瘤组与旋毛虫+荷瘤组小鼠接种肝癌H22细胞的时间相同。在试验第28天,荷瘤组和旋毛虫+荷瘤组均处死10只小鼠用于计算抑瘤率。在试验的第7,14,21,28,35天每组各处死3只小鼠并收集脾细胞进行培养,采用ELISA法和实时荧光定量PCR技术对各组小鼠脾脏中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的表达量进行检测。结果表明:与荷瘤组相比,旋毛虫+荷瘤组的抑瘤率为62.65%(P<0.05),旋毛虫感染有效抑制了H22肿瘤的生长。旋毛虫+荷瘤组IL-2、IFN-γ的表达量于第7,14,21天明显升高,与空白组和荷瘤组相比差异显著(P<0.05);旋毛虫+荷瘤组IL-4的表达量总体呈逐渐升高趋势。说明旋毛虫感染早期诱导宿主产生Th1细胞因子IL-2、IFN-γ以及后期诱导宿主产生Th2细胞因子IL-4可能抑制肿瘤的进一步发展。
- 李仕存丁静刘晓雷唐斌白雪王学林
- 关键词：旋毛虫H22荷瘤小鼠抑瘤率
- 2D-DIGE技术对microRNA tsp-Novel-46调控的旋毛虫排泄分泌产物的研究被引量：1
- 2015年
- 成熟的microRNA（miRNAs）是一类大小为22-24 nt的小RNA分子转录调节单元。过去10年中,研究人员发现了许多关于miRNAs生物起源和功能的基本机制。对寄生线虫miRNAs的研究（如旋毛虫和捻转血矛线虫）显示,特定的microRNA表达量变化与寄生虫特定生活阶段有关。
- 孙尧刘晓雷丁静王安琪徐静孙召金王楠刘菁李婷婷高鹤白雪李庶东刘明远
- 关键词：MICRORNADIGE寄生线虫捻转血矛线虫转录调节生物起源
